专利名称：波棱瓜籽油滴丸制备工艺的制作方法藏药材波棱瓜(Herpetospermum penduculosum(Ser. )Baill.)属葫芦科一年生 草本攀援植物。根据《晶珠本草》、《藏药志》、《青海药用植物》、《迪庆藏药》以及藏医治疗人 体肝胆疾病处方等的记载和论述，具有平肝、泻热和解毒等功能，是治疗肝炎、胆囊炎、消化 不良和痔疮等病的重要药材。在藏医450余个常用处方中有140多个处方使用波棱瓜，占 30%以上。治疗肝胆病处方中，绝大多数含有波棱瓜，它的使用频率明显高于一般药材，表 明该药医治肝胆病范围广，治疗效果较好。经前期利用超临界CO2萃取技术对波棱瓜种子油 进行提取及分析研究发现种子油的含量约30%，其中不饱和脂肪酸的相对含量高于80%， 其种类主要为油酸、亚油酸及亚麻酸。而不饱和脂肪酸具有重要的生理功能，具有保护化学 性肝损伤、提高机体免疫力和抗氧化作用。我国肝病发病人群广，主要包括酒精性肝病、化学性肝病及病毒性肝病，数量接近 2亿人；2006年统计表明我国肝药市场容量在100亿元左右，其中中成药制剂占到20多亿 元。因此从藏医药中寻找治疗急慢性肝病的新药，具有重要的现实意义，由于波棱瓜籽具有 良好的治疗肝病的科学依据，因此研究开发保肝制剂具有广阔的市场前景，将会产生显著 的经济效益。
本发明所要解决的技术问题是提供一种工艺简单、成本低廉的波棱瓜籽油滴丸剂 制备工艺。为解决上述问题，本发明所述的一种波棱瓜籽油滴丸的制备工艺，包括以下步 骤(1)制备波棱瓜籽油将波棱瓜籽粉碎后采用超临界(X)2萃取工艺或以石油醚或 正己烷萃为溶剂采用溶剂提取工艺制得波棱瓜籽油；(2)选择药用辅料药用辅料是指分子量为4000和6000的聚乙二醇中的一种或 两种的组合；(3)将所述波棱瓜籽油和所述药用辅料按20 80 20 80的质量百分比进行称量；(4)将所述步骤(3)所得的药用辅料在60 65°C温度下加热至熔融；(5)将所述步骤( 所得的波棱瓜籽油与所述步骤(4)所得的熔融状态的药用辅 料进行混合，直至均勻，得到药物混合液；(6)将所述药物混合液在5 30°C温度下、以液体石蜡或二甲基硅油作为冷却液， 按常规方法滴制成丸即得波棱瓜籽油滴丸。所述步骤⑴中的超临界CO2萃取工艺制备波棱瓜籽油是指将洁净、干燥的波棱瓜籽粉碎至粒度为20 80目后，在压力为20 40Mpa、温度为35 60°C、纯度为99% CO2 的流量为20 40L/h的条件下萃取60 120min，经两级减压分离后即得波棱瓜籽油；其中 一级减压分离条件是压力为5 7Mpa、温度为40 50°C，二级减压分离条件是压力为4 5Mpa、温度为30 40°C。所述步骤(1)中的溶剂提取工艺制备波棱瓜籽油是指将洁净、干燥的波棱瓜籽粉 碎至粒度为20 80目后，以石油醚或正己烷为提取溶剂，按1 5 1 15的料液质量 体积比在70 90°C温度下回流提取60 90min，重复提取2 4次，经减压回收溶剂后即 得波棱瓜籽油。所述步骤O)中的药用辅料是指分子量为4000和6000的聚乙二醇中的一种或按 11 13的质量比混合的混合物。所述步骤(6)所得的波棱瓜籽油滴丸在保护化学性肝损伤中的应用。本发明与现有技术相比具有以下优点1、由于本发明将波棱瓜籽的有效部位籽油成分作为主药，并采用滴丸剂型，因此， 不但能够最大限度地保留其活性成分，而且主药在基质中呈高度分散状态，具有剂量准确、 起效迅速、生物利用度高的特点；同时，滴丸剂型具有易携带、服用方便、用量小、药效作用 明显、稳定性好，不易氧化、水解等特点。2、由于本发明所采用的生产方式为滴丸制剂的生产方式，因此，具有生产周期短、 工艺设备简单、操作方便、所用辅料少的特点，同时，由于滴制过程无粉尘，因此，有利于员 工的身体健康。3、由于本发明除基质外可节省大量辅料，因此，成本相对较低，易于工业推广和应 用，可实现规模化生产。4、本发明所得的波棱瓜籽油滴丸的急性毒性实验表明波棱瓜籽油滴丸的急性毒 性极小，属无毒性产品，服用非常安全。动物昆明种小白鼠，普通级，21 士0.3g，由青海省地方病研究中心提供。实验方法取健康小白鼠40只，雌雄各半，禁食IMi后称重，体重20. 5 士 1. 6g，1天 内灌胃(ig)给予波棱瓜籽油滴丸乳液1次，连续给予14天，每日给波棱瓜籽油滴丸剂量为 17.5g/kg。给予受试物后，观察结果。实验结果经多次预试验，无法试验测定出受试物灌胃给药(ig)的半数致死量 LD50，故只能测定其最大耐受剂量。波棱瓜籽油滴丸1日内口服的总剂量为17. 5g/kg，说明 其小鼠的最大耐受量大于17. 5g/kg。给药后观察小鼠，第一天有腹泻现象，次日转为正常， 连续观察14天，未见外观、毛发、活动行为、体重等有异常现象，无一死亡。解剖动物，肉眼 观察心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、肠等组织器官，均未见任何异常变化。小鼠急性毒性试验未 测出LD50，最大耐受量为小鼠最大胃容量即17. 5g/kg，该剂量相当于临床成年人拟推荐日 服剂量Og/日)的525倍，由此看出，波棱瓜籽油滴丸的急性毒性极小，属无毒性产品，服 用非常安全。5、本发明所得的波棱瓜籽油滴丸在保护化学性肝损伤中具有显著疗效。 (1)制备波棱瓜籽油将洁净、干燥的波棱瓜籽粉碎至粒度为20 80目后，在压 力为20Mpa、温度为35°C、纯度为99% CO2的流量为20L/h的条件下萃取120min，经两级减 压分离后即得波棱瓜籽油；其中一级减压分离条件是压力为5Mpa、温度为40°C，二级减压 分离条件是压力为4Mpa、温度为30°C。(2)选择药用辅料药用辅料是指分子量为4000的聚乙二醇。(3)将波棱瓜籽油和药用辅料按20 80的质量百分比进行称量。(4)将步骤(3)所得的药用辅料在60°C温度下加热至熔融。(5)将步骤( 所得的波棱瓜籽油与步骤(4)所得的熔融状态的药用辅料进行混 合，直至均勻，得到药物混合液。(6)将药物混合液加入滴丸机储液池，在5°C温度下、以液体石蜡或二甲基硅油作 为冷却液，冷却液高度为50 100cm，滴速为30 50滴/min，按常规方法滴制成丸即得波 棱瓜籽油滴丸。实施例2波棱瓜籽油滴丸的制备工艺，包括以下步骤(1)制备波棱瓜籽油将洁净、干燥的波棱瓜籽粉碎至粒度为20 80目后，在压 力为40Mpa、温度为60°C、纯度为99%的(X)2流量为40L/h的条件下萃取60min，经两级减 压分离后即得波棱瓜籽油；其中一级减压分离条件是压力为7Mpa、温度为50°C，二级减压 分离条件是压力为5Mpa、温度为40°C。(2)选择药用辅料药用辅料是指分子量为6000的聚乙二醇。C3)将波棱瓜籽油和药用辅料按80 20的质量百分比进行称量。(4)将步骤(3)所得的药用辅料在65°C温度下加热至熔融。(5)将步骤( 所得的波棱瓜籽油与步骤(4)所得的熔融状态的药用辅料进行混 合，直至均勻，得到药物混合液。(6)将药物混合液加入滴丸机储液池，在30°C温度下、以液体石蜡或二甲基硅油 作为冷却液，冷却液高度为50 100cm，滴速为30 50滴/min，按常规方法滴制成丸即得 波棱瓜籽油滴丸。实施例3波棱瓜籽油滴丸的制备工艺，包括以下步骤(1)制备波棱瓜籽油将洁净、干燥的波棱瓜籽粉碎至粒度为20 80目后，在压 力为30Mpa、温度为45°C、纯度为99%的(X)2流量为30L/h的条件下萃取90min，经两级减 压分离后即得波棱瓜籽油；其中一级减压分离条件是压力为6Mpa、温度为45°C，二级减压 分离条件是压力为4. 5Mpa、温度为35°C。( 选择药用辅料药用辅料是指分子量为4000和6000的聚乙二醇按1 1的质量比混合的混合物。(3)将波棱瓜籽油和药用辅料按30 70的质量百分比进行称量。(4)将步骤(3)所得的药用辅料在63°C温度下加热至熔融。(5)将步骤( 所得的波棱瓜籽油与步骤(4)所得的熔融状态的药用辅料进行混 合，直至均勻，得到药物混合液。(6)将药物混合液加入滴丸机储液池，在15°C温度下、以液体石蜡或二甲基硅油 作为冷却液，冷却液高度为50 100cm，滴速为30 50滴/min，按常规方法滴制成丸即得 波棱瓜籽油滴丸。实施例4波棱瓜籽油滴丸的制备工艺，包括以下步骤(1)制备波棱瓜籽油将洁净、干燥的波棱瓜籽粉碎至粒度为80目后，以石油醚为 提取溶剂，按1 5的料液质量体积比在90°C温度下回流提取90min，重复提取2次，经减 压回收溶剂后即得波棱瓜籽油。(2)选择药用辅料药用辅料是指分子量为4000和6000的聚乙二醇按1 3的
质量比混合的混合物。C3)将波棱瓜籽油和药用辅料按40 60的质量百分比进行称量。(4)将步骤(3)所得的药用辅料在65°C温度下加热至熔融。(5)将步骤( 所得的波棱瓜籽油与步骤(4)所得的熔融状态的药用辅料进行混 合，直至均勻，得到药物混合液。(6)将药物混合液加入滴丸机储液池，在20°C温度下、以液体石蜡或二甲基硅油 作为冷却液，冷却液高度为50 100cm，滴速为30 50滴/min，按常规方法滴制成丸即得 波棱瓜籽油滴丸。实施例5波棱瓜籽油滴丸的制备工艺，包括以下步骤(1)制备波棱瓜籽油将洁净、干燥的波棱瓜籽粉碎至粒度为20目后，以正己烷为 提取溶剂，按1 15的料液质量体积比在70°C温度下回流提取60min，重复提取4次，经减 压回收溶剂后即得波棱瓜籽油。(2)选择药用辅料药用辅料是指分子量为4000和6000的聚乙二醇按1 2的
质量比混合的混合物。(3)将波棱瓜籽油和药用辅料按50 50的质量百分比进行称量。(4)将步骤(3)所得的药用辅料在65°C温度下加热至熔融。(5)将步骤( 所得的波棱瓜籽油与步骤(4)所得的熔融状态的药用辅料进行混 合，直至均勻，得到药物混合液。(6)将药物混合液加入滴丸机储液池，在25°C温度下、以液体石蜡或二甲基硅油 作为冷却液，冷却液高度为50 100cm，滴速为30 50滴/min，按常规方法滴制成丸即得 波棱瓜籽油滴丸。实施例6波棱瓜籽油滴丸的制备工艺，包括以下步骤(1)制备波棱瓜籽油将洁净、干燥的波棱瓜籽粉碎至粒度为60目后，以石油醚为 提取溶剂，按1 10的料液质量体积比在80°C温度下回流提取70min，重复提取3次，经减 压回收溶剂后即得波棱瓜籽油。(2)选择药用辅料药用辅料是指分子量为4000的聚乙二醇。(3)将波棱瓜籽油和药用辅料按60 40的质量百分比进行称量。(4)将步骤(3)所得的药用辅料在60°C温度下加热至熔融。(5)将步骤( 所得的波棱瓜籽油与步骤(4)所得的熔融状态的药用辅料进行混 合，直至均勻，得到药物混合液。(6)将药物混合液加入滴丸机储液池，在10°C温度下、以液体石蜡或二甲基硅油 作为冷却液，冷却液高度为50 100cm，滴速为30 50滴/min，按常规方法滴制成丸即得 波棱瓜籽油滴丸。实施例7上述实施例1 6所得的波棱瓜籽油滴丸在保护化学性肝损伤中的应用。材料波棱瓜籽油滴丸为上述实施例1 6所得的籽油滴丸。动物SD大鼠(清洁级，180_220g)，雌雄各半，由兰州大学实验动物中心提供(实 验动物检测报告编号兰大动检(06)第004号，许可证号SCxk(甘)20050007)。仪器与药品CARY 300Bio紫外-可见光分光光度仪(美国VARIAN公司出品)。 低温勻浆机、恒温培养箱、冰箱、高速低温离心机、水浴锅等。联苯双酯滴丸购自北京协和制 药厂。(1)化学性肝损伤动物模型建立损伤剂用食用花生油调配四氯化碳(CCl4)，浓度为50% (ν ν)。方法CC14剂量为3mL/kg，腹腔注射(ip) 1次。(2)实验方法将大鼠按给药剂量高、中、低分为3个给药组，另设空白对照组、损伤模型组和联 苯双酯阳性对照组，每组10只，雌雄各半。连续灌胃给药21天，24h后用50% CCl4花生油 损伤剂按照3mL/kg ip 一次性损伤，禁食不禁水Mh，麻醉后，股动脉取血，立即送往医院进 行生化检测血液中的ALT (丙氨酸氨基转氨酶)、AST (天门冬氨酸氨基转氨酶)、SOD (超氧 化物歧化酶)、MDA (丙二醛)。(3)实验结果①波棱瓜籽油滴丸对CCl4肝损伤大鼠血清ALT和AST的影响CCl4损伤大鼠血清ALT和AST的统计分析结果见表1。结果表明，CCl4损伤模型组 的血清ALT、AST含量与空白对照组比较均有极显著性差异，说明肝损伤模型建立成功。波 棱瓜籽油滴丸高、中剂量组均能降低CCl4肝损伤大鼠血清中ALT、AST的含量，其中高剂量 组ALT、AST含量分别有极显著性和显著性下降，并且高剂量组比联苯双酯阳性对照药具有 更明显的降酶作用，说明波棱瓜籽油滴丸具有降酶保肝的作用。表1波棱瓜籽油滴丸对CCl4肝损伤大鼠血清中ALT、AST的影响( 士s, η = 10)


本发明涉及一种波棱瓜籽油滴丸的制备工艺，该工艺包括以下步骤(1)制备波棱瓜籽油将波棱瓜籽粉碎后采用超临界CO2萃取工艺或以石油醚或正己烷萃为溶剂采用溶剂提取工艺制得波棱瓜籽油；(2)选择药用辅料药用辅料是指分子量为4000和6000的聚乙二醇中的一种或两种的组合；(3)将波棱瓜籽油和药用辅料按比例称量；(4)将药用辅料加热至熔融；(5)将波棱瓜籽油与熔融状态的药用辅料进行混合，直至均匀，得到药物混合液；(6)将药物混合液按常规方法滴制成丸即得波棱瓜籽油滴丸。本发明具有生产周期短、工艺设备简单、操作方便、所用辅料少的特点，所得波棱瓜籽油滴丸的急性毒性极小，服用安全，并在保护化学性肝损伤中具有显著疗效。