专利名称：包含五味子的肽提取物的治疗痤疮用化妆品组合物的制作方法包含五味子的肽提取物的治疗痤疮用化妆品组合物简介本发明涉及用于治疗痤疮的化妆品组合物，其包含五味子(Schisandra)肽提取物和合适的赋形剂。世界上存在约25个属于五味子属的物种。这些物种中的大约16个来源于中国。 这些灌木源自中国华北及俄罗斯和韩国的邻近地区。五味子是雌雄异体的植物(具有迥异的雄花和雌花)。果实为悬挂成串的形式，其与醋栗灌丛(currant bush)的果实多少相似。果实在其上部具有裸露的花梗(大约5 IOcm)，所述花梗在其下部被比醋栗略大、更紧凑和坚实的鲜红色浆果覆盖。球状种子的尺寸为数毫米。在中国，将两个物种正式认可作为药物北五味子(S. chinensis)和华中五味子 (S. sphenanthera) (He等人，1997)。在中医中使用它们的浆果来治疗咳嗽、哮喘、盗汗、遗精和慢性腹泻。也使用它们作为强壮药和治疗慢性疲劳。在植物名称五味子的情况下，这种植物属于木兰纲(Magno Ii op si da)和木兰目 (Magnoliales)。植物学科是五味子科(Schisandraceae)。单独使用的术语“五味子”可以指两种不同的植物北五味子(Schisandra chinensis)和华中五味子(Schisandra sphenanthera)。长久以来已经将这两个物种视为等效它们可能根据其起源命名北五味子(Schisandra chinensis)为“北五味子”和华中五味子为“南五味子”。北五味子在中文中称作五味子wei zi)(拼音)，字面意思是“五种味道的浆果”。北五味子是一种生长缓慢、野生、落叶和乔木状藤本植物，能够长到9至10米高度。华中五味子(Schisandra sphenanthera Rehd. et Wils)也叫做橙色花五味子 (schisandre afleurs orang6es)(在法国)、南方五味子与柠檬木(在英格兰)和华中五味子(hua zhong wu wei zi)与南五味子(nan wu wei zi)(在中国)。虽然北五味子的果实已经成为大量文献的主题，但是对华中五味子的研究工作少得多。几个原因解释了这种差异-根据中国传统就其用途而言名声较差，-在西方几乎不使用，-与五味子相比总新木脂体的比例较低。这两个物种之间的主要差异之一涉及它们各自果实中所含有的新木脂体的性质和比例。这个亚家族的化学成分是五味子属的主要新颖点(great novelty) 0近来，Huyke 等人O007)的文章报道了北五味子和华中五味子提取物对细胞增殖的作用的对比研究。在欧洲，主管机关批准的药物均不含有华中五味子提取物。通常认为，华中五味子在药用上劣于北五味子并且它仅用作活性木脂体的备选资源。商业上，认为华中五味子的果实在成本上低于北五味子的果实。果实特征五味子的干燥果实包含大约20%精油，其包含7%至30%不可皂化物(Huyke等人，2007)。所述油的不可皂化物部分中含有木脂体。其他活性组分包括植物留醇和维生素C 禾口 Ε。五味子精油富含倍半萜烯衍生物(Song等人，2007)如δ -杜松烯6 % )、 Y-杜松烯、β-雪松烯和檀香醇(Huyke等人，2007)。北五味子果实的精油比华中五味子果实的精油含有更多的单萜烃(Huyke等人，2007)。华中五味子果实以其高的去氧五味子素含量为特征。相反，与北五味子籽粒相比， 其五味子素和Y -五味子素含量极低(Zhu等人，2007)。果实提取物使用的形式传统医学中最常使用的形式是干燥的果实。除了在中国以脱水状态下的传统用途之外，五味子果实也以提取物的形式使用，其中通过能够夹带该果实的新木脂体的提取溶剂获得所述提取物。文献中提到的溶剂是乙醇、超临界CO2(SC-O)2 ；与共溶剂联合或不联合)和己烷。几项研究曾试图比较SC-CO2、氯仿、甲醇和乙醇对果实新木脂体的提取能力。根据最近公开，通过(X)2或C02+5%乙醇或通过己烷提取五味子果实产生了就新木脂体而言十分相似的提取物组成。相比之下，乙醇的使用导致两种新木脂体脱氢五味子素和戈米辛0的提取较差，而γ-五味子素的提取明显较好(Huyke等人，2007)。此外，Zhu等人开发了一项提取技术，该技术可以比较北五味子提取物和华中五味子提取物中分别所含有的木脂体的量(Zhu等人，2007)。现有技术已经在文献中报道了五味子果实提取物的许多药理学性质，如-自二十世纪八十年代以来已知的保肝作用；-抗HIV 作用；-抗炎和抗肿瘤活性；-当同时摄入时增加某些产物的生物利用率(XinHW等人，2007)。因而，许多文献引用了除其他有效化合物之外还包含五味子提取物的药理学组合物，下文给出所述文献的实例。Zhao先生的申请US 2003/0026854描述了用于治疗肝病的基于五味子素的药物； 特别是从五味子或华中五味子提取所述五味子素。广州中一药业有限公司(Guang Zhou Zhongyi Pharmaceutical)的申请 W02006/122485和WO 2006/1222454描述了意图治疗糖尿病的组合物，所述组合物包括含华中五味子的几种植物的混合物。Phynova的申请WO 2007/020382描述了包括含北五味子或华中五味子的四种植物的提取物的组合物，所述组合物用于治疗肝病、代谢病和/或免疫病，并且更具体地意图治疗丙型肝炎。申请WO 2007/005760描述了治疗抗化疗癌细胞的组合物，所述组合物包含五味子素家族的化合物、戈米辛和源于北五味子果实提取物及华中五味子果实提取物的其他化合物。Huyke等人Q007)的文章描述并且比较了华中五味子提取物和北五味子提取物对于培养下的细胞的作用=HaCaT和A431表皮细胞的增殖以剂量依赖性方式受到这些提取物抑制，而非极性提取物比极性提取物更有效。该项研究的作者得出结论华中五味子的 SC-CO2提取物可以用于预防和治疗皮肤的炎性或过度增生性疾病(Huyke等人，2007)。已经在专利申请KR 2001931中描述了北五味子提取物在组合物中用于预防痤疮方面的用途，所述的组合物还包含选自植物蛋白酶如木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶、或选自微生物蛋白酶的剥脱剂。未清楚鉴定的这些提取物因而没有单独使用，而与剥脱剂组合地使用。已经在CN 11040971中描述了来自传统中医的抗痤疮组合物它包含10份称作 “石菖蒲(shi chang pu) ”的菖蒲(Acorus calamus)、8份五味子果实和3份其他植物。这些文献均没有描述具体的五味子提取物，并且尤其没有描述肽提取物或其对痤疮的美容效果和皮肤病学效果。本发明人现在已经以出人意料的方式发现，包含五味子肽提取物的组合物可以用来治疗或预防痤疮，并且尤其是与痤疮丙酸杆菌(P. acnes)的存在有关的炎症。痤疮的生理病理学痤疮是毛囊皮脂腺的慢性炎性疾病，其侵袭大部分青少年和成年人。病变在其表现及其严重性方面各异。青少年中的痤疮在85%的病例内是中等程度或轻度的。在15% 的严重痤疮病例中，3%至4%的男性和0. 4%的女性患有结节状和慢性痤疮。多种表现的共同要素在于皮脂滞留，其在临床上表现为特定的原发损害。病变在发展的多个阶段表现为原发性损害。它们是滞留性的和/或炎性的-与扩张的毛囊皮脂腺对应的滞留性损害；-封闭的粉刺或微包囊(直径Imm至3mm的隆起白色部分)；-开放的粉刺或黑头粉刺；-表面炎性损害(丘疹和脓疱)和深部炎性损害(结节)；-丘疹直径Imm至5mm的隆起红色部分，有时敏感，经常发展成小疱(脓性)；-结节更深，直径大于5mm，能够发展为脓肿形成并且能够破裂。痤疮损害可以留下永久性萎缩性疤痕、肥厚性瘢痕或通常短暂和/或色素沉着的红斑疹。痤疮是毛囊皮脂腺(具有萎缩毛发的极特殊毛囊)的疾病，其中4个紧密互联和相继发生的因素介入皮脂分泌过多、过度角化、痤疮丙酸菌(Propionibacterium acnes) 的增生和炎症。皮脂分泌过多皮脂分泌过多(皮脂分泌过度)是痤疮中的初始因素。它基本上是激素依赖性的， 尤其，在雄激素的影响下。实际上，皮脂的分泌由皮脂细胞中1型5-α-还原酶从游离睾酮产生的双氢睾酮(DHT)触发和维持。在痤疮中，循环性雄激素以正常水平存在，并且病变因皮脂腺对雄激素的特殊敏感性产生，部分地归因于局部5- α -还原酶极度活跃。皮脂由角鲨烯(12%)、蜡(沈％)、胆固醇、胆固醇酯和甘油三酯的混合物组成。在痤疮丙酸杆菌分泌的脂肪酶水解甘油三酯后，与无痤疮的受试者相比，发生痤疮的皮肤的皮脂含有较高浓度的(促炎性)脂肪酸和氧化角鲨烯。同时与下层的表皮表面相比，粉刺中的亚油酸(抗炎性)是不足的。促炎脂质和抗炎脂质之间平衡的这种倒转是痤疮的发病学因素，即作为粉刺形成前奏的毛囊上皮角化病变。在一方面，过氧化的角鲨烯激活炎症的脂质介质(白三烯B4和前列腺素E2增加)和IL-6的产生。在另一方面，亚油酸的减少造成过度角化并且使得表皮更有通透性和更脆弱，因而促进微生物的生长和细胞因子(特别是白细胞介素-Ια)和趋化性物质的产生，这诱导炎症。过度角化和粉刺形成过度角化是铺衬毛囊皮脂腺内壁的细胞(角质细胞)的异常增加。角质细胞极快地剥落并且引起微粉刺的形成。毛囊皮脂腺管的阻塞在漏斗部内发生。这归因于角质形成细胞增殖、粘附和分化的异常，所述角质形成细胞彼此不分开并且阻塞管道的管腔。在正常环境下，角质细胞分开，这允许皮脂自由地通过小孔。在过度角化的情况下，角质细胞保持彼此接合，从而阻塞皮脂的出口。因而，皮脂不仅被过多分泌，其排出也因小孔变窄而受限， 所述小孔终归堵塞。截留于毛囊皮脂腺和细胞残片内部的皮脂流形式坚硬和略微发白的皮脂塞，所述的皮脂塞称作微包囊或封闭性粉刺。角质形成细胞过度增殖与健康对照受试者相比，毛囊皮脂腺管的角质形成细胞在发生痤疮的受试者中具有较高的增殖指数(Ki-67标签)。在损害区域和在表面健康的痤疮区域内存在增生指数的增加。它特别与IL-I α产生有关，其中所述的IL-I α产生是微粉刺特征(过度增殖和异常分化)的原因。粘附分子的作用整联蛋白是确保角质形成细胞之间结合的粘附分子。它们特别在调节角质形成细胞增殖和迁移方面发挥作用。在痤疮中，整联蛋白α 2、α 3和α 5的表达受痤疮小囊(follicle)的漏斗内角质形成细胞调节。这些调节也可以在微粉刺形成中发挥作用。皮脂的组成的作用皮脂分泌过多通过稀释作用降低皮脂的亚油酸浓度。这种亚油酸缺乏以及游离脂肪酸增加诱导了漏斗内角质形成细胞分化异常，这对微粉刺形成并且还对触发炎症产生影响。细菌性增殖/炎症炎性现象在痤疮中发挥重要作用，因为它们导致病变进展，特别在炎性损害形成以及疤痕出现方面。这种炎性过程是多因素的并且是痤疮丙酸杆菌增殖的直接或间接结果。痤疮丙酸杆菌是皮肤菌群的共栖细菌。在正常皮肤中，痤疮丙酸杆菌在毛囊皮脂腺的基部发育并且借助皮脂抵达表皮表面。在痤疮中，毛囊管道中角质细胞的异常聚集和过量的皮脂为痤疮丙酸杆菌的发育创造了理想环境。痤疮丙酸杆菌增殖导致病变期间的炎性过程。痤疮丙酸杆菌作用机制痤疮丙酸杆菌产生了引起痤疮炎性阶段的多种趋化因子、促炎性分子和蛋白酶。在一方面，由痤疮丙酸杆菌产生的脂肪酶将皮脂甘油三酯水解成游离脂肪酸，所述脂肪酸是刺激性的并且向粒细胞释放趋化性物质。这些嗜中性粒细胞随后在毛囊周围组织中释放溶酶体酶，所述溶酶体酶引起毛囊皮脂腺壁的破裂，伴随炎症的彻底蔓延。在另一方面，痤疮丙酸杆菌借助免疫细胞上的钟样受体(TLR2和TLR4)利用直接免疫力(immediate immunity)，从而诱导细胞的突然活化，同时释放炎性细胞因子 (IL-1 α、TNF α、IL-6, IL_8、TGF α )。角质形成细胞也通过痤疮丙酸杆菌刺激后分泌细胞因子，尤其IL-I α ,TNFa和趋化因子IL_8而直接涉及。IL_8产生的增加与毛囊的过度角化相关，并且为炎性细胞涌向毛囊皮脂腺负责(化学吸引能力)。痤疮丙酸杆菌对TLR和转录因子NF κ B的激活还诱导MMP (特别是MMP_1、MMP_2、 MMP-3和MMP-9)的释放。这些蛋白酶攻击位于毛囊皮脂腺周围的结缔纤维并且参与扩张的毛囊壁的削弱和破裂以及真皮中炎症的蔓延。它们也为疤痕的形成负责。此外，在倾向于形成疤痕的痤疮患者当中，炎症反应更强烈并且持续更长，伴随高度的血管发生。在这个意义上，通过增加灌注皮肤的血管的通透性、通过攻击炎性/内皮细胞和通过促进血管发生，血管内皮生长因子(VEGF)在触发这些损害中发挥积极作用。最后，痤疮丙酸杆菌通过与受体结合在无抗原提呈细胞介入的情况下充当直接活化T淋巴细胞的超抗原，这更快速和更有效地诱导效应细胞的活化。因而放大了炎症反应。 最终，扩展的炎症反应造成了伴有丘疹、小疱和结节出现的临床表现。
本发明人已经发现五味子果实肽提取物具有此前从未描述过的美容性质和皮肤病学性质。本发明的目的是用来治疗或预防痤疮的化妆品、营养药或皮肤病学组合物，其包含与合适赋形剂组合的华中五味子或北五味子果实肽和糖提取物。在本发明的优选实施方案中，所述肽与糖提取物源于华中五味子。根据本发明的优选实施方案，肽与糖提取物相对于该组合物的总重量按重量计以 0. 01% 15%、更优选地0. 5%范围的百分数存在于所述组合物中。根据本发明的优选实施方案，所述肽与糖提取物包括-5%至 90%肽，和-5%至 90% 总糖，其中所述百分数相对于所述肽提取物的干物质的总重量计算。本发明的肽与糖提取物有利地具有以下规格-10%至 50%肽，和-10%至 60% 总糖。在本申请中，术语“肽提取物”、“肽与糖提取物”和“五味子肽”具有相同的意思， 并且可互换地用来指相同的果实提取物。尤其，所述肽提取物不含有木脂体，所述的木脂体直至今日被认为是该果实的活性物质。根据本发明的优选实施方案，通过包括以下相继步骤的方法有利地获得所述肽提取物从五味子果实开始，通过超临界CO2提取法产生粗制油和脂油饼。将提取脂质后获得的五味子浆果油饼分散于水中。随后，使用纤维素酶和α-淀粉酶的混合物，将淀粉和纤维 (纤维素、半纤维素等)水解，并且通过蛋白酶水解蛋白质。在反应结束时，热处理使所述酶变性。在离心后，在具有15kDa临界值的膜上通过超滤法和透滤法纯化反应介质，以消除残余蛋白质(渗余物)。随后将渗透物进行纳米过滤以消除矿物盐，并且然后将肽提取物用活性炭漂白并且随后过滤和回收。最后，将产物无菌地过滤(0.2μπι)并且可以冻干或包装。表1 相对于干物质以百分数计五味子的肽与糖提取物的分析组成的实例本发明涉及用于治疗或预防痤疮的化妆品、营养药或皮肤病学组合物，其包含五味子果实的肽和糖苷提取物以及合适的赋形剂。优选地，该提取物从华中五味子获得。该组合物也可以包含选自皮脂调节剂、抗细菌和/或抗真菌剂、角质层分离剂和/或角质层调节剂、收敛剂、抗炎和/或抗刺激剂、抗氧化和/或自由基清除剂、结瘢剂、抗老化剂或润湿剂的至少一种抗痤疮物质。本发明还涉及美容治疗痤疮的方法，其特征在于将本发明的化妆品组合物施加至患病的皮肤区域，或在于患病的个体口服服用本发明的营养药组合物。