专利名称：一种牛膝三萜皂苷的提取工艺的制作方法牛膝(Radix Achyranthis Bidentatae)为苋科牛膝属植物牛膝的根。具有补肝肾、强筋骨、活血通经、引火下行、利尿通淋的功效，用于腰膝酸痛、下肢痿软、血滞经闭、痛经、产后血瘀腹痛、癥瘕、胞衣不下、热淋、血淋、跌打损伤、痈肿恶疮、咽喉肿痛等症。根含皂苷，主要为三萜皂苷，另含有免疫活性的牛膝肽多糖等。王丽景发表的“牛膝指纹图谱和牛膝皂苷的提取及其药理作用的研究”，研究表明牛膝皂苷有兴奋子宫、抗生育作用，抗肿瘤作用，心血管药理作用以及抗炎、镇痛作用等。目前，牛膝皂苷的提取纯化方法很少，多采用醇提正丁醇萃取法，该方法存在成本高、有机溶剂毒性残留的缺点。已有研究发现，用大孔吸附树脂富集，纯化黄芪、人参等总皂苷效果较理想。如中国专利(申请号为201010191221. 3) “牛膝皂苷的提纯方法”，该专利公开的方法是以牛膝为原料，选用大孔吸附树脂富集纯化，用DlOl大孔吸附树脂柱吸附的流程式方法对牛膝的有效成分进行分离提取，得到牛膝皂苷。
针对上述现有技术，本发明所要解决的问题是提供一种牛膝三萜皂苷的提取工艺。本发明中，所述牛膝三萜皂苷提取物中，三萜皂苷的含量为85. 0-94. 0 %。本发明是通过以下技术方案实现的一种牛膝三萜皂苷的提取工艺，其特征在于包括以下步骤(1)提取将牛膝药材粉碎，按重量比加入5-12倍热水，超声提取，频率为 30-45kHz，提取2-4次，每次1_2小时，合并提取液；(2)分离上述提取液通过大孔吸附树脂柱层析，以蒸馏水洗脱杂质，再用 15-60%醇溶液洗脱，并用薄层层析法检识，收集40-60%醇溶液洗脱液；(3)活性炭脱色将上述醇溶液洗脱液加入药用活性炭，加热回流，趁热过滤，得到脱色液；(4)结晶将上述脱色液浓缩得浸膏，热水溶解，放置结晶，无水乙醇重结晶，滤出结晶，喷雾干燥即得高纯度牛膝三萜皂苷。步骤(1)中热水温度为60_100°C。步骤( 所述大孔树脂型号可选AB-8、HP100、D180、X_8中的一种，洗脱用醇溶液为乙醇溶液或甲醇溶液。步骤(3)中药用活性炭用量为0.5% -1.0% (w/v)。本发明的提取工艺采用超声提取，提取时间短，提取率高，以水为溶媒对牛膝三萜皂苷进行提取，提取液经大孔吸附树脂法进行纯化处理，除去大量糖类杂质，收集不同浓度乙醇的洗脱物，经过活性炭脱色，重结晶得到牛膝三萜皂苷，具有步骤简单、无污染、得率高、成本低的优点。进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例1 将牛膝药材粉碎，取1kg，加入5倍热水，热水温度为100°C，超声提取，频率为 45kHz,提取4次，每次1小时，过滤，合并提取液，通过AB-8大孔吸附树脂柱层析，以3L 蒸馏水洗脱杂质，再用15^,30^^45^^60%甲醇溶液洗脱，并用薄层层析法检识，收集 40-60%醇溶液洗脱液，加入0.5% (w/v)药用活性炭，加热回流，趁热过滤，滤液浓缩得浸膏，热水溶解，放置结晶，过滤，将结晶用无水乙醇回流溶解，放冷结晶，滤出结晶，喷雾干燥即得高纯度牛膝三萜皂苷。实施例2 将牛膝药材粉碎，取^ig,加入12倍热水，热水温度为80°C，超声提取，频率为 35kHz,提取2次，每次2小时，过滤，合并提取液，通过X-8大孔吸附树脂柱层析，以IOL 蒸馏水洗脱杂质，再用20%、30%、40(%、50(%乙醇溶液洗脱，并用薄层层析法检识，收集 40-60%醇溶液洗脱液，加入0.6% (w/v)药用活性炭，加热回流，趁热过滤，滤液浓缩得浸膏，热水溶解，放置结晶，过滤，将结晶用无水乙醇回流溶解，放冷结晶，滤出结晶，喷雾干燥即得高纯度牛膝三萜皂苷。实施例3 将牛膝药材粉碎，取^g，加入6倍热水，热水温度为60°C，超声提取，频率为 30kHz，提取3次，每次1小时，过滤，合并提取液，通过D180大孔吸附树脂柱层析，以12L 蒸馏水洗脱杂质，再用15^,30^^40^^60%乙醇溶液洗脱，并用薄层层析法检识，收集 40-60%醇溶液洗脱液，加入0.8% (w/v)药用活性炭，加热回流，趁热过滤，滤液浓缩得浸膏，热水溶解，放置结晶，过滤，将结晶用无水乙醇回流溶解，放冷结晶，滤出结晶，喷雾干燥即得高纯度牛膝三萜皂苷。实施例4 将牛膝药材粉碎，取10kg，加入8倍热水，热水温度为85°C，超声提取，频率为 35kHz,提取2次，每次1. 5小时，过滤，合并提取液，通过HP100大孔吸附树脂柱层析，以 50L蒸馏水洗脱杂质，再用18^^30^30^^55%甲醇溶液洗脱，并用薄层层析法检识，收集40-60%醇溶液洗脱液，加入1.0% (w/v)药用活性炭，加热回流，趁热过滤，滤液浓缩得浸膏，热水溶解，放置结晶，过滤，将结晶用无水乙醇回流溶解，放冷结晶，滤出结晶，喷雾干燥即得高纯度牛膝三萜皂苷。本发明涉及一种牛膝三萜皂苷的提取工艺，其工艺具体包括将牛膝药材粉碎，以热水为提取溶媒超声提取，提取液通过大孔吸附树脂柱，水和醇溶液洗脱，并用薄层层析法检识，收集40-60％醇溶液洗脱液，活性炭脱色，脱色液浓缩得浸膏，热水溶解，放置结晶，无水乙醇重结晶，滤出结晶，喷雾干燥即得高纯度牛膝三萜皂苷。本发明生产过程无污染，提取方法简单，该工艺易放大生产。