专利名称：一种野菊用于植物病害防治的新用途的制作方法野菊(Chrysanthemum indicum),野生或人工栽培,对土壤要求不严,少有病害,对栽培技术要求不高，生产成本低廉，由于其明确的药用价值，收载于《中国药典一部》中。特别是主产于浙江石练的黄菊、白菊两个山中野菊品种，目前，在医药方面的应用包括消炎解毒、清热凉血、杀菌、祛风之功效，但尚未在植物源农药上的应用和开发。土传病害素来被植物界认定为最难防治的病害之一，特别是白术、贝母的土传病 害，到目前为止主要用化学杀菌剂和培育抗性品种等方法，这些都无法安全、环保、快速地 从生产上满足防病治病的要求。此类病害主要由罗氏白絹小核菌，立枯丝核菌、尖孢镰刀菌、半裸镰刀菌和茄病镰刀菌等多种致病真菌复合侵染的结果。这些土传病真菌能产生大量菌体，只要条件对病菌生长发育有利而寄主又是易感的，病菌就可以大量繁殖并浸染寄主，随作物的连作而大量繁殖扩散。而且，常规防治施用化学农药，致使病菌耐药性增强，农残超标，药材质量下降，土壤和环境恶化。本发明采用植物源杀菌剂来防治土传病害特别是防治白术、贝母土传病害中的应用，做到了有效、环保，无农药残留，符合绿色安全生产的理念。
本发明的目的在于提供一种野菊及其提取物防治土传病害的新用途，本发明的目的还在于提供野菊提取物的杀菌新用途。本发明所述的防治土传病害的用途是指在防治白术、贝母土传病害的新用途，所述白术的土传病害为白絹病、根腐病，所述的贝母土传病害为灰霉病。本发明所述的植物杀菌是指白絹菌、立枯丝核菌、尖孢镰刀菌、半裸镰刀菌和茄病镰刀菌等土传病致病真菌。本发明所述用途是将野菊按照常规工艺，制成提取物，再加入常规辅料制成各种杀菌剂，如喷雾剂、乳剂、悬浮剂或粉剂的应用。本发明的用途还包括将野菊按常规方法粉碎成10-120目的组织粉碎物或切制成组织片段的应用。本发明所述的野菊提取物是指野菊的菊米或根或茎或叶的提取物。本发明的目的是通过如下技术方案实现的I、粉碎野菊米及其根或茎或叶将野菊的根部的泥土除净后分解成花、根、茎、叶，分别干燥后粉碎至10-120目制成组织粉碎物；或将野菊根或茎切制成I-IOcm植物组织片段；2、将野菊花及其根或茎或叶粉碎物制成提取物；本发明所述的提取物是指上述野菊花或根或茎或叶粉碎物加入4-20倍的溶剂，在30°C -100°C恒温加热，搅拌浸提2-4次，或采用回流提取，分离过滤得浸提液，浸提液常温或减压浓缩，回收浸提液中的溶剂，得到野菊或其根或茎或叶提取物的浓缩液；本发明所述的提取物的制备方法还为将野菊花及其根或茎或叶干燥粉碎，粉碎粒度为30-100目，超临界CO2萃取，萃取压力为18. 12MPa，萃取温度为30_50°C，萃取时间为l_6h，在此条件下得到的提取物；3、将野菊及其根或茎或叶提取物加入常规辅料，按照常规工艺，制成各种杀菌剂，如喷雾剂、乳剂、悬浮剂或粉剂。本发明将野菊制成植物杀菌剂的制备方法为将野菊米及其根或茎或叶的上述提取物浓缩液减压浓缩至固形物70-85%，加入固形物0. 1-10重量倍的增溶剂和加入固形物0.1-10重量倍的乳化剂溶解，按常规工艺加入常规辅料制成喷雾剂、乳剂、悬浮剂或粉剂。本发明将野菊及其根或茎或叶制成植物杀菌剂的制备方法优选为将100重量份·的野菊茎叶烘干，粉碎至80目，称取上述粉碎物，置恒温水浴锅中加入5重量倍的乙醇，在80°C恒温浸提3次，每次5小时，滤过得浸提液，减压浓缩(真空度0. 07Mpa)，得到野菊根茎叶的浓缩液，浓缩液减压浓缩至比重I. 0-2. 0，加入固形物0. 3重量倍的增溶剂和加入固形物0. 2重量倍的乳化剂溶解，再按照常规工艺加入常规辅料制成喷雾剂、乳剂、悬浮剂或粉剂。本发明所述的溶剂为水、乙醇、乙酸乙酯、石油醚的一种或者两种以上；所述的增溶剂为十二烷基磺酸钠或十二烷基苯磺酸钾；所述乳化剂为硬脂酸钠。本发明提供了一种环境友好、人畜安全的药剂，与传统药剂比较有以下优点(I)野菊及其根茎叶为天然产物，其提取物在自然界易降解；(2)野菊及其根茎叶杀菌剂具有多组分的特征，施用中致病菌不易产生抗药性；(3)实验证明本发明具有高效安全的特性；(4)本发明原料易于获得，其中野菊根茎叶是生产中的废弃物，可以实现资源的综合利用；(5)本发明制备工艺简单，有利于工业化生产。下述实验例用于进一步说明本发明，但不限于本发明。实验例II. I材料与方法I. I. I 材料野菊根茎叶，经粉碎机粉碎后，过80目标准筛，干燥低温保存，备用；自来水；95 %乙醇、乙醚均为分析纯；PDA培养基土豆200g,琼脂25g,鹿糖30g,用自来水配制成IOOOmL ;供试菌种包括罗氏白絹小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc.)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)，尖抱键刀菌(Fusarium. oxysporum)、半裸键刀菌(Fusariumsemitectum)、爺病镰刀菌(Fusarium solani)均由浙江农林大学植保植物病理组和上海抚生实业有限公司提供。1.1.2 方法(I)提取物的制备分别取250g野菊根茎叶粉末(80目)，分别加5倍量的水、95%乙醇、甲醇、乙酸乙酯、乙醚，搅拌、浸提、抽滤，将滤液旋转蒸发浓缩直至粘稠状，用水定容在IOOml的容量瓶内，备用。(2)抑菌实验取上述提取物对病原菌菌丝生长抑制作用采用生长速率法。参照2005版中国药典二部(附录XIA)抗生素微生物鉴定法操作，在无菌条件下，配制IOOmlPDA培养基若干个，在超净工作台中，将水提物、醇提物、醚提物及精油分别倒入4个PDA培养基内，迅速搅拌均匀，各分装到3-4个培养皿内，配成浓度为0. 25g/ml的带药培养基。并取IOml乙醚和95%的乙醇制成醚对照和醇对照，原PDA培养基作为水对照。选取长势较好，无感染，菌面大约为培养皿的3/4的菌作为供试菌，用酒精消毒过的打孔器在菌面的最外层打一圈孔，每孔大约5mm(最多打两圈)。用接种针取出圆形菌饼，使带菌丝的一面贴在培养基表面。各样品做3个平行实验。48小时后，观察记录实验数据。根据十字交叉法，用游标卡尺测量菌面的直径，并求出平均值，以此类推，求出三个平行实验的平均直径，直到空白实验的菌面几乎长满整个培养皿为止。将实验组平均直径的大小与对照组进行比较，根据公式抑制率=[(对照组-5)-(实验组-5) ]/(对照组-5) X100%,计算出抑制率。I. 2结果与分析表I为野菊根茎叶不同溶剂提取物对不同病原菌均有抑制效果，其中乙醇提取物、乙醚提取物和超临界萃取物对5种病原菌的抑制效果最佳。表I.菊米根茎叶不同溶剂提取物对不同病原菌的抑菌作用


本发明涉及野菊及其根或茎或叶的新的用途，特别涉及一种野菊花蕾及其根或茎或叶用于中药材土传病害防治的新用途，以及野菊花及其根或茎或叶其提取物在制备植物源杀菌剂中的应用。所述的提取物可以通过溶剂提取和超临界二氧化碳萃取从野菊及其根茎叶中获得。本发明采用植物源杀菌剂来防治土传病害作用，做到科学环保，无农药残留，符合绿色安全生产的理念。