专利名称：利用根诱导原球茎快速繁殖大花蕙兰的方法大花蕙兰(Cymbidium hybridium)为兰科兰属多年生草本植物,是近几年在国际花卉市场上流行的高档室内盆栽花卉及高档切花，因其花色艳美，花期较长(2-3月)，又在冬春节日期间开放，所以具有极高的观赏价值。大花蕙兰多为杂交品种，种子繁殖无法保持其品种特性，且结实率也相对较低。故传统栽培靠分株繁殖，因而周期长，繁殖系数低，繁殖速度慢，远远不能满足商品化生产的要求。目前，国外已将组织培养技术应用于大花蕙兰的繁殖与生产。国内也有许多研究者对大花蕙兰的组织培养技术进行了大量的研究，并用于商品化生产。 大花蕙兰的组织培养始于20世纪60年代，Morel采用大花蕙兰的茎尖，在含有细胞分裂素的KC培养基上进行培养，茎尖分生组织膨大形成类原球茎，并分化出根和叶，首次获得兰花无病毒小植株Morel G. Producing virus free Cymbidium. Am [J] Orchid Soc Bull，1990 (9) :495_497。Wimber 对 Morel 的方法进行了改进，采用液体振荡培养的方法大大加快了原球茎的增殖速度，短期内可以获得大量再生植株Whimber DD.Clonalmultiplicatication of Cymbidium through t issueculture of the shootmeristem. Am [J], Orchid Soc Bull，1963，32:105-107，此后组织培养技术在兰花生产上得到了广泛的应用。在我国，大花蕙兰的组织培养快繁技术研究起步较晚。一般来说，大花蕙兰组织培养过程包括以下两种方法⑴原球茎途径外植体的导入体胚诱导，原球茎形成原球茎，增殖芽的诱导分化，根的诱导分化，出苗。该方法的优点是增殖系数高，但易产生变异，植株生长弱。⑵直接诱导丛生芽途径外植体的导入，直接诱导丛生芽，丛生芽增殖，根的诱导分化，出苗。该方法缩短了培养时间，降低了成本，植株生长健壮，但其增殖系数不高。迄今为止，大花蕙兰组织培养的过程均存在比较繁琐，成本高等缺点，要想提高效率，降低成本并进行快速繁殖，今后的研究重点应该是简化繁殖过程，尽量避免诱导、继代、育苗和生根4个阶段用不同的培养基，探讨能减少变异又能提高增殖系数，且再生植株生长健壮的大花蕙兰组织培养方法。
本发明所要解决的技术问题在于提供一种利用根诱导原球茎快速繁殖大花蕙兰的方法。本发明通过采用改良后含有特殊成分(6-BA、PIC和水解酪蛋白)的MS培养基进行原球茎的诱导，针对大花蕙兰根外植体，采用特定培养方法，使大花蕙兰根诱导原球茎，诱导率达100%，培养45天后每个根外植体原球茎数达50个，原球茎成活率95%，植株生长健壮，可直接生根。所述的利用根诱导原球茎快速繁殖大花蕙兰的方法，包括以下步骤I)选取大花蕙兰无菌苗的根，接种于培养基中，进行暗培养，培养室温度为25±2°C。2)将暗培养获得的原球茎转到光下进行培养，每天10-16小时光照，温度为25±2°C。 3)原球茎变绿，转接到上述不含特殊成分的培养基中，逐渐发育成正常植株，同时生根。4)室温，打开瓶盖炼苗，I周后种植于温室穴盘中。所述的培养基组分用量为MS基本培养基IL ;蔗糖30000mg/L ;琼脂粉5000mg/L ；以及由6-BA 0. 5mg/L, PIC 0. 5mg/L和水解酪蛋白500mg/L组成的特殊成分。其中，所述的MS基本培养基配方如下表I所示，mg/L表示每升MS培养基中含各成分的晕克数。表I
本发明公开了一种利用根诱导原球茎快速繁殖大花蕙兰的方法，采用改良后含有特殊成分(6-BA、PIC和水解酪蛋白)的MS培养基进行原球茎的诱导，针对大花蕙兰根外植体，采用特定培养方法，使大花蕙兰根诱导原球茎，诱导率达100%，培养45天后每段根外植体原球茎数达50个，原球茎成活率95%，植株生长健壮，直接生根。