专利名称：组织工程化血管支架材料细胞种植装置的制作方法组织工程化血管的种子细胞主要包括平滑肌细胞和内皮细胞，其中平滑肌细胞不仅可以分泌细胞细胞外基质该善支架材料的结构和力学性能，还能分泌一些生长因子调控内皮细胞的生物活性。成为近年来干细胞和组织工程研究的热点。将平滑肌细胞均匀的种植在支架材料的内膜下层是成功构建组织工程化血管的关键，目前采用的平滑肌细胞种植方法有从管腔内多点注射，加压灌注(温昱，党瑞山，张传森等，MAPC/EPC性组织工程化静脉瓣，第二军医大学博士论文，2008. 4. 21)、旋转(Roh，J. D. , Nelson, G. N. , Brennan, M. P. , Mirensky, T. L. , Yi, T. , Hazlett, T. F. , Tellides,G., Sinusas, A. J. , Pober, J. S. , Saltzman, ff. M. , Kyriakides, T. R. , and Breuer,C. K. Smal1-diameter biodegradable scaffolds for functional vascular tissueengineering in the mouse model. Biomaterials 29,1454,2008)、尚心(Shimizu, K.,Ito, A. , Arinobe, M. , Murase, Y. , Iwata, Y. , Narita, Y. , Kagami, H. , Ueda, M. , and Honda,H.Effective ceil—seeding technique using magnetite n&noparticles and magneticforce onto decellularized blood vessels for vascular tissue engineering.JBiosci Bioeng 103,472,2007)和磁力(Badylak SF, Valentin JE, Ravindra AK, McCabeGP,Stewart-Akers AM. Macrophage phenotype as a determinant of biologic scaffoldremodeling. Tissue Eng Part A 2008 ；14(11) 1835-42.)等方法从支架材料的管腔内种植平滑肌细胞，但上述方法都不能达到将平滑肌细胞均匀的种植在内膜层下的理想状态，并且上述方法会一定程度的破坏内膜的结构，影响内皮细胞的内皮化过程(Gilbert Tff,beIIaro TL, Badylak br.Decellularization oi tissues and organs. Biomaterials2006 ；27(19) :3675-83)。因此，不能有效的将平滑肌细胞种植到支架材料上成为制约组织工程和再生医学发展的瓶颈。目前尚未见专门适用于在组织工程化血管支架材料上种植平滑肌细胞的种植装置的报道。
图I是本实用新型组织工程化血管支架材料细胞种植装置的结构示意图图2是本实用新型组织工程化血管支架材料细胞种植装置的使用状态示意图其中细胞种植管I ;种植管前端致密小孔2 ;真空吸引管3 ;细胞悬液容纳筒4 ;三通管5 ;带有过滤网的通气管6 ;细胞悬液注入管7 ;三通管阀门8 ;封闭帽9和10 ;过滤网11 ;细胞悬液筒封闭帽12 ;支架材料13 ;注射器14。下面结合本实用新型的实施例和附图对本实用新型的实施作详细说明，以下实施例是在以本实用新型技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本实用新型的保护范围不限于下述的实施例。实施例I本实用新型组织工程化血管支架材料细胞种植装置一种组织工程化血管支架材料细胞种植装置，其结构如图I所示细胞种植管I的管前端钝圆，设有3厘米的致密小孔2 ;细胞种植管I的管后端连接有真空吸引管3 ;细胞种植管I外套有细胞悬液容纳筒4 ;细胞悬液筒容纳筒4的前端连接一个三通管5 ;三通管5的另两端是带有过滤网11的通气管6和细胞悬液注入管7 ;三通管5各端的开闭由三通管阀门8控制。[0018]细胞悬液容纳筒4可由带孔的细胞悬液封闭帽12封闭，细胞种植管I内置于细胞悬液容纳筒4内并穿过封闭帽12中间的孔，与真空吸引管3紧密连接。真空吸引管3用封闭帽9封闭；细胞悬液注入管7用封闭帽10封闭。实施例2本实用新型组织工程化血管支架材料细胞种植装置的使用方法本实用新型组织工程化血管支架材料细胞种植装置的使用如图2所示，A、取出无菌包装袋中的组织工程化血管支架材料细胞种植装置，以下简称“种植器”。B、分离种植器的细胞悬液筒容纳筒4和细胞种植管I，将支架材料13套在细胞种植管I的管前端，即有种植管前端致密小孔2的部位。连接好细胞悬液容纳筒4和12.C、将三通管5 —端的细胞悬液注入管7的阀门8打开，去掉封闭帽10，连接上注射器，将备好的平滑肌细胞悬液注入细胞悬液容纳筒4，然后关闭该端ロ的阀门8。此时种植器内部是个密闭腔隙。 D、调整阀门8，打开带有过滤网的通气管6端ロ，去掉封闭帽9，真空吸引管3连接上注射器14，启动真空吸引装置，真空吸引管的吸引力会透过致密小孔将细胞悬液中的平滑肌细胞吸附到支架材料13中。E、根据先前细胞悬液计数以及注射器中洗出的液体的量大体估计出平滑肌细胞种植的量，达到所需的量后，分离细胞培养筒和真空吸引管，轻轻取下种植了平滑肌细胞的支架材料，放入培养皿中加入培养液，置培养箱中继续培养。