专利名称：一种交叉阶段式培养银耳孢子生产多糖的方法银耳(Tremella fuciformis)为层菌纲、银耳科、银耳属高等真菌。银耳的主要药 用成份是多糖，主要包括酸性多糖、中性杂多糖、酸性低聚糖、胞壁多糖等。银耳多糖具有 强心、延缓衰老、抗血栓、降血脂、降血糖、抗肝炎、抗突变、抗肿瘤、提高免疫力、抗辐射等功 效。银耳多糖在医药、美容、保健食品等领域具有广泛的应用。银耳多糖可以从银耳子实体 分离获得，也可以通过分生孢子深层发酵法生产。由于发酵成本低、多糖纯度高，深层发酵 法正逐步取代组织提取法。目前对分生孢子发酵法生产银耳多糖的研究主要集中于发酵条 件的优化，如培养基的优化，反应器的设计优化以及发酵参数优化。对于银耳多糖发酵而 言，培养方式对银耳多糖产量的提高至关重要。本实验室早前已对培养方式对银耳多糖产 量的影响进行了深入研究。本发明在此基础上进行交叉阶段式培养，满足不同生长阶段，银 耳分生孢子对溶氧及剪切力的需求，促进产物多糖的生成。这种利用三阶段交叉培养方式 提高银耳多糖的产量，尚未见文献报道，因此具有很好的发展前景。
本发明的目的是提供一种三阶段交叉培养方式提高发酵生产银耳多糖的方法，利 用本发明能显著提高银耳多糖的产量。本发明的技术方案(1)菌种Tremella fuciformisACCC50546购于中国农业微生物菌种保藏管理中 心。(2)培养基以g/L计保藏培养基(PDA培养基)马铃薯200，葡萄糖20，琼脂15。种子培养基葡萄糖20，蛋白胨2，酵母粉2，MgSO4 · 7H20 0. 5，磷酸二氢钾0. 46，磷酸氢二钾1。发酵培养基葡葡萄糖20，蛋白胨2，酵母粉2，MgSO4 ·7H20 0.5,磷酸二氢钾0. 46， 磷酸氢二钾1。(3)制备工艺菌种保藏所用菌种保藏在保藏培养基斜面上，4°C保存，两月转接一次。种子培养从保藏培养基上转入种子培养基需活化两次，每次培养3天。交叉阶段式培养过程先利用旋转式摇床培养银耳分生孢子1. 5d，然后将三角瓶 转入往复式摇床继续培养1. 5d，最后再将三角瓶转回旋转式摇床培养1. 5d，整个培养过程 的培养温度为^°C，转速为200rpm。培养结束后，收获银耳孢子和发酵液。用此三阶段交 叉培养方式，银耳多糖产量得到显著提高，其产量提高到5. 80g/L，而对照实施例的产量分别为 1. 61 和 1. 69g/L。本发明的有益效果利用本发明能显著提高银耳多糖产量。本发明所提供的三阶 段交叉发酵培养工艺简单、高效，有着重要的工业应用价值，同时对其它真菌多糖的发酵法 生产具有一定的指导和启迪意义。本发明公开了一种交叉阶段式培养银耳孢子生产多糖的方法，这种培养方法的内容包括发酵培养过程分为三个阶段，不同阶段分别置于同一转速的旋转式和往复式摇床上进行交叉培养。应用本发明的方法培养银耳分生孢子，可以高效率生产银耳多糖，多糖产量可达5.80g/L。本发明所述的方法为一种更加具有工业化前景的生产方法，从而为工业化经济生产银耳多糖奠定基础。