专利名称：口蹄疫病毒抗原保存技术的制作方法
一种使用上述保护剂对口蹄疫病毒抗原进行保存的方法是给待保存的口蹄疫病毒液中加入50％的保护剂后，置-20℃～-70℃下或液氮(-196℃)中保存。本发明提供的上述口蹄疫病毒抗原保存技术，是在国家攀登计划和中国农业科学院兰州兽医研究所所长基金的资助下，对口蹄疫病毒抗原进行深入研究而确立的。该保存技术方法简单、便捷，对生产工艺、系统、设施的要求不严，保存量大，可操作性强，能满足口蹄疫疫苗工业化大生产的要求，为口蹄疫疫苗/抗原库的建立和应用提供不可或缺的重要技术支撑。(四)具体实现方式②效果分析将实施例1配制的保护剂，按50％的量加入到口蹄疫病毒液中，并设未加保护剂的对照病毒，然后将它们同时在37℃下分别静置40hr和50hr，测定病毒的感染性滴度(TCID50)，结果，加入保护剂的口蹄疫病毒液，对敏感细胞TCID50的仍可分别达到10-6.0和10-3.0，而未加保护剂的对照病毒则分别降至10-1.67和0。众所周知，口蹄疫病毒对温度十分敏感，60℃15分钟就可使其完全失活，所以我们选择了37℃下静置40和50小时这一容易使口蹄疫病毒降解的环境来验证保护剂对口蹄疫病毒的保护性能。为进一步验证保护剂对口蹄疫病毒的保护性能，将加入保护剂的病毒和未加保护剂的对照病毒分别在-20℃下保存8个月后，未加保护剂的病毒其140s抗原含量比加保护剂的下降了13.67％，对敏感细胞的半数感染量下降了10倍；动物试验表明，用加入保护剂后-20℃下保存300天的病毒抗原配制的疫苗免疫豚鼠的中和抗体效价(log10SN50)2.4，比未加保护剂的高0.6个滴度，实验表明，加入保护剂后-20℃下保存8个月的病毒抗原仍然具有良好的免疫原性；-20℃下保存3年的已灭活超滤浓缩病毒其140s抗原含量比液氮中保存的下降了6.45％。以上表明，加入保护剂后口蹄疫病毒的保存效果明显优于未加保护剂的，液氮保存效果略优于-20℃保存的，若将二者结合起来，即加入保护剂后在液氮中保存，保存效果更佳。②效果分析将实施例2配制的保护剂，按50％的量加入到口蹄疫病毒液中，并设未加保护剂的对照病毒，然后将它们同时在37℃下分别静置40hr和50hr，测定病毒的感染性滴度(TCID50)，结果，加入保护剂的口蹄疫病毒液，对敏感细胞TCID50的仍可分别达到10-4.5和10-2.3，而未加保护剂的对照病毒则分别降至10-1.67和0。②效果分析将实施例3配制的保护剂，按50％的量加入到口蹄疫病毒液中，并设未加保护剂的对照病毒，然后将它们同时在37℃下分别静置40hr和50hr，测定病毒的感染性滴度(TCID50)，结果，加入保护剂的口蹄疫病毒液，对敏感细胞TCID50的仍可分别达到10-5.0和10-1.5，而未加保护剂的对照病毒则分别降至10-1.67和0。
一种口蹄疫病毒抗原保存技术，即将口蹄疫病毒液中加入一种对口蹄疫病毒有效抗原具有良好保护性能的保护剂中进行保存。该保护剂的配制方法及口蹄疫病毒抗原保存方法是用0.5％的水解乳蛋白液做母液，加入2～16％的甘油、2～8％的蛋白胨和5～20％的蔗糖，充分混匀后，10～15磅高压灭菌15min，无菌检验阴性后，按50％的量加入到口蹄疫病毒液中，置－20℃～－70℃下或液氮(－196℃)中保存。该保存技术是在国家攀登计划和中国农业科学院兰州兽医研究所所长基金的资助下，对口蹄疫病毒抗原进行深入研究而确立的。其方法简单、便捷，对生产工艺、系统、设施的要求不严，保存量大，可操作性强，能满足口蹄疫疫苗工业化大生产的要求，为口蹄疫疫苗/抗原库的建立和应用提供了不可或缺的重要技术支撑。