一种治疗大菱鲆淋巴囊肿病的中药组合物的制作方法【技术领域】[0001]本发明属于海洋鱼类药物【技术领域】，具体涉及一种治疗大菱鲆淋巴囊肿病的的中药组合物，及该组合物的制备方法。[0002]大菱鲆隶属于鲽形目，鲆科，菱鲆属，是一种冷水底栖海水鱼类,原产于大西洋东北部、北海、地中海及波罗的海等海域。大菱鲆因具有肉质好，营养价值高，生长快，适合低水温生活，养殖效益高以及深受消费者喜爱等优点而相继成为各国开发的优质海水养殖鱼类之一。虽然我国人工养殖大菱鲆要比欧洲晚4-5年，但近几年我国大菱鲆的年产量已经达到每年2万吨以上，年产值突破20亿，是中国北方地区的主要海水养殖品种之一。然而随着养殖规模的扩大和水体环境的恶化，各种疾病所造成的危害也逐渐为养殖户和水产专家所重视。[0003]淋巴囊肿病是发现最早的鱼类病毒性疾病之一，目前已知有100多种养殖和自然水域中的鱼类受其感染。我国养殖的大菱鲆、鲈鱼、真鲷、红斑笛鲷、石斑鱼、牙鲆和东方纯等都曾发现过。此病在10月至翌年5月，水温10-25摄氏度时为流行的高峰期，在我国全年均可发生。网箱养殖的感染率可达60%以上，池塘为20%-27%。此病在2龄以上的鱼，一般不引起死亡，但鱼体较瘦，外表难看，失去商品价值；有的病鱼囊肿可脱落自愈。对I龄的幼鱼可引起死亡，发病后两个月内死亡率可达30%。淋巴囊肿病可导致工厂化养殖大面积暴发流行，感染率高，损失惨重，因此加强病害综合防治非常重要。[0004]目前水产养殖中对鱼类疾病的预防与治疗主要的是使用各种化学药物和抗生素。鱼类养殖过程中长期用药使得病菌耐药性增强，大量抗生素的使用还会使鱼类的免疫能力下降，同时水产品中残留的药物也严重影响食品的安全和人类的健康。[0005]应用中草药来治疗大菱鲆的淋巴囊肿病，复方应用，在抗病毒的同时增强了大菱鲆的免疫力，符合发展无公害渔业、生产绿色水产品的需求。
[0006]本发明的目的是提供一种治疗大菱鲆淋巴囊肿病的中药组合物，及该组合物的制备方法，本发明制备的中药组合物临床应用效果好、成本低、纯中药制剂、无残留，具有较好的应用前景。[0007]本发明中药组合物选用了板蓝根、连翘、紫锥菊、茵陈、大黄、苦豆子、黄芩、香菇、甘草，主要用于治疗大菱鲆的淋巴囊肿病。所选用的药物，板蓝根、连翘、茵陈、大黄、苦豆子、黄芩均具有抗病毒、抗菌的作用，同时紫锥菊、香菇又具有增强免疫力的作用。上述药物之间起到协同作用，即提高了大菱鲆的抗病毒能力，而且，在增了大菱鲆免疫力的同时，又不会影响大菱鲆的生长速率。
[0008]本发明治疗大菱鲆淋巴囊肿病的中药组合物，包括如下重量份原料药:
[0009]板蓝根100~140份、连翘100~140份、紫锥菊60~80份、茵陈60~80份、大黄40~60份、苦?子70~90份、黄岑60~80份、香燕70~90份、甘草30~50份。
[0010]本发明的治疗大菱鲆淋巴囊肿病的中药组合物，其原料药可进一步优选为:板蓝根120份、连翘120份、紫锥菊70份、茵陈70份、大黄50份、苦豆子80份、黄芩70份、香菇80份、甘草40份
[0011]本发明药物可采用如下制备方法:
[0012]方法一:取板蓝根、连翘、紫锥菊、茵陈、大黄、苦豆子、黄芩、香菇、甘草，粉碎成细粉，过筛，分装，即得；
[0013]方法二:取板蓝根、连翘、紫锥菊、茵陈、大黄、苦豆子、黄芩、香菇、甘草，加8倍量水，加热煮沸提取3次，每次I小时，滤过，滤液减压浓缩至60°C时测定相对密度为1.30~1.35，减压干燥，粉碎，分装，即得；
[0014]方法三:取板蓝根、连翘、紫锥菊、茵陈、大黄、苦豆子、黄芩、香菇、甘草，加8倍量水，加热沸腾提取3次，每次I小时，滤过，滤液减压浓缩至60°C时测定相对密度为1.10~
1.15，过滤，灌装，即得。
[0015]实际应用中，可分别根据不同情况选择药材细粉、提取物细粉或提取液来应用。可采用注射、浸泡、伴食等方式给药。
[0016]本发明的中药组合物选用的药材价廉易得，从而可以有效的降低成本。而且，本发明对中药组分即配比进行了 长期的选择优化，制成的制剂可以提前用药以预防大菱鲆的淋巴囊肿病，且不会因为免疫应激反应而降低大菱鲆的生长速率；也可以得病后给药用于治疗。从而提高大菱鲆的养殖成功率。

[0017]下面结合具体的实施例来说明本发明制备的中药组合物，以下实施例仅用于说明本发明，本发明并不限于此。
[0018]实施例1:
[0019]处方:板蓝根120g、连翘120g、紫锥菊70g、茵陈70g、大黄50g、苦豆子80g、黄芩70g、香燕80g、甘草40g
[0020]制法:取上述各药材，粉碎成细粉，过筛，分装每袋100g，即得。
[0021]实施例2:
[0022]处方:板蓝根500g、连翘500g、紫锥菊400g、茵陈400g、大黄200g、苦豆子350g、黄芩300g、香菇450g、甘草250g
[0023]制法:取上述各药材，加25.2L水，加热沸腾提取3次，每次I小时，滤过，滤液减压浓缩至60°C时测定相对密度为1.30~1.35，减压干燥，粉碎，分装每袋500g，即得。
[0024]实施例3:
[0025]处方:板蓝根14kg、连翅14kg、紫锥菊6kg、茵陈6kg、大黄6kg、苦豆子9kg、黄岑8kg、香燕7kg、甘草3kg
[0026]制法:取上述各药材，加584L水，加热沸腾提取3次，每次I小时，滤过，滤液减压浓缩至60°C时测定相对密度为1.10~1.15，过滤，灌装，每瓶500ml，即得。
[0027]实施例4:
[0028]处方:板蓝根1400g、连翘1200g、紫锥菊600g、茵陈800g、大黄500g、苦豆子700g、黄芩800g、香菇800g、甘草500g
[0029]制法:取上述各药材，粉碎成细粉，过筛，分装每袋500g，即得。
[0030]实施例5:本发明中药组合物对大菱鲆淋巴囊肿病的治疗作用。
[0031]试验目的:
[0032]考察本发明药物对淋巴囊肿病毒感染大菱鲆鳍细胞的影响
[0033]试验药物:
[0034]本发明 中药:取板蓝根120g、连翘120g、紫锥菊70g、茵陈70g、大黄50g、苦豆子80g、黄芩70g、香菇80g、甘草40g，加8倍量水，加热沸腾提取3次，每次I小时，滤过，滤液减压浓缩至60°C时测定相对密度为1.10~1.15，过滤，灌装，即得(用时取100mL加水稀释至10L)；
[0035]试验方法:
[0036]将淋巴囊肿病毒原液ImL添加9mL L_15进行10倍稀释到IOmL作为病毒液。取对数生长期TF细胞以0.8X IO5个/mL接种于96孔板，于22°C，5% C02培养箱中培养，观察；当细胞约长成单层时，用无血清L-15培养液清洗二遍；添加8(^1^病毒液，221:吸附211后，去除病毒液，加入10%胎牛血清-L-15培养液180μ L，22°C培养，观察。设对照组，添加PBS吸附2h后，去除PBS，加入10%胎牛血清-L-15培养液180 μ L培养。对照组设3个孔。每12h照相。
[0037]取80 μ L病毒液与本发明药物溶液(终浓度为0.02g生药/mL)，22°C作用2h。以此混合物感染对数生长期的TF细胞，22°C吸附2h后，去除混合物，加入新鲜细胞培养液继续培养，每日观察细胞病变程度。每I组分重复4孔，同时设置不添加任何提取物组分或病毒液的正常细胞对照和仅添加淋巴囊肿病毒吸附2h的细胞对照。
[0038]试验结果:
[0039]通过用本发明药物预处理淋巴囊肿病毒，然后再感染TF细胞的方法来检测对淋巴囊肿病毒的直接灭活作用。结果见表1.[0040]表1:TF细胞经本发明药物处理的淋巴囊肿病毒感染后的细胞病变程度
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