专利名称：一种制备Herperione的方法及其应用、其胶囊剂及胶囊剂的制备方法和应用的制作方法我国是病毒性肝炎高发区，其中的慢性乙型肝炎因其病情逐渐发展、不易控制、预 后差、发病机理复杂而尤为引起关注。目前全国有近1.3亿人是乙型肝炎病毒携带者，5000 万人患有慢性肝炎，每年死于肝炎的患者约23万人(2002年12月国家卫生部的一项调查 统计数据表明肝炎依然是我国发病率和死亡率均居首位之传染病种)，加上其它已知和 未知的因病毒异化引发的病毒性肝炎病种，导致我国人群的发病率更高，危害性更大。据不 完全统计，我国每年直接用于肝炎防治的医疗费用超过1000亿元人民币，因此，慢性乙型 肝炎的治疗仍为当前肝病领域中的难题之一，国内外盛行的干扰素、核苷类药物治疗虽然 具有一定疗效，但前景不容乐观。目前，病毒性肝炎治疗尚无根本性突破，其总体患病人数 仍有不断上升趋势，而肝炎慢性化的问题仍未解决。由于国内围产期及幼年感染比例高、乙 肝疫苗在部分地区普及程度较低，原有HBV携带人群基数巨大等原因，在目前乃至未来数 十年内，乙肝病毒等引起的慢性肝炎仍将是严重危害我国人民健康的疾病之一。波棱瓜子是藏药中治疗肝病的首选药物之一，在用于治疗肝病的藏药成方制剂 中，有一半以上入药。但是，由于其有效成分为难溶性木脂素类成分，大大影响药物的溶出 和吸收。在CN1857367的专利公开文件中，发明人公开了从波棱瓜子中提取出包含PEDI、 PED II、herpetal、herpetin、herpetrione 禾口 herpetetrone 的波梭瓜子提取物，由于提取 工艺的限制不能将其中的有效成分单独分开，因此造成了在治疗乙肝时用药质量不好控 制，针对性不强的缺点。
为了解决上面提到的现有技术所存在的问题，本发明的一个目的是公开了一种制 备Herperione的方法。本发明的第二个目的在于公开了 Herperione在制备治疗乙肝药物中的应用。本发明的第三个目的在于公开了由Herperione制备所得的胶囊剂及其制备方法 和应用。本发明的技术方案如下一种制备Herperione的方法，包括以下步骤(1)、对波棱瓜子粗粉进行醇提，得到煎煮液；(2)、对步骤(1)获得的煎煮液采用板框抽滤法进行抽滤，滤液于60°C减压浓缩至 2g生药/ml，放冷，高速离心，分去油层和水层，沉淀加入石油醚，脱去残留的脂肪油，静置， 倾去上清液，重复操作至石油醚无色；沉淀物常温挥至无石油醚味，加入生药量1/16 1/4的浓度为10%的乙醇溶液持续搅拌lOmin，离心，弃上清液，重复操作2次；取沉淀，加入生 药量1/5的乙酸乙酯，持续搅拌lOmin，离心，取上清液，沉淀重复洗涤4次；合并乙酸乙酯 溶液，于50°C减压浓缩，干燥，得Herperione的含量达到15%以上的粗品；(3)粗品以8倍量溶剂溶解，其中所述溶剂由石油醚和丙酮组成，石油醚和丙酮之 间的质量比为2 3，上中压硅胶柱，其中所述中压硅胶柱由三支粒度为200 300目的 120g硅胶柱串联组成，流动相由石油醚乙酸乙酯丙酮按2 7 1的质量比组成，检测 波长240nm，流速120ml/min，收集馏分，回收干燥，即得目标产物Herperione。上述技术方案中所述的制备Herperione的方法，其中，所述步骤(1)的醇提过程 是将波棱瓜子粗粉用6 10倍粗粉量的80%乙醇进行煎煮提取，提取2次，每次2小时，合 并煎煮液。上述技术方案中所述的制备Herperione的方法，其中，所述步骤O)中在沉淀中 加入的石油醚的量为生药量的1/4，10%的乙醇的加入量为生药量的1/8。上述技术方案中所述的制备Herperione的方法，其中，所述步骤(3)中上中压硅 胶柱的上样量为硅胶填料的1/5到1/20，优选上样量为35g。用上述技术方案中任一技术方案所述的制备Herperione的方法制备所得的 Herperione在制备治疗乙肝药物中的应用。一种胶囊剂，包括活性成分和药学上可接受的辅料，其中，所述活性成分为用上述 技术方案中任一技术方案所述的方法制备所得的Herperione。上述技术方案中所述的胶囊剂，其中，所述胶囊剂中各成分的重量比 为Herperione 十二烷基硫酸钠poloxamer 微晶纤维素羧甲淀粉钠 100 2 8 30 3。上述技术方案中所述的胶囊剂的制备方法，包括下述步骤称取所述重量配比 的Herperione、十二烷基硫酸钠、poloxamer,微晶纤维素、羧甲淀粉钠和硬脂酸镁，将 Herperione、十二烷基硫酸钠、poloxamer、微晶纤维素和羧甲淀粉钠，加入蒸馏水，充分搅 拌混勻，4000r/m的探头超声5分钟后，在压力为IOOObar条件下高压乳勻10圈，得混悬液； 真空干燥，过80目筛，70%乙醇制粒，干燥，制粒，分装胶囊，即得胶囊剂。上述技术方案中所述的胶囊剂在制备治疗乙肝药物中的应用。本发明具有以下有益效果1、在本发明Herperione的制备工艺中采用了三个硅胶柱串联的形式，能够使 Herperione的提纯比例达到90%以上，满足了用药上的要求；2、由于采用了上述技术方案，获得了 Herpetrione及其成药Herpetrione胶囊，且 具有提取及制剂工艺稳定、质量可控、处方量用量小、疗效高、释药快、口服易吸收等优点；3、用本发明所述的提取工艺将对乙肝具有针对性治疗效果的Herpetrione单独 提取，纯度高，达到国家食品药品监督管理局的1类中药注册要求，同时采用先进的纳米混 悬技术给药，因此具有药物用量小、疗效高、释药快、口服易吸收等优点。图1为试验例三Herpetrione对照品的高效液相色谱图；图2为试验例四中试验1的色谱图3为试验例四中试验2的色谱图；图4为试验例四中试验1、2接收液的HPLC分析图谱；图5为试验例四中空白样品检测的HPLC分析图谱；图6为试验例四中试验3的色谱图；图7为两种不同溶出介质下的Herpetrione胶囊累积溶出曲线；图8为Herpetrione胶囊累积溶出速率曲线，其中红色代表Herpetrione纳米混 悬剂胶囊，蓝色代表普通胶囊；图9为本发明的制备工艺流程图。为使本发明的技术方案便于理解，以下结合
对本发明作进一步的说 明实施例一=Heroerione 的制备实施例1-1、Herperione 的制备(1)、对波棱瓜子干燥品进行粉碎后获得波棱瓜子粗粉，粗粉按照《中华人民共和 国药典》(一部，2005年版)的定义为粗粉是指全部通过标准二号筛，但混有能通过标准四 号筛的粉末不超过40%的粉末。；(2)、对波棱瓜子粗粉用6 10倍粗粉量的80%乙醇进行煎煮提取，提取2次，每 次2小时，合并得到煎煮液；(3)、对步骤(1)获得的煎煮液采用板框抽滤法进行抽滤，滤液于60°C减压浓缩至 2g生药/ml，放冷，高速离心，分去油层和水层，沉淀加入生药量1/4的石油醚，脱去残留的 脂肪油，静置，倾去上清液，重复操作至石油醚无色；沉淀物常温挥至无石油醚味，加入生药 量1/8的浓度为10%的乙醇溶液持续搅拌lOmin，离心(3000r/min，5min)，弃上清液，重复 操作2次；取沉淀，加入生药量1/5的乙酸乙酯，持续搅拌lOmin，离心，取上清液，沉淀重复 洗涤4次；合并乙酸乙酯溶液，于50°C减压浓缩，干燥，得粗品；(4)粗品以8倍量溶剂溶解，其中所述溶剂由石油醚和丙酮组成，石油醚和丙酮之 间的质量比为2 3，上中压硅胶柱，其中所述中压硅胶柱由三支粒度为200 300目的 120g硅胶柱串联组成，流动相由石油醚乙酸乙酯丙酮按2 7 1的质量比组成，检测 波长240nm，流速120ml/min，收集馏分，回收干燥，即得目的产物。实施例1-2、Herperione 的制备本实施例步骤与实施例1-1相同，区别在于步骤(2)中加入的乙醇为8倍粗粉 量；步骤(3)中10%乙醇的加入量为生药量的1/16。实施例1-3、Herperione 的制备本实施例步骤与实施例1-1相同，区别在于步骤(2)中加入的乙醇为9倍粗粉 量；步骤(3)中10%乙醇的加入量为生药量的1/4。对实施例1-1、1_2和1-2所获得的目的产物进行质谱分析，其结果如下质谱分析[M+H]+ = 553，得到分子量为552。峰位归属13C中化学位移δ = 198. 423呈现一羰基不饱和碳的响应信号，151. 641、147. 969、147. 694、147. 322、145. 887、142. 999 显示为六个连接有氧原子的芳 香羰，132. 731,132. 002,128. 785,123. 258表明分子中存在四个非氧取代芳香碳质子。 123. 079,118. 660,117. 216,114. 680,114. 389,111. 406,109. 579,108. 024 表明分子中有六 个未取代芳香碳。13C谱在85. 984,85. 841,71. 204,71. 162,54. 979,54. 637位移表明四氢 呋喃并四氢呋喃环的存在，此外，化学位移在53. 972,53. 841,53. 739的相应信号提示分子 结构中包含三个甲氧基团。13C NMRi普与已知文献(Kaouadji M,Favre BJ. Herpetrione, a trimeric lignoide isolated from Herpetospermum caudigerum Wall[J]. Tetrahedron Lett, 1983,24(52) :5881-5884)中报道的herpetrione结构相应，同时，IH NMR的峰位归属 能够印证上述推断。经质谱分析，本发明的目的产物为herpetrione，结构式为


本发明一种制备Herperione的方法及其应用、其胶囊剂及胶囊剂的制备方法和应用，属于中药制剂技术领域。所述制备Herperione的方法包括(1)对波棱瓜子粗粉进行醇提，得到煎煮液；(2)对煎煮液进行抽滤浓缩，脱去脂肪油至石油醚无色；常温挥至无石油醚味，加入10％的乙醇溶液洗涤；取沉淀用乙酸乙酯反复溶解，回收乙酸乙酯干燥得粗品；(3)粗品上硅胶中压制备，收集馏分，回收干燥得Herperione。其胶囊剂是通过探头超声、高压乳匀，得混悬液后，干燥制粒灌装所得。其中Herperione及其胶囊剂均用于治疗乙肝。本发明具有提取及制剂工艺稳定、质量可控、处方量用量小、疗效高、释药快、口服易吸收等优点。