用二价锰离子溶液稳定或再活化肌酸酐传感器的方法
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专利名称:用二价锰离子溶液稳定或再活化肌酸酐传感器的方法用于测定生理样品参数的传感器广泛应用在化学、生物学和生理学各个领域。可利用含有合适的一种或多种酶的传感器测定可被生物活性分子,如酶,降解的物质的存在和其浓度。这些传感器常指生物传感器。已知生物传感器应用电化学和光度测定原理。在生理液体样品,例如全血、血清或尿中,肌酸酐的测定对于评价肾功能是重要的。磷酸肌酸储存于脊椎动物的肌肉中,并且提供能量储备。其不可逆地转化为肌酸酐(一种降解产物)和高能磷酸基(phosphate group)。在正常肌肉功能范围内,大约每天有磷酸肌酸的总量1-2%转化为肌酸酐。肌酸酐释放入血液,并且由肾清除。因此,在健康个体中,肌酸酐的水平在约35至约75 μ M相对恒定。如果血液中肌酸酐的水平增加,其可能为某种肾机能障碍的标志。在这种情况下,肌酸酐的水平可增加至高达2,000 μ M0肌酸酐可通过包含各种酶的生物传感器测量,所述酶例如肌酸酐亚胺水解酶(通过NH3测量)或肌酸酐酰胺水解酶。肌酸酐酰胺水解酶也指“肌酸酐酶”。在肌酸酐酶存在下,在生理液体中的肌酸酐水平通过导致H2O2形成的酶反应级联测定,其可依次通过电流计的或光度计的方法检测。在一些系统中,还可使用酶(如过氧物酶)或指示剂(如发光团)。酶的反应级联包含肌酸酐酶(EC 3. 5. 2. 10),肌酸酰胺水解酶(EC3. 5. 3. 3_ “肌酸酶”),和肌氨酸氧化酶(EC I. 5. 3. I),见下列反应本发明提供用于稳定肌酸酐传感器的方法,所述肌酸酐传感器包含作为生物活性分子的肌酸酐酶。通过将肌酸酐酶暴露于足量的,浓度范围在0.01至150μm的二价锰离子以稳定肌酸酐酶。通过将传感器暴露于含有二价锰离子的溶液,或通过在传感器中引入提供持续释放的二价锰离子的组合物,从而可获得稳定肌酸酐传感器的效果。
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