专利名称：哺乳动物耳蜗毛细胞专用培养液的制作方法人类听カ功能的基础是存在于颞骨耳蜗内的听觉感受器官，即柯蒂氏器官(organof Corti) 0柯蒂氏器官内特殊的感觉神经上皮细胞，又称为毛细胞，可以将通过外耳和中耳传入内耳基底膜的声能转化为神经冲动传入大脑。大多数感音神经性耳聋是由于各种原因造成内耳毛细胞死亡或损伤所致。在现实生活中，有很多因素如噪音、耳神经毒性药物(氨基糖甙类抗生素、抗肿瘤药物等)和缺血等都可能造成内耳毛细胞损伤。因此，研究内耳毛细胞功能和损伤引起毛细胞的病理改变及其机制是了解感音神经性耳聋发生和发展 的重要基础。在体内情况下，耳蜗毛细胞浸浴在柯蒂氏器内淋巴液中。在进行体外培养试验吋，通常使用目前在细胞培养中常规使用的培养液，为高钠离子浓度和低钾离子浓度。在以往的研究工作中，已经有人注意到培养液中的钾离子浓度过低，导致耳蜗毛细胞在在普通培养液中无法正常生长。但是采取简单地在普通培养液基础上增加钾离子浓度的方法无法提高耳蜗毛细胞体外培养成功的机会。因此需要对现有的细胞体外培养液进行改进。
本发明所要解决的技术问题是，提供ー种能够用于哺乳动物耳蜗毛细胞体外培养、延长细胞体外成活时间的哺乳动物耳蜗毛细胞专用培养液。本发明的培养液中溶剂为蒸馏水，每升培养液中除蒸馏水外还包括以下重量的物质成份葡萄糖4. 5g、酚红钠O. 0159g、丙酮酸钾O. llg、盐酸左旋精氨酸O. 084g、胱氨酸O. 048g、丙氨酰谷氨酸O. 868g、甘氨酸O. 03g、组氨酸O. 042g、左旋异白氨酸O. 105g、亮氨酸O. 105g、盐酸左旋赖氨酸O. 146g、左旋蛋氨酸O. 03g、苯丙氨酸O. 066g、丝氨酸O. 042g、左旋苏氨酸O. 095g、左旋色氨酸O. 016g、左旋酪氨酸O. 072g、颉胺酸O. 094g、泛酸鈣O. 004g、氯化胆碱O. 004g、叶酸O. 004g、肌醇O. 0072g、烟酰胺O. 004g、盐酸吡多辛O. 004g、核黄素O. 0004g、盐酸硫胺O. 004g，培养液中还包含有无机盐，其特征是，加入无机盐后使培养液的钾离子水平范围在100-150mEq/L，钠离子水平范围为< 10mEq/L。本发明作为较接近内淋巴液离子成分的毛细胞专用培养液，可实现成熟耳蜗毛细胞体外培养达到3天以上，为耳蜗毛细胞的体外研究奠定了基础。本发明涉及一种生物体外培养材料，具体是一种哺乳动物耳蜗毛细胞专用培养液。培养液中溶剂为蒸馏水，除蒸馏水外还包括以下重量的物质成份葡萄糖、酚红钠、丙酮酸钾、盐酸左旋精氨酸、胱氨酸、丙氨酰谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、左旋异白氨酸、亮氨酸、盐酸左旋赖氨酸、左旋蛋氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、左旋苏氨酸、左旋色氨酸、左旋酪氨酸、颉胺酸、泛酸鈣、氯化胆碱、叶酸、肌醇、烟酰胺、盐酸吡多辛、核黄素、盐酸硫胺，培养液中还包含有无机盐，加入无机盐后使培养液的钾离子水平范围在100-150mEq/L，钠离子水平范围为<10mEq/L。本发明可实现成熟耳蜗毛细胞体外培养达到3天以上，为耳蜗毛细胞的体外研究奠定了基础。