一种细胞共培养孔板的制作方法 [0002]体外多细胞共培养是将不同种类细胞培养于同一环境中，使细胞间信息相互沟通、相互联系、相互作用，从而尽可能模拟体内的细胞微环境，达到为基础研究，药物研究等提供更为有效、可靠、准确的实验结果。 [0003]细胞共培养主要有两种方法:直接共培养体系和间接共培养体系。直接共培养体系是将2种或2种以上的细胞同时接种于同一培养器材内，不同类型的细胞之间直接接触培养。间接共培养体系，即将2种或2种以上的细胞分别接种于不同的载体上，然后将这两种载体置于同一培养环境之中，使不同种类的细胞共用同一种培养系统而不直接接触。 [0004](I)由于直接共培养体系的多种细胞培养后无法分离进行后续研究，所以不能满足当前实验需求。 [0005](2)当前有关细胞间接共培养体系器材应用最广泛的为细胞培养池。如康宁(Corning)公司的Transwell共培养系统。Transwell共培养系统是用一种有通透性的杯状装置，杯底部置一张具有通透性的膜，孔径大小为0.1?12.0 μ m,将Transwell小室放入培养板中，A细胞种在上室内，下层种植B细胞，实现两种细胞的共培养，从而可以研究细胞分泌或代谢产生的物质对细胞的作用与影响。此方法的弊端在于:1、只能进行两种细胞共培养，无法多细胞共培养。2、两种细胞中有一种生长在膜上，进行后续实验不便。3、进行细胞换液时，操作不便。4、价格昂贵。

[0006]为克服现有技术的不足，本实用新型的目的是提供一种细胞共培养孔板，实现多种附壁细胞非接触共同培养。
[0007]为实现上述目的，本实用新型通过以下技术方案实现:
[0008]一种细胞共培养孔板，包括若干个相互连接的培养孔，相邻的培养孔之间设有通孔，
[0009]所述的通孔由活塞密封。
[0010]所述的通孔为方形孔。
[0011]所述的通孔下沿与培养孔底部的距离A = 1.2?2mm。
[0012]所述的活塞上设有手柄。
[0013]与现有技术相比，本实用新型的有益效果是:
[0014]A、实现了多种附壁细胞非接触共培养，有利于实现多种细胞在同一培养体系中生长，及细胞与细胞、细胞与培养环境之间进行物质交换，相互影响，相互作用，从而达到实现模拟体内环境的作用。
[0015]B、不同种类的细胞分别生长于不同的培养孔内，不会造成不同细胞之间的污染与混杂，易于收获细胞。
[0016]C、对于共培养后的细胞可提取RNA,蛋白质等用于基因及蛋白表达等相关实验。
[0017]D、可以研究各细胞共培养前后的形态学变化及在不同处理因素(如干扰，过表达等)作用下发生的变化。
[0018]E、用于体外细胞药物研究。
[0019]F、提高实验效率，可以根据需求调节多孔互通，制成不同规格的培养孔板，操作方便。
[0020]G、通孔有可靠的密封，活塞可拆卸。




[0021]图1是本实用新型的结构示意图。
[0022]图2是图1沿A-A线的剖视图。
[0023]图3是活塞结构示意图。
[0024]图中:1_培养孔2_通孔3_活塞4_手柄。


[0025]下面结合说明书附图对本实用新型进行详细地描述，但是应该指出本实用新型的实施不限于以下的实施方式。
[0026]见图1-图3,—种细胞共培养孔板,包括若干个相互连接的培养孔I,相邻的培养孔I之间设有通孔2，所述的通孔2由活塞3密封，活塞3的外轮廓与通孔2紧配合；活塞3材质为硅胶或与培养板材质相同。通孔2为方形孔。通孔2下沿与培养孔I底部的距离A=1.2?2mm，方便细胞培养。活塞3上设有手柄4，方便活塞3的插拔。
[0027]实施例:
[0028]以6孔细胞共培养板为例:
[0029]制作时，打通普通平底6孔板相邻两培养孔1，形成方形通孔2，孔长B = 3-12mm,孔宽C=L 5-2.2mm，通孔2下沿与培养孔I底部的距离A = 1.2?2mm。在通孔2内添活塞3封闭，制成共培养6孔板。需要孔间互通时，使用无菌镊子捏住手柄4取出活塞3。
[0030]使用时，以3种细胞共培养为例:
[0031]首先对3种细胞进行单独培养:把各细胞分别种在6孔板细胞专用爬片(圆形盖玻片，TC处理，无菌)上，根据实验需要确定细胞在玻片上的生长数量及时间，细胞长好后取出玻片，用无菌镊子取下细胞共培养6孔板中相邻三个培养孔I的两个活塞3，实现三个培养孔I互通，将种有3种细胞的玻片分别放入已互通的三个培养孔I内，加入适量培养基开始进行细胞共培养。(专用细胞爬片根据需要可选择不同规格)
[0032]实验结束后a、可取培养体系上清，用于研究培养体系内分泌蛋白的一系列研究；b、可取出玻片，对玻片上的细胞提取RNA、蛋白质等进行一系列研究；c、可进行免疫突光等实验。
[0033]亦可根据需求直接在细胞共培养6孔板中种所需数量细胞，待细胞贴壁后，用无菌镊子取出活塞3，后实现孔间互通多细胞共培养。
[0034]实验结束后可取上清等进行后续研究。
[0035]根据需要本器材等比例放缩后可制成12孔共培养板或24孔共培养板等。
[0036]本实用新型的优点是:
[0037]A、实现了多种附壁细胞非接触共培养，有利于实现多种细胞在同一培养体系中生长，及细胞与细胞、细胞与培养环境之间进行物质交换，相互影响，相互作用，从而达到实现模拟体内环境的作用。
[0038]B、不同种类的细胞分别生长于不同的培养孔内，不会造成不同细胞之间的污染与混杂，易于收获细胞。
[0039]C、对于共培养后的细胞可提取RNA,蛋白质等用于基因及蛋白表达等相关实验。
[0040]D、可以研究各细胞共培养前后的形态学变化及在不同处理因素(如干扰，过表达等)作用下发生的变化。
[0041]E、方便体外细胞药物研究。
[0042]F、提高实验效率，可以根据需求调节多孔互通，制成不同规格的培养孔板，操作方便。
[0043]G、通孔有可靠的密封，活塞可拆卸。
[0044]H、采用与现有国际通用的培养板外形规格，便于生产和使用。