专利名称：绿豆黄酮的碱法提取及黄酮绿豆饮料的制备方法我国是绿豆主要生产和输出大国之一，年产量占世界总产量的30%以上，绿豆消 费主要集中在食用，自古以来我国城乡人民把绿豆糖作为清热解毒，防暑降压的饮品。近代 研究发现，绿豆皮里含有大量的抗氧化成分，如黄酮、单宇、皂甙等。里面还有生物碱、豆固 醇、香豆素、强心甙，以及大量的膳食纤维等。黄酮类化合物是广泛存在于自然界的一类化合物。黄酮类化合物在植物体内大部 分与糖成苷，一部分以苷元形式存在。黄酮类化合物多存在于高等植物与羊齿类植物中。黄 酮类化合物具有显著生理药理活性，主要表现在为抗氧化及抗自由基作用；黄酮类化合 物具有扩张血管，具有变时性调节心肌收缩的作用，此外黄酮类化合物对凝血因子具有较 强的抑制作用；生物类黄酮具有抗炎、抗过敏作用，还具有抑菌、抗病毒作用。目前，绿豆中黄铜类化合物的提取方法有水提法、超临界CCV流体提取和有机溶剂 提取等。水提法存在一定的局限性，虽然设备简单，但因提取杂质多，收率较低，故不常使 用；超滤法、超临界萃取法成本太高；所以有机溶液剂提取是目前国内外使用较广泛的方 法，这种方法容易实现工业化生产。常用的有机溶剂有甲醇、乙醇、丙酮、乙醚、乙酸乙酯等， 其中，乙醇具有生产成本低、溶解效果好等优点，再辅以超声波提取，可以达到较高的提取 效果。但是由于有机溶剂的易燃、易爆及毒性，在具体实施中也存在生产安全及对操作者的 安全威胁等方面的问题。绿豆含有丰富的蛋白质、维生素和钙、铁等矿物质。其味甘，性寒，入心、胃经，具有 清热、解毒、消暑等功效。孙思邈说，绿豆“能治寒热热中，止泻痢卒噼，利小便长满”。李时 珍曾指出绿豆“肉平皮寒，解金石、砒霜、草木一切诸毒”。又称绿豆为“食中要汤”、“济世 之良谷也”。国人传统夏令喝绿豆汤，可防治中暑、目赤、喉痛、痱、便秘、尿赤、烦渴等症。因 此，自古以来我国城乡人民把绿豆汤作为清热解毒，防暑降压的饮品。但传统工艺制作的绿 豆汤一般采用古法，即“明代《饮馔服食笺》中所记“绿豆汤”的做法“绿豆掏净，下锅加水， 大火一滚，取汤停冷色碧食之。如多滚则色浊不堪食矣。”然此法生产的制品极不稳定，贮藏 时间仅能维持1 2天，时间稍长就返浑，而且味道也会变化。此法生产的产品的最大问题 在于，无法确定明确的质量标准，而且其中功效成分不明，更无法计量。
本发明旨在于克服现有技术的不足，提供了一种绿豆黄酮的碱法提取及黄酮绿豆 饮料的制备方法。本发明的绿豆饮料制造过程包括两部分，即绿豆黄酮提取及饮料调配。鉴于本项 目前期研究结果表明，绿豆中的黄铜类化合物主要为黄酮苷类(占总黄酮的90%以上)，主要是三糖苷和双糖苷，且以3-羟基苷为主，经对不同提取方法的比较可以确定，采用乳化剂 复合碱法对绿豆皮中总黄酮的提取率可达到85%以上。由此确定乳化剂复合碱法为最佳提 取方法；在饮料调配基质的制备中采用淀粉酶-蛋白酶复合酶法处理，经加入糖桂花、白砂 糖等调整口味，经过滤、杀菌、包装等工序制得总黄酮含量达到o. 5mg/ml的绿豆饮料。本发明的绿豆黄酮的碱法提取，是通过下列步骤实现的将精选绿豆在100 120°C蒸汽条件下加热处理5 30分钟，将绿豆子叶与种衣剥 离；将种衣用热风加热干燥，使种衣的含水量低于6%、再粉碎至20 40目，将该种衣粉按 1:8 20的重量比加入净水、按加入 水重量的0. 05 0. 3%加入蔗糖酯，再用10%浓度的 Na2CO3调节该混合液的pH值至8 11，加热至60 90°C恒温连续搅拌1 3小时，然后 降温至20°C，用100目滤网滤出杂质，即制得绿豆黄酮提取液。本发明的黄酮绿豆饮料的制备方法，是通过下列步骤实现的a、酶解液的制备将上述绿豆黄酮提取过程中产生的绿豆子叶按1:8 20的重量比加 入净水，常温浸泡4 8小时，然后打成浆液，按绿豆子叶重量加入20000 100000U/kg的 耐高温α -淀粉酶，搅拌均勻后在85 95°C条件下恒温30分钟、然后冷却至40 60°C， 以食用级盐酸调节混合液的PH值至5 7，按该混合液体积的30000 100000U/L加入食 用蛋白酶，在40 60°C下恒温2 6小时，即制得酶解液；b、混合液提取将a步骤中制得的酶解液与上述制得的的绿豆黄酮提取液混合均勻、 进行离心分离，提取混合液；c、黄酮绿豆饮料的制备按b步骤提得的混合液的体积量加入糖桂花0.5 5g/L、白 砂糖20 80g/L、柠檬酸0. 05 0. 15g/L和叶绿素铜钠10 80mg/L ；混合均勻，升温至 100°C，后迅速降温至5 -5°C并恒温1 3小时，用硅藻土精制，再经真空脱臭，纸板过滤， 灌装，灭菌即制得黄酮绿豆饮料。作为本发明的进一步改进，所述的食用蛋白酶是风味蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋 白酶或碱性蛋白酶中的任何一种。本发明绿豆黄酮的碱法提取，工艺合理、成本低、安全性好、绿豆黄酮的收率高；其 制得的黄酮绿豆饮料口感好，色泽光明，因其含有丰富的黄酮类化合物，使其具有显著生理 药理活性，具有抗炎、抗过敏作用，还具有抑菌、抗病毒作用。
本发明的绿豆黄酮的碱法提取，是将精选绿豆在100 120°C蒸汽条件下加热处理5 分钟，将绿豆子叶与种衣剥离；将种衣用热风加热干燥，使种衣的含水量低于6%、再粉碎至 20 40目，将该种衣粉按1 10的重量比加入净水、按加入水重量的0. 05%加入蔗糖酯，再 用10%浓度的Na2CO3调节该混合液的pH值至8，加热至60 70°C恒温连续搅拌3小时，然 后降温至20°C，用100目滤网滤出杂质，即制得绿豆黄酮提取液。实施例2
本发明的绿豆黄酮的碱法提取，是将精选绿豆在100 120°C蒸汽条件下加热处理30 分钟，将绿豆子叶与种衣剥离；将种衣用热风加热干燥，使种衣的含水量低于6%、再粉碎至 20 40目，将该种衣粉按1: 20的重量比加入净水、按加入水重量的0. 3%加入蔗糖酯，再用10%浓度的Na2CO3调节该混合液的PH值至11，加热至80 90°C恒温连续搅拌1小时， 然后降温至20°C，用100目滤网滤出杂质，即制得绿豆黄酮提取液。实施例3
本发明的绿豆黄酮的碱法提取，是将精选绿豆在100 120°C蒸汽条件下加热处理 20分钟、以钝化胰蛋白酶抑制剂，稍冷后用脱皮机将绿豆子叶与种衣剥离；将种衣继续用 80 100°C热风加热干燥，使种衣的含水量低于6%、再粉碎至20 40目，转入冷热缸中， 将该种衣粉按1:15的重量比加入净水、按加入水重量的0. 2%加入蔗糖酯，再用10%浓度的 Na2CO3调节缸内该混合液的pH值至9，升温加热至70 80°C恒温连续搅拌2小时，然后将 缸内混合液降温至20°C，用100目滤网滤出杂质，即制得绿豆黄酮提取液。实施例4
本发明的黄酮绿豆饮料的制备方法，是通过下列步骤实现的
a、酶解液的制备将实例1中绿豆黄酮提取过程中产生的绿豆子叶按1:8的重量比加 入净水，常温浸泡4小时，然后打成浆液，按绿豆子叶重量加入20000 50000U/kg的耐高 温α-淀粉酶，搅拌均勻后在85 87°C条件下恒温30分钟、然后冷却至40°C，以食用级盐 酸调节混合液的PH值至5，按该混合液体积的30000 50000U/L加入风味蛋白酶，在40 45°C下恒温2小时，即制得酶解液；
b、混合液提取将a步骤中制得的酶解液与实施例1制得的绿豆黄酮提取液混合均勻、 进行离心分离，提取混合液；
c、黄酮绿豆饮料的制备按b步骤提得的混合液的体积量加入糖桂花0.5g/L、白砂糖 20g/L、柠檬酸0. 05g/L和叶绿素铜钠10mg/L ；混合均勻，升温至100°C，后迅速降温至1 5°C并恒温3小时，用硅藻土精制，再经真空脱臭，纸板过滤，灌装，灭菌即制得黄酮绿豆饮 料。实施例5
本发明的黄酮绿豆饮料的制备方法，是通过下列步骤实现的
a、酶解液的制备将实施例2绿豆黄酮提取过程中产生的绿豆子叶按1 20的重量比加 入净水，常温浸泡8小时，然后打成浆液，按绿豆子叶重量加入80000 100000U/kg的耐高 温α-淀粉酶，搅拌均勻后在93 95°C条件下恒温30分钟、然后冷却至60°C，以食用级 盐酸调节混合液的PH值至7，按该混合液体积的80000 100000U/L加入中性蛋白酶，在 60°C下恒温6小时，即制得酶解液；
b、混合液提取将a步骤中制得的酶解液与实施例2制得的绿豆黄酮提取液混合均勻、 进行离心分离，提取混合液；
c、黄酮绿豆饮料的制备按b步骤提得的混合液的体积量加入糖桂花5g/L、白砂 糖80g/L、柠檬酸0. 15g/L和叶绿素铜钠10mg/L ；混合均勻，升温至100°C，后迅速降温 至-4 -5°C并恒温1小时，用硅藻土精制，再经真空脱臭，纸板过滤，灌装，灭菌即制得黄酮 绿豆饮料。实施例6
本发明的黄酮绿豆饮料的制备方法，是通过 下列步骤实现的
a、酶解液的制备将实施例3绿豆黄酮提取过程中产生的计量后的绿豆子叶全量转入 浸泡缸内，按1 15的重量比加入净水，常温浸泡6小时，然后用打浆机打成浆液，计量后的浆液泵入冷热缸中，按绿豆子叶重量加入40000 60000U/kg的耐高温α -淀粉酶，搅拌均 勻后用蒸汽喷射器将其泵入保温罐中，在90°C条件下恒温30分钟、然后冷却至50°C，以食 用级盐酸调节混合液的PH值至6，按该混合液体积的50000 70000U/L加入碱性蛋白酶， 在50°C下恒温4小时，即制得酶解液；
b、混合液提取 将a步骤中制得的酶解液与实施例3制得的绿豆黄酮提取液混合均勻、 经卧式离心机离心分离，提取离心混合液并计量；
c、黄酮绿豆饮料的制备将b步骤中制得离心混合液转入冷热缸内，按混合液的体积 量加入糖桂花3g/L、白砂糖50g/L、柠檬酸0. lg/L和叶绿素铜钠50mg/L ；混合均勻，在缸内 升温至100°C，然后通过板式换热器，迅速降温至0 1°C并转入保温缸内恒温1. 5小时，用 硅藻土过滤机精制，再经真空脱臭，纸板过滤，灌装，灭菌即制得黄酮绿豆饮料。


本发明的绿豆黄酮的碱法提取及黄酮绿豆饮料的制备方法属于饮料的制备方法，将绿豆用蒸汽加热处理使绿豆子叶与种衣剥离；再将种衣用干燥，使其含水量低于6%、再粉碎至20～40目，将该种衣粉加入净水、蔗糖酯，再用10%浓度的Na2CO3调节该混合液的pH值至8～11，经加热、降温、过滤，即制得绿豆黄酮提取液。将上述绿豆黄酮提取过程中产生的绿豆子叶加入水，常温浸泡后打成浆液，加入α-淀粉酶，和食用蛋白酶，在40～60℃下恒温2～6小时，即制得酶解液；将酶解液与绿豆黄酮提取液混合，进行离心分离，制得离心混合液，向混合液中加入糖桂花、白砂糖、柠檬酸和叶绿素铜钠；混合均匀，用硅藻土精制，再经真空脱臭，纸板过滤，灌装，灭菌即制得黄酮绿豆饮料。本发明的绿豆黄酮的碱法提取，工艺合理、成本低、安全性好、绿豆黄酮的收率高；其制得的黄酮绿豆饮料口感好，色泽光明，因其含有丰富的黄酮类化合物，使其具有显著生理药理活性，具有抗炎、抗过敏作用，还具有抑菌、抗病毒作用。