专利名称：参莲颗粒的制备方法及质量控制技术的制作方法 参莲颗粒是在中华人民共和国卫生部药品标准新药转正标准第十三册“参莲胶囊〔WS3-217-(Z-039)-97(Z)〕”的基础上，将胶囊剂改成颗粒剂制成，生产工艺无质的改变。功能主治为清热解毒，活血化淤，软坚散结。用于由气血淤滞，热毒内阻而致的中晚期肺癌、胃癌患者，也可用于治疗原发性肝癌之血淤或兼热毒、或兼湿热蕴毒型患者。以其配合肝动脉插管化疗、栓塞治疗能起到提高疗效，减轻并发症及化疗药物引起的毒副反应，改善患者的生活质量和延长生存期的作用。同类产品自上市以来就得到临床医师和恶性中晚期肿瘤患者的重视和使用，抑瘤率可达82.65％，并具有毒副作用低、纯中药制剂的特点，成为癌症患者辅助治疗的有效药物。考虑到原剂型胶囊剂每次服用6粒，具有患者服用不方便等缺点，故我们对该品种进行了二次开发研究，选择剂型为易于吸收、显效迅速、稳定性高的颗粒剂。
本发明的目的是对中药参莲胶囊新剂型进行研究，提供参莲颗粒的制备方法及其质量控制技术。本发明的技术方案如下参莲颗粒的制备方法，原料处方由苦参、山豆根、半枝莲、防己、三棱、莪术、丹参、补骨脂、苦杏仁、乌梅、白扁豆十一味药组成，其特征在于(1)、原料配方重量份为苦参833.5山豆根750半枝莲666.5防己625三棱625莪术625 丹参416.5补骨脂583.5苦杏仁333.5乌梅416.5白扁豆416.5(2)、以上十一味，取三棱、莪术各18.75份，粉碎成细粉；剩余的三棱、莪术与补骨脂提取挥发油，药渣与其余苦参等八味加水煎煮三次，合并煎液，滤过，静置，取上清液浓缩至相对密度为1.10，放冷，加入等量乙醇，充分搅拌，静置，取上清液，浓缩成稠膏，与三棱、莪术细粉混合，减压干燥，粉碎成细粉；(3)、上述细粉，按以下重量配方与辅料混合，制粒，干燥，整粒，喷入挥发油，混匀，即得；细粉与辅料的重量配方为全部细粉糊精600；或者全部细粉糊精37蔗糖563；或者全部细粉糊精37聚维酮K3020蔗糖 543。所述的制备方法，其特征在于上述第(2)步骤中，相关参数为以上十一味，取三棱、莪术各18.75，粉碎成细粉；剩余的三棱、莪术与补骨脂提取挥发油10小时，药渣与其余苦参等八味加水煎煮三次，第1次8倍量、2小时，第二次6倍量、1.5小时，第3次6倍量、1小时，合并煎液，滤过，静置24小时，取上清液浓缩至相对密度为1.10(50℃～60℃)，放冷，加入等量乙醇至含醇量为45～85％，充分搅拌，静置12～36小时，取上清液，浓缩成稠膏，与三棱、莪术细粉混合，80℃减压干燥，粉碎成细粉，加糊精37、聚维酮K30 20，蔗糖543，混匀，制粒，干燥，整粒，喷入挥发油，混匀，即得。所述的制备方法，其特征在于以上十一味，取三棱、莪术各18.75，粉碎成细粉；剩余的三棱、莪术与补骨脂提取挥发油10小时，药渣与其余苦参等八味加水煎煮三次，第1次8倍量、2小时，第二次6倍量、1.5小时，第3次6倍量、1小时，合并煎液，滤过，静置24小时，取上清液浓缩至相对密度为1.10(50℃～60℃)，放冷，加入等量乙醇至含醇量为45～50％，充分搅拌，静置24小时，取上清液，浓缩成稠膏，与三棱、莪术细粉混合，80℃减压干燥，粉碎成细粉，加糊精37、聚维酮K30 20，蔗糖543，混匀，制粒，干燥，整粒，喷入挥发油，混匀，即得。参莲颗粒的质量控制技术，其特征在于通过以下步骤进行鉴别与测定一、鉴别(1)取本品内容物适量，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液适量湿润药粉，加氯仿适量，超声提取，滤过，滤液合并，置水浴上蒸干，残渣加乙醇1～5ml使溶解，作为供试品溶液；另取苦参碱、粉防己碱、槐定碱对照品，分别加乙醇制成苦参碱、粉防己碱、槐定碱对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述四种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20∶2∶2∶0.1的氯仿-丙酮-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与苦参碱、粉防己碱、槐定碱对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (2)取本品内容物适量，加水浸渍一段时间，制成混悬液，加乙醚适量，超声提取，静置，分取乙醚层，合并，置50～60℃水浴上蒸干，残渣加醋酸乙酯适量使溶解，作为供试品溶液；另取补骨脂素、异补骨脂素对照品，分别加醋酸乙酯制成补骨脂素、异补骨脂素对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为9∶1的苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以适量氢氧化钾甲醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(3)取本品内容物适量，加甲醇回流提取，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加适量浓度的氢氧化钠溶液使溶解，加乙醚振摇提取，弃去乙醚液，碱液层加稀盐酸调节pH值至一定值，加乙醚振摇提取，酸液层留存；合并乙醚提取液，置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇适量使溶解，作为供试品溶液；另取丹参对照药材，加水煎煮，滤过，滤液加氢氧化钠溶液调节pH值，制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同-硅胶G薄层板上，以体积比为2.5∶1∶0.4的氯仿-丙酮-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铁乙醇试液，于100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)取鉴别(3)项下的酸液层，加醋酸乙酯振摇提取，合并醋酸乙酯提取液，加醋酸乙酯饱和的水洗涤，弃去水洗液，醋酸乙酯液置水浴上蒸干，残渣加甲醇适量溶解，加适量聚酰胺细粉拌样，挥去甲醇，加于聚酰胺柱上，先用20～30％乙醇适量洗脱，弃去20～30％乙醇洗脱液，继以60～80％乙醇适量洗脱，收集60～80％乙醇洗脱液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，作为供试品溶液；另取半支莲对照药材，加水煎煮，滤过，滤液加氢氧化钠溶液调节pH值，制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一用氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以体积比为4∶3∶1∶1的醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝乙醇溶液，于80℃加热，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；二、含量测定取本品内容物适量，加水适量，振摇使溶解，再加乙醇适量，振摇，静置，滤过，滤液蒸干，残渣加0.1～0.3％的盐酸溶液10～40ml溶解，滤过，滤液加浓氨试液适量，用氯仿振摇提取，合并氯仿提取液，蒸干，残渣用乙醇适量分次使溶解，并定量转移至量瓶中，加乙醇至刻度，密塞，摇匀，作为供试品溶液；另取苦参碱对照品，加乙醇制成对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液2μl，对照品溶液2μl与4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20∶20∶2∶1的甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良的碘化铋钾∶碘-碘化钾(1∶1)溶液，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B薄层扫描法)进行锯齿式扫描，波长λS＝505nm，λR＝650nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。
本发明研究的参莲颗粒，具有清热解毒，活血化淤，软坚散结的功效。用于由气血淤滞，热毒内阻而致的中晚期肺癌、胃癌患者，也可用于治疗原发性肝癌之血淤或兼热毒、或兼湿热蕴毒型患者。
参莲颗粒的组方严格合理按照中医学方剂中的君臣佐使配伍。方中苦参性味苦寒，入肝、胃诸经，清热解毒，攻结散肿，为方中君药。山豆根、半枝莲二味合君药于清热解毒之中，散淤血，消徵积，具有一定抑癌抗癌作用。莪术的作用“主积聚诸气，为最灵之药”。盖活血必先理气，故血淤气滞，诸痛之症常用之有效，且无峻破出血之虑。方中使以白扁豆，甘平引药入脾，能益气健脾，固本祛邪。本方诸药合用苦而不寒，攻积而不伤正，共奏清热解毒、活血化淤、攻坚散积之功效。
药理研究 参莲颗粒中君药苦参和臣药山豆根的有效药物成分为苦参素(又名氧化苦参碱)，经研究其有抗癌及升高白细胞作用；另一味臣药半枝莲研究显示其不仅对癌细胞的有抑制作用，还具有一定的解热、护肝等作用；防己的有效成分汉防己甲素有明显的抗癌作用。全方经动物实验，显示本品具有抑制动物肿瘤生长的作用和延长载瘤动物生存的时间的作用。
药效学研究 用中医药理论提取其有效成份，经抗肿瘤药效学试验，该药对艾氏实体瘤(FSC)、leiwis肺癌、黑色素瘤体B16、肝癌H22均有明显抑瘤作用。
毒理研究 参莲颗粒是在中华人民共和国卫生部药品标准“参莲胶囊〔WS3-217-(Z-039)-97(Z)〕”的基础上，将胶囊剂改成颗粒剂制成，生产工艺无质的改变。经检索中国期刊网和相关网站未发现有参莲胶囊的毒理资料报道。
临床研究 参莲颗粒的功能主治为清热解毒，活血化淤，软坚散结。用于由气血淤滞，热毒内阻而致的中晚期肺癌、胃癌及原发性肝癌患者。原方为经多年临床经验，研制而成的一种纯中药抗肿瘤制剂，以中医学的“君、臣、佐、使”之理论为指导，筛选出的苦参、山豆根、半枝莲等为主药的十一味中药组成本药，该药经中国中医研究院，广安门医院临床试验，对310例肺癌、胃癌患者进行观察，其有效稳定率82％，对晚期体弱者有抑制肿瘤，改善症状，并可保护免疫功能，提高生存质量，且无明显的毒副反应为理想抗癌药物。

处方苦参833.5g山豆根750g 半枝莲666.5g防己625g三棱625g莪术625g 丹参416.5g 补骨脂583.5g苦杏仁333.5g乌梅416.5g白扁豆416.5g以上制成1000g。
制法以上十一味，取三棱、莪术各18.75g，粉碎成细粉；剩余的三棱、莪术与补骨脂提取挥发油10小时，药渣与其余苦参等八味加水煎煮三次，第1次8倍量、2小时，第二次6倍量、1.5小时，第3次6倍量、1小时，合并煎液，滤过，静置24小时，取上清液浓缩至相对密度为1.10(50℃～60℃)，放冷，加入等量乙醇至含醇量为45～50％，充分搅拌，静置24小时，取上清液，浓缩成稠膏，与三棱、莪术细粉混合，80℃减压干燥，粉碎成细粉，加糊精37g、聚维酮K30 20g，蔗糖543g，混匀，制粒，干燥，整粒，喷入挥发油，混匀，制成1000g，即得。
本品每袋含苦参以苦参碱(C15H24N2O)计，不得少于33.0mg。
功能主治清热解毒，活血化瘀，软坚散结。用于由气血瘀滞、热毒内阻而致的中晚期肺癌、胃癌患者。
用法用量开水冲服，一次1袋，一日3次。
规格每袋装12g贮藏密封。
所述剂型的优化选择按照药材的提取工艺，提取一个处方量的药材，得稠膏与三棱、莪术细粉混匀，80℃减压干燥粉碎成细粉，按表7所设计的方案分别加入不同的辅料，混匀16目筛制粒，干燥，以溶化性(混悬性)、粒度(不能通过10目筛和能通过60目筛的颗粒和细粉总和占总颗粒量的百分率)，口感为考察指标，结果见表1。
表1 成型配方的筛选


质量控制标准性状本品为棕黄色至棕褐色的颗粒；气微香，味甜、微苦。
鉴别(1)取本品20g，研细，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液5ml湿润药粉，加氯仿50ml，超声提取2次，每次30分钟，滤过，滤液合并，置水浴上蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取苦参碱、粉防己碱、槐定碱对照品，分别加乙醇制成每1ml含苦参碱、粉防己碱1mg和每1ml含槐定碱0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述四种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-丙酮-甲醇-浓氨试液(20∶2∶2∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与苦参碱、粉防己碱、槐定碱对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)取本品20g，研细，置具塞锥形瓶中，加水60ml，浸渍1小时，振摇，制成混悬液，加乙醚30ml，超声提取2次，每次5分钟，静置，分取乙醚层，合并，置50～60℃水浴上蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液。另取补骨脂素、异补骨脂素对照品，分别加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯(9∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％氢氧化钾甲醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(3)取本品20g，研细，置圆底烧瓶中，加甲醇100ml回流提取2次，每次1小时，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加0.1mol/L的氢氧化钠溶液30ml使溶解，加乙醚振摇提取3次，每次15ml，弃去乙醚液，碱液层加稀盐酸调节pH值至2，加乙醚振摇提取3次，每次15ml，酸液层留存。合并乙醚提取液，置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹参对照药材2g，加水20ml煎煮2小时，滤过，滤液加10mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值大于9，自“加乙醚振摇提取3次”起同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-丙酮-甲酸(2.5∶1∶0.4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇试液，于100℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(4)取鉴别(3)项下的酸液层，加醋酸乙酯振摇提取3次，每次15ml，合并醋酸乙酯提取液，加醋酸乙酯饱和的水洗涤2次，每次15ml，弃去水洗液，醋酸乙酯液置水浴上蒸干，残渣加甲醇适量溶解，加适量聚酰胺细粉拌样，挥去甲醇，加于聚酰胺柱(φ1.8cm×40cm，3g，40～60目，干法装柱)上，先用20％乙醇100ml洗脱，弃去20％乙醇洗脱液，继以70％乙醇100ml洗脱，收集70％乙醇洗脱液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取半支莲对照药材2g，加水20ml煎煮2小时，滤过，滤液加10mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值大于9，自“加乙醚振摇提取3次”起同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(4∶3∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铝乙醇溶液，于80℃加热约5分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
检查应符合颗粒剂项下有关的各项规定(中国药典2000年版一部附录I C)。
含量测定取本品，研细，取约2.0g，精密称定，加水10ml，振摇使溶解，再加乙醇40ml，振摇，静置，滤过，滤液蒸干，残渣加0.2％的盐酸溶液20ml溶解，滤过，滤液加浓氨试液5ml，用氯仿振摇提取3次，每次10ml，合并氯仿提取液，蒸干，残渣用乙醇5ml分次使溶解，并定量转移至5ml量瓶中，加乙醇至刻度，密塞，摇匀，作为供试品溶液。另取苦参碱对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液2μl，对照品溶液2μl与4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液(20∶20∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾∶碘-碘化钾(1∶1)溶液，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B薄层扫描法)进行锯齿式扫描，波长λS＝505nm，λR＝650nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。


本发明属于一种中药，具体是中药复方制剂参莲胶囊的新剂型——参莲颗粒的制备方法及质量控制技术。“参莲胶囊”是中华人民共和国卫生部药品标准新药转正标准第十三册收载品种，但胶囊剂存在吸收慢，制备工艺不合理，有效成分不高等缺点。本发明的目的是对现有参莲胶囊进行改剂型，提出一种参莲颗粒的制备方法和质量控制技术，更好地服务于广大人民群众的医疗需要。