专利名称：一种六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液质量控制方法中药是我国最具有原创和自主知识产权的产业之一。中成药与饮片是中药的主要 临床应用形式。由于中药疗效的物质基础的复杂性，中成药的质量控制技术手段较为粗放， 体现在中成药的质量控制采用的是工艺制法控制，加上代表性的化学指标性成分定量检测 和制剂定性检查。即，“过程上的定性加点上的定量”。没有全过程的以理化指标为基础的 全面质量控制，这是导致中成药质量、临床疗效稳定性差的重要原因之一。六味地黄丸系北宋名医钱仲阳之名方，始载于《小儿药证直诀》，由熟地黄、山萸 肉、山药、泽泻、牡丹皮、茯苓等六味药以8-4-4-3-3-3重量比例组成。六味地黄丸滋补肾 阴，为治疗肾阴不足的基本药方。现代药理研究表明该方具有免疫系统调节、延缓衰老、降 血糖作用，具有对心血管系统的保护作用，抗肿瘤的作用，能改善肾功能、促进肾脏对体内 代谢产物尿素的排泄等；临床用于治疗慢性肾炎、高血压、糖尿病、神经衰弱等。六味地黄丸浓缩丸为六味地黄丸采用现代制剂工艺对部分药材进行提取浓缩后 改剂而成，其制剂过程较长，制剂过程如下处方熟地黄120g，山茱萸(制)60g，牡丹皮 45g，山药60g，茯苓45g，泽泻45g六味，牡丹皮提取丹皮酚；药渣与山茱萸20. 3g、熟地黄、 茯苓、泽泻加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1. 35-1. 40 的稠膏；山药与剩余山茱萸粉碎成细粉，过筛，混勻；将以上稠膏、细粉、丹皮酚混勻，制丸， 干燥，打光，即得。该制剂过程主要为煎煮和浓缩，药材及提取物受热时间长，现有技术标准 规定了成品需要进行性状鉴别检查含量测定等内容，过程质量控制内容仅仅 规定了操作工艺参数而无过程质量控制手段。近红外光谱定性定量检测技术是建立在传统理化分析手段基础上的二级分析方 法，依赖于近红外光谱仪、计算机技术和化学计量学软件基础，是目前应用在化工烟草、石 油等行业较为成熟的在线和快速检测手段。近红外光谱法技术应用于中成药的质量控制研究近年来逐渐增加。仅就六味地黄 丸成品的单成分快速测定指标就包括水分、丹皮酚、熊果酸；还有多指标同时测定，如六味 地黄丸成品水分、丹皮酚、马钱苷三指标的同时测定[6]；也有进行近红外分析模型与毛细管 电泳指纹(特征)图谱相关性[7]，都获得了很好的预测模型。此外，文献M还成功建立了 从18种中药丸剂中定性鉴别六位地黄丸的近红外快速鉴别分析方法，文献[9]还成功建立 以均勻度为基础的六味地黄丸粉末混合过程在线近红外监测方法，文献[1°]还成功建立以 标准样为基础的六味地黄丸近红外质量控制及真伪鉴别模型。但尚未见到以生产过程控制 为目标，同时进行理化指标测定的研究报道。
为了进一步提高和稳定六味地黄丸浓缩丸的产品质量，克服中成药无生产过程的 理化指标在线控制，本发明应用声光可调(AOTF)-近红外光谱技术对六味地黄丸浓缩丸比 重和指标成分进行连续取样和现场分析，结合传统定量检测，建立了在线应用的六味地黄 丸浓缩丸提取浓缩液比重、指标成分的近红外模型。本发明的质量控制方法，具体涉及一种快速测定六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液近 红外光谱，比重及丹皮酚和马钱苷含量的方法，其特征在于包括如下步骤步骤1、测定合格六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液的比重、丹皮酚和马钱苷含量，并 采集近红外光谱；步骤2、采用化学计量学软件分别建六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液近红外光谱与 比重、丹皮酚和马钱苷含量之间的对应模型；步骤3、测定待测的六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液样品的近红外光谱；步骤4、利用对应模型，通过化学计量学软件分别获得待测的六味地黄丸浓缩丸提 取浓缩液样品的比重、以及丹皮酚和马钱苷的含量。所述六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液制备及测定方法如下按照法定标准六味地黄丸浓缩丸处方，取处理好的牡丹皮，提取丹皮酚，收集丹皮 酚；药渣与山茱萸、熟地黄、茯苓、泽泻加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液；取煎煮液和丹 皮酚蒸馏母液，滤过，滤液于50 70°C真空浓缩至相对比重为1. 35 1. 40的稠膏，现场收 集浓缩液，取样测定比重、丹皮酚和马钱苷含量，并采集近红外光谱。本发明所述的方法，其特征在于采集六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液近红外光谱 采集时，采用透射方式进行，每一张光谱都是1-1000次扫描的平均结果，分辨率0. 3-20nm, 扫描光谱范围为1100-2300nm。本发明所述的方法，其特征在于采集六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液近红外光谱 时，采用透射方式进行，每一张光谱都是200-500次扫描的平均结果，分辨率l-5nm，扫描光 谱范围为1100-2300nm。本发明所述的方法，其特征在于采集六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液近红外光谱 时，采用透射方式进行，每一张光谱都是300次扫描的平均结果，分辨率2nm，扫描光谱范围 为 1100-2300nm。本发明所述的方法，其特征在于采集六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液近红外光谱 时，以现场取样方式、在线取样方式和旁线取样方式之一进行。本发明所述的方法，其特征在于样品马钱苷采用RP-HPLC对连续收集的所有浓 缩液样品进行含量分析，采用色谱柱YMC ODS分析柱(6 X 150mm, 5 μ m,柱温25°C )，流动相 为四氢呋喃-甲醇-乙腈-0.05%磷酸溶液(1 :4:8: 87)，进样体积20uL，流速Iml/ min, UV检测波长236nm;本发明所述的方法，其特征在于样品丹皮酚采用RP-HPLC对连续收集的所有浓 缩液样品进行含量分析，采用色谱柱YMC ODS分析柱(6 X 150mm, 5 μ m,柱温25°C )，流动相 为甲醇-水(58 42)，进样体积20uL，流速lml/min，UV检测波长274nm。本发明所述的方法，其特征在于步骤2中模型的建立包括(1) 一阶导数9点 平滑法(savitzky-golay)光谱预处理；⑵采用偏最小二乘法(PLSl)、交叉-验证法(cross-validation)用Unscrambler定量分析软件建立模型；(3)模型校正和预测效果验 证。本发明所述的方法，其特征在于步骤2中模型的建立包括(1) 一阶导数9点 平滑法(savitzky-golay)光谱预处理；⑵采用偏最小二乘法(PLSl)、交叉-验证法 (cross-validation)用Unscrambler定量分析软件建立模型；(3)模型校正和预测效果验 证；(4)精密度试验；(5)稳定性试验。本发明采用AOTF-近红外光谱技术建立六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液比重、马钱 苷及丹皮酚含量的数学模型，可以快速在线监测六味地黄丸浓缩丸提取浓缩过程。该方法 操作简便、分析迅速，为六味地黄丸浓缩丸提取浓缩过程中指标成分及物理指标快速定量 分析和生产过程中的在线检测，控制产品的质量提供了高效的分析方法。图1马钱苷对照品HPLC图谱图2六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液样品HPLC图谱1图3丹皮酚对照品HPLC图谱图4六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液样品HPLC图谱2图5六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液样品近红外光谱原始总光谱6六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液样品近红外光谱一阶导数光谱图

本发明提供一种六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液质量控制方法，包括如下步骤步骤1、测定合格六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液的比重、丹皮酚和马钱苷含量，并采集近红外光谱；步骤2、采用化学计量学软件分别建六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液近红外光谱与比重、丹皮酚和马钱苷浓度之间的对应模型；步骤3、测定待测的六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液样品的近红外光谱；步骤4、利用对应模型，通过化学计量学软件分别获得待测的六味地黄丸浓缩丸提取浓缩液样品的比重、丹皮酚和马钱苷浓度。