专利名称：一种复方利福平制剂的处方组成的制作方法 结核病是严重危害人民健康的慢性传染病，80年代中、后期以来全球疫情急剧恶化形成新的升高峰。据世界卫生组织(WHO)公报(2001年)最新估计，全球每年有800万结核新病人发生。至少有200万结核病人死亡。80％的结核病例发生在22个结核高负担国家，它们大多数在亚洲和非洲。我国亦是结核病高发的国家之一，2000年河南省按照卫生部要求，进行了全省第四次结核病流行病学抽样调查，结果显示，疫情的特点为高患病率，高死亡率，高感染率，低递降率。估计河南省至少有3000万人已受结核菌感染，现有活动性肺结核病人约46万，每年死于结核病者9300余人。结核病高发的原因是肺结核病患者未及时、准确的诊断和彻底治愈。由于没有彻底治疗，结核菌对药物产生抗药性，致使疾病的传染、蔓延。控制结核病流行的最重要措施是消除传染源。消除传染源的关键是及时准确的诊断与彻底治疗，为了指导国内结核病和相关学科医务工作者对结核病的诊断和治疗，中华医学会结核病学分会制定了《肺结核诊断和治疗指南》，其中规定了耐多药结核的定义，推荐了初治、复治、耐多药肺结核的常用治疗方案，强调了不住院条件下肺结核治疗管理和推行医务人员直接督导下的短程化疗，取得了一定的成效。但是，结核病不规范治疗及“只治不管”是引起耐多药的根源。一、90年代中期以来，WHO推荐采用多种少量药物配伍疗法(固定剂量联合疗法简称FDCS)，但一直末被各国采用，而近年来这种疗法已成为便宜而更能接受的疗法，受到各国普遍欢迎。一些国家已开发FDCS制剂上市。而我国近几年来亦开发了几个品种的FDCS制剂，如利福平与异烟肼，二联复方制剂与利福平、异烟肼、吡嗪酰胺的三联复方制剂。进口了RIFATER和RIFINAH。前者为利福平、异烟肼和吡嗪酰胺的三联制剂，后者为利福平和异烟肼的二联制剂，但是，这些药物不符合WHO推荐的强度。1998年WHO对抗结核药市场调查表明，市场上存在多种不同强度的FDCS制剂，许多是不符合WHO推荐的强度，这种状态可能产生紊乱，难以达到正确治疗方案。比较不同厂家的产品，提示FDCS制剂的强度缺乏标准化。因此WHO和抗结核与肺病国际联合会(IUATLD)提出FDCS标准化的问题。1998年8月在日内瓦举行的WHO技术研究与顾问委员会上推荐了4药FDCs与儿童的FDCs用药方案，2001年第79卷第1期WHO公报重新公布了上述方案。对这些制剂的强度的推荐是世界结核病专家根据生物利用度研究与以前由WHO公布的基本抗结核药物被广泛接受的推荐剂量(mg/kg体重)一致决定的。下面列出WHO(2001年)公布推荐的剂量。1、基本抗结核药推荐的剂量(每公斤体重的用量)抗结核药 作用方式 推荐剂量(mg/kg)每天 3次/每周异烟肼(H) 杀菌 5(4-6) 10(8-12)利神平(R) 杀菌 10(8-12) 10(8-12)吡嗪酰胺(P)杀菌 25(20-30) 35(30-40)乙胺丁醇(E)抑菌 15(15-20) 30(25-35)链霉素(S) 杀菌 15(12-18) 15(12-18)氨硫脲(T) 抑菌 2.5不用括号内数字是剂量范围mg/kg基本抗结核药FDCS制剂推荐的强度药物 剂型 强度每天应用利福平+异烟肼+吡片剂R150mg+H75mg+2400mg+E275mg嗪酰胺+乙胺丁醇利福平+异烟肼+吡片剂R150mg+H75mg+2400mg嗪酰胺 R60mg+H30mg+I150mg(儿童用)利福平+异烟肼 片剂R300mg+H150mgR150mg+H75mgR60mg+H30mg(儿童用)异烟肼+乙胺丁醇 片剂H150mg+E400mg间歇应用(每周3次)利福平+异烟肼+吡片剂K150mg+H150mg+2500mg嗪酰胺利福平+异烟肼 片剂R150mg+H150mgR60mg+H60mg(儿童用)3、FDCS的WHO推荐强度的成人用量(片数)病人体重(kg) 初始期 连续期2个月 4个月6个月RHZE每天 RHZ每天 RH每天 RH每周3次 EH每天30-37 22221.538-54 3333255-70 44443≥71555534、FDCS的WHO推荐强度的儿童用量(片数)病人体重(kg)初始期2个月 连续期4个月RHZ每天 RH每天RH每周3次≤7 1 1 18-9 1.5 1.5 1.510-14 2 2 215-19 3 3 320-24 4 4 425-29 5 5 5FDCS制剂与单药剂型相比，单药型每天服大量药片，治疗初始期通常服用9-16片，2个月，随后(连续期)再服3-9片，4-6个月。而FDCS片只需服3-4片。另外，单药剂型病人易服错或少服而FDCS制剂计算剂量简单不会服错少服。FDCS由于用药量减少，不良反应发生率减低，并且FDCS制剂可以预防抗药性。由上述可见WHO推荐的FDCS已经大幅减少了用药量，但是，现在市售的FDCS包括我国已批准的抗结核FDCS药物，强度不够，不但影响疗效而且可能会产生抗药。所以必须开发符合WHO推荐强度的FDCS制剂。二、FDCS制剂的质量，亦是抗结核治疗的关键，WHO指出FDCS片剂的制剂质量问题是保证利福平的生物利用度基础。已知当利福平联合其它药物在同一制剂中时，如果制剂的生产制造操作没有严格控制，利福平的生物利用度受到负影响。因此，WHO的调研指出现在正在上市的相当数量的FDCS制剂，到目前为止，它们的利福平的生物利用度是低于WHO的标准的，为了强调此问题，WHO正在验证一些实验室对FDCS制剂开展生物利用度/等效性试。目前已有两个实验室已被WHO论证，并已对FDCS制剂的2、3与4联的药剂制剂进行了试验。2001年国际结核病与肺病杂志，发表了Laserson，K.F等人的调查报告，他们对全球市场上的抗结核药抽样检查，从哥伦比亚、Esfonia、印度、拉脱维亚、俄国和越南收集样品。对单药与FDCS制剂用最近开发的薄层层析分析试验盒分析样品。同时世界疾病控制与预防中心(CDC)开展的TLC检查及美国FDA的TLC检查，以及对利福平的UV测定和对异烟肼的HPL测定。检查结果显示4联药FDCs制药均不合格，利福平含量仅为74.7％。3联药FDCS制剂品抽查1个，CDC的TLC检查不合格，FDA的TLC检查合格。利福平与异烟肼两联药FDCs共抽查21个。CDC的TLC检查不合格11个，FDA的TLC检查不合格3个。本调查仅对药品含量进行分析。而这些药物的生物利用是否合格还是问题。所以制备FDCS制剂时，把几种药物混在一起，制出合乎质量要求，特别是符合生物利用度要求的FDCS制剂，难度较大。三、利福平在酸性介质中水解形成不溶的难吸收的3-甲酰利福霉素SV，在异烟肼存在下，加速利福平的水解。1999年，Shishoo，C，J等，作了异烟肼存在下利福平在溶出介质中的稳定性的研究。他们将0.1N HCl溶液200ml置于USP规定的溶出度仪的2号容皿中，加入精确称量的利福平150mg溶于0.1N HCl 100ml。从0分钟时抽取样品，以后每隔15分钟抽取样品一次至60分钟。样品用氯仿萃取，用双波长分光光度法与HPTLC测定利福平与3-甲酰利福霉素SV的含量。同样的用利福平与异烟肼的混合物，按上述方法进行对比试验与测定。另外，对一些市售的利福平与利福平-异烟肼制剂，按上述方法进行了试验与测定。试验结果表明利福平在0.1N HCl溶液中不稳定，发生降解。在异烟肼存在下，利福平在0.1N HCl溶液中更不稳定，降解速率比利福平单独存在时几乎增加2倍多。利福平在0.1N HCl溶液中以一级速率常数(K)2.1×10-3min-1降解形成3-甲酰利福霉素SV。在异烟肼存在下，降解加速，K值为4.6×10- 3min-1。
对市售的利福平与利福平-异烟肼制剂的溶出介质中稳定性的研究，试验观察到利福平制剂在45分钟时，降解12.4％，形成3-甲酰利福霉素SVC。而利福平-异烟肼制剂，在异烟肼存在下，利福平的降解被催化，45分钟降解大约21.5％。由于3-甲酰利福霉素SV在胃中难以吸收，因此，利福平在酸性介质中的降解影响到利福平的生物利用度。鉴于以上事实，调查报告建议利福平制剂最好制成小肠上部释放。
我们为了验证Shishoo，C，J等的上述试验的结果，我们进一步作了利福平与利福平+异烟肼在0.1m HCl溶液(相当于胃液的酸度)中的稳定性试验与利福平与利福平+异烟肼在PH6.8磷酸盐缓冲液(小肠上部的pH)中的稳定性。同时还进行了利福平+吡嗪酰胺、利福平+乙胺丁醇、利福平+吡嗪酰胺+乙胺丁醇+异烟肼在上述两种不同pH条件下的稳定性试验，测定方法用HPLC外标法，测定对象是利福平的百分含量，测定结果如下两表所示(下表中A组为利福平、B组为利福平+异烟肼、C组为利福平+吡嗪酰胺、D组为利福平+乙胺丁醇、E组为利福平+吡嗪酰胺+乙胺丁醇+异烟肼)在pH＝0.1溶液(相当于胃液)中利福平的降解情况
在pH＝6.8溶液(相当于小肠上部)中利福平的降解情况
Shishoo，C，J等用UV法仅进行了酸溶液的稳定性试验，我们用HPLC法进行了酸溶液和中性溶液的稳定性试验。利福平在酸中的降解程度两种试验虽有差别，但降解的趋势和加入异烟肼后的降解趋势两种试验的结果是一致的。同时从上面的试验还可以看出，吡嗪酰胺和乙胺丁醇对利福平的降解也有一点加速作用。但在中性溶液中，利福平的降解得到了明显的控制，这验证了Shishoo，C，J等的利福平制剂最好制成小肠上部释放建议的正确性。
根据上述情况，目前对抗结核药FDCS制剂必须强调以下的要求1、必须有足够的强度，按WHO最新规定的剂量和用法，才能彻底治愈结核病，防止抗药性的产生。2、必须严格控制制剂的质量，在制备过程中要考虑复方药物间的相互影响，采取一定的措施，避免这种影响。3、必须考虑利福平的生物利用度。WHO特别指出FDCS制剂主要问题是利福平的生物利用度。根据上面试验，利福平在酸性介质中容易降解，而同时存在异烟肼时，将加速利福平的降解，因此新的FDCS制剂应避免利福平在胃溶液中的降解。
但是，目前市场上销售的抗结核FDCS制剂，几乎没有符合上述要求的FDCS制剂。我们考虑到我国现状，认为有必要研究开发符合WHO规定的剂量强度，避免药物间影响与高生物利用度的FDCS制剂。基于以上原因，我们依据WHO最新推荐的FDCS剂量，研发了利福平+吡嗪酰胺+乙胺丁醇+异烟肼4联复方抗结核胶囊剂。为解决利福平的降解问题，我们采用了利福平单独压片，包肠溶衣及避光剂、将异烟肼与吡嗪酰胺制成小丸包胃溶速释衣、将乙胺丁醇压片、最后将利福平肠溶片，乙胺丁醇胃溶片及异烟肼和吡嗪酰胺胃溶小丸同装于同一胶囊内制成了新型的抗结核四联复方利福平胶束。很高兴的是现代制药机械的发展为将两种片剂和一种小丸剂同装于一粒胶囊中提供了机械化技术，使我们的设想有了工业化生产的保障。新的FDCS制剂完全按WHO规定的剂量强度，避免药物间的相互作用及利福平肠道溶解，也必将保障利福平的生物利用度。该药目前已完成新药临床前研究，即将申报我国药政部门审批。依据上述思想，还可生产复方利福平两联、三联的FDCS制剂。
1994年6月14日，刘仁明先生率先考虑到利福平+吡嗪酰胺+乙胺丁醇+异烟肼4联复方抗结核制剂的优点，并申报了国家实用新型专利，并于1996年3月20日得到批准(申请号为94214080.X)。遗憾的是专利人尽管考虑到两联、三联、四联多种胶囊填充方法，但始终是将利福平用粉末直接填充，因而无法对利福平的降解起到阻止作用，与目前提出的最先进的FDCS制剂基本要求失之交臂。目前，国内还没有任何四联FDCS制剂获得国家批准，也没有见到有关四联FDCS制剂方法、方案的研究报道，因此我们提出的FDCS制剂方法具独创性。最重要的是符合WHO对结核病治疗的标准化的剂量强度，避免FDCS制剂中的关键药物—利福平在胃液中的降解，使之发挥更好的疗效，使结核病人得以彻底治愈解除病痛。刘仁明先生在申报“一种复方口服胶囊”是按实用新型专利进行申报，专利的实质是几种药品在胶囊中装填方法的式样。Shishoo，C，J等虽然提出了利福平制剂最好制成小肠上部释放，但没涉及到复方的组成和制剂的制备方法。WHO虽然推荐核病治疗的多种少量药物配伍疗法和认识到利福平在FDCS制剂中受到其他药物的影响但没提出解决的办法。我们的发明是将利福平先制作成肠溶制剂以后，再与其他药配物制作出新的单一制剂。我们认为本发明是一种FDCS制剂方法的发明，所以按发明专利申报。
发明简述 将利福平制成肠溶制剂后与异烟肼、吡嗪酰胺、乙胺丁醇配伍形成单一的制剂，这一制剂可以是利福平与异烟肼配伍，还可以是利福平与异烟肼、吡嗪酰胺配伍，还可以是利福平与异烟肼、吡嗪酰胺、乙胺丁醇配伍。
发明详述 依据世界卫生组织(WHO)推荐的结核病治疗的多种少量药物配伍疗法(又称固定剂量联合疗法，简称FDCS)的关于利福平、异烟肼、吡嗪酰胺、乙胺丁醇的剂量，将利福平制成肠溶制剂后再与异烟肼、吡嗪酰胺、乙胺丁醇配伍形成单一的制剂，这一制剂可以是利福平与异烟肼配伍，还可以是利福平与异烟肼、吡嗪酰胺配伍，还可以是利福平与异烟肼、吡嗪酰胺、乙胺丁醇配伍。其特点是利福平在配物制剂中是以肠溶制剂的形式出现，利福平可以是肠溶片、肠溶小丸、肠溶微丸、肠溶微囊等。利福平的肠溶制剂与其它药物异烟肼、吡嗪酰胺、乙胺丁醇(异烟肼、吡嗪酰胺、乙胺丁醇可以是胃溶的颗粒、粉末、微囊、微丸、小丸、小片剂或肠溶的颗粒、粉末、微囊、微丸、小丸、小片剂)配伍的最终的剂型是形成单一的口服剂型，例如胶囊剂、颗粒剂、片剂、多层片、混悬剂等。
下面的实施例用于进一步说明本发明，但不意味本发明仅限于此。举例一种四联复方利福平胶囊的研制(一)利福平肠溶片的处方与制备工艺(1)利福平素片(片芯)的处方与工艺(A)处方利福平 75.0g微晶纤维素 20.0g低取代羟丙基纤维素 20.0g淀粉 20.0g十二烷基硫酸钠 6.5g10％淀粉浆 适量硬脂酸镁 适量制成 1000片(B)制备工艺将上述原料、辅料过200目筛，正确按处方量称取，混合均匀，加10％淀粉奖(约8～9ml)，制成软才，过26目筛制粒。置烘箱中60℃干燥2小时，取出用26目筛整粒，再过60目筛，颗粒率75％以上。将筛下细粉与硬脂酸镁混匀后再与颗粒混匀，压片，控制片重在140mg～160mg之间。
按中国药典(2000年版)二部附录XG片剂脆碎度检查法、XA崩解时限检查法和IA片剂项下的重量差异限度检查法对利福平素片检查，符合要求后进行含量测定检查，合格者进行包衣。(2)肠溶衣液的处方与配制方法及包衣工艺(A)肠溶衣的处方羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯 10.0g邻苯二甲酸二乙酯 1.0g滑石粉10.0g丙酮/乙醇(3∶7)液 200ml(B)肠溶衣液的配制方法正确称取处方量的羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯，加丙酮/乙醇液200ml溶解，加入邻苯二甲酸二乙酯混匀溶解，再加滑石粉搅拌均匀即得。(C)包衣工艺正确称取片芯置包衣锅内，滚动包衣锅，边喷肠溶衣液，边吹热风，包至片重增加至10％左右，取出置烘箱60℃干燥1小时。取出，检查本品的释放度在0.1M盐酸溶液中2小时的释放量应小于10％、在磷酸盐缓冲液(PH6.8)中2小时的释放量应大于70％，合格后进行着色包衣。(3)着色包衣液的配制方法与包衣工艺(A)着色包衣液的配制方法取水100ml于烧杯内，再搅拌下撒入欧巴代03B 12g，继续搅拌30～40分钟使成均匀红色不透明的桨状混悬液。(B)包衣工艺将包过肠溶衣的片芯置包衣锅内，边喷着色衣液，边吹热风，包至片芯增重3％左右。置烘箱60℃干燥1小时。取出，检查本品的释放度在0.1M盐酸溶液中2小时的释放量应小于10％、在磷酸盐缓冲液(PH6.8)中2小时的释放量应大于70％。(二)乙胺丁醇片的处方与制备工艺(1)处方乙胺丁醇 137.5gPVP 适量硬脂酸镁 适量制成 1000片(2)制备工艺正确称取PVP 6g，加70％乙醇液60ml溶解。正确按处方称取乙胺丁醇137.5g，加上述10％PVP溶液(约用10％PVP溶液50ml)制成软材，过26目筛网制粒，置烘箱60℃干燥2小时，取出过26目筛整粒，再过60目筛筛出细粉，颗粒应在70％以上。将细粉与硬脂酸镁(取硬脂酸镁的量为原料药的0.4％左右)混合均匀，再与30～60目筛的颗粒混匀。选择7.5mm的冲模在压片机上压片，控制片重在140mg～155mg之间。
按中国药典(2000年版)二部附录XG片剂脆碎度检查法、XA崩解时限检查法和IA片剂项下的重量差异限度检查法对乙胺丁醇片检查，符合要求后进行含量测定检查。(三)异烟肼、吡嗪酰胺包衣小丸的处方与制备工艺(1)异烟肼、吡嗪酰胺小丸的处方与制备工艺(A)处方异烟肼 37.5g吡嗪酰 200.0g淀粉30.0gPVP 适量使成相当于装1000粒胶囊的小丸(B)制备工艺正确称取PVP 9g溶于70％乙醇60ml中。正确称取处方量的异烟肼、吡嗪酰胺、淀粉混合均匀，加上述15％PVP乙醇溶液(约用50ml)制成软材，过32目筛，置包衣锅中，以转速为80～90转/分钟的转速滚动30分钟，取出，置烘箱60℃干燥2小时。检查小丸的园整性、硬度、表面光滑性与含量应符合规定。(2)包衣液的制备与包衣工艺(A)包衣液的配制正确称取PVP 6g，PEG6000 9g，溶于70％乙醇60ml中，(10％PVP、15％PEG的溶液)即得包衣液。(B)包衣工艺将干燥后的小丸置包衣锅内，滚动包衣锅，转速为90转/分钟，边喷包衣液边吹热风，将小丸包至增重3％左右，取出置烘箱60℃干燥1小时。检查小丸的园整性、硬度、表面光滑性与含量应符合规定。(四)胶囊的填充首先按处方量称取异烟肼、吡嗪酰胺包衣小丸(相当于异烟肼37.5mg、吡嗪酰胺200mg)装于特0号不透明胶囊中，再各取利福平肠溶片1片(相当于利福平75mg)和乙胺丁醇片1片(相当于乙胺丁醇137.5mg)装与胶囊内，压封上胶囊盖即得。目前已有4工位胶囊填充机可实现上述3种不同原料的胶囊填充。


将利福平制成肠溶制剂后与异烟肼、吡嗪酰胺、乙胺丁醇配伍形成单一的制剂，这一制剂可以是利福平与异烟肼配伍，还可以是利福平与异烟肼、吡嗪酰胺配伍，还可以是利福平与异烟肼、吡嗪酰胺、乙胺丁醇配伍。