专利名称：一种硫酸软骨素的提取方法硫酸软骨素是从动物组织中提取制备的酸性粘多糖，是糖胺聚糖的一种，由D-葡糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖以β-1，4-糖苷键连接而成的重复二糖单位组成的多糖，并在 N-乙酰氨基半乳糖的C-4位或C-6位羟基上发生硫酸酯化。硫酸软骨素对角膜胶原纤维具有保护作用，能促进基质中纤维的增长，增强通透性，改善血液循环，加速新陈代谢，促进渗透液的吸收及炎症的消除；其聚阴离子具有强的保水性，能改善眼角膜组织的水分代谢，对角膜有较强的亲和力，能在角膜表面形成一层透气保水膜，促进角膜创伤的愈合及改善眼部干燥症状。此外，它为关节疼痛患者带来福音，主要表现在一方面提供垫衬作用，缓和行动时的冲击和摩擦，另一方面把重要的氧供和营养素输送至关节，帮助清除关节内的废物。目前，国内外提取硫酸软骨素普遍采用稀碱或浓碱与酶解相结合的方法。稀碱酶解工艺中，稀碱溶液用量大，使在酒精沉淀时，用量更大；浓碱酶解工艺中，碱用量大，为后面的提纯带来困难。
针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供了一种硫酸软骨素的提取方法，是一种以提高产品纯度、节能和提高产品安全性为目的的提取方法，该方法有利于工业化的生产。为了实现上述技术目的，本发明的一种硫酸软骨素的提取方法的步骤如下1、称取市售猪鼻软骨作为原料，剪去结缔组织，洗净后加水煮沸，除去油脂，然后将除去油脂后的猪鼻软骨从水中捞出，用绞肉机绞碎，加入原料猪鼻软骨3倍重量的水，调 pH值至8. 5-9. 0，升温至45-50°C，加入占原料猪软骨重量2 %的牛胰蛋白酶(酶活力为3. 3 万U/g)，在45-50°C下搅拌酶解4-5h，酶解过程中保持反应体系的pH值稳定在8. 5-9. 0 ；2、将酶解液调pH值至6. 8-7.0，依次加入原料猪鼻软骨重量的白陶土、的活性炭粉末，45°C搅拌吸附lh，然后过滤除去白陶土和活性炭，得滤液；3、将滤液的pH值调至6. 0，然后加入其三倍体积的95wt %乙醇，充分搅拌后静置， 去上清液，得沉淀，即为硫酸软骨素粗品；4、加入9倍粗品重量的纯水将粗品溶解，再依次加入粗品重量1 %的氯化钠，1 % 的牛胰蛋白酶(酶活力为3. 3万U/g)，45-50°C下搅拌酶解3-4h，酶解过程中控制反应体系的PH值稳定在8. 5-9. 0，然后升温至90-95°C，保持10-15min以灭酶，然后过滤得过滤液；5、调节过滤液的PH值至2. 0-3. 0，然后用滤膜孔径为5nm的过滤机过滤，以除去无机盐和小分子杂质；6、调节所得滤液的PH值至6. 5，记下此时的溶液体积，然后加入此体积2倍的90wt%乙醇进行沉淀，分离出沉淀后，加入与沉淀等体积的无水乙醇脱水，最后真空干燥得硫酸软骨素精品。本发明方法中用于调节PH值的酸和碱分别是35 37wt%的盐酸和固体氢氧化钠。与现有技术相比，本发明方法的优点和有益效果如下1、采用白陶土和活性炭脱色，既避免了有害物质在产品中的残留，又能保证产品的天然洁白度，所得产品为白色均勻粉末；2、采用本发明的纳滤技术，对液态物料进行分离、浓缩和纯化，均在常温下操作、 无相态变化、高效节能，并且生产过程中不产生污染；3、本法所得产品的纯度高，不产生任何有毒有害物质，安全，无毒副作用，可广泛用于药品、保健品等领域。 下面结合具体的实施例对本发明方法做进一步的详细说明。以下实施例中用于调节PH值的酸和碱分别是35 37wt%的盐酸和固体氢氧化钠。实施例1 一种硫酸软骨素的提取方法，其步骤如下1、称取市售猪鼻软骨lkg，剪去结缔组织，洗净后加水煮沸，除去油脂，然后将除去油脂后的猪鼻软骨从水中捞出，用绞肉机绞碎，加入3kg纯水，调pH值至8. 5，升温至45°C， 加入20g牛胰蛋白酶(酶活力为3. 3万U/g)，在45°C下搅拌酶解4h，酶解过程中保持反应体系的PH值稳定在8.5 ；2、将酶解液调pH值至6. 8，依次加入IOg白陶土、IOg活性炭粉末，45°C搅拌吸附 lh，然后过滤除去白陶土和活性炭，得滤液；3、将滤液的pH值调至6. 0，然后加入其三倍体积的95wt %乙醇，充分搅拌后静置， 去上清液，得沉淀400g，即为硫酸软骨素粗品；4、加入3. 6kg的纯水将粗品溶解，再依次加入4g氯化钠，4g牛胰蛋白酶(酶活力为3. 3万U/g)，45°C下搅拌酶解4h，酶解过程中控制反应体系的pH值稳定在8. 5，然后升温至90°C，保持15min以灭酶，然后过滤得过滤液；5、调节过滤液的pH值至2.0，然后用滤膜孔径为5nm的过滤机过滤，以除去无机盐和小分子杂质；6、调节所得滤液的pH值至6. 5，记下此时的溶液体积，然后加入此体积2倍的 90wt%乙醇进行沉淀，分离出沉淀后，加入与沉淀等体积的无水乙醇脱水，最后真空干燥得硫酸软骨素精品250g。表1实施例1所得产品的检测报告检测项目标准规定检测结果产品纯度^ 76%98. 5%