专利名称：一种药物组合物及其在制备治疗脑血管病药物中的应用的制作方法脑血管病是一组严重危害人类健康的疾病，目前已成为人类致残和死亡的重要原因之一。脑血管病(cerebrovascular disease，简称CVD)是指由于脑血管异常导致的脑部病变。脑卒中(stroke) —般指急性脑血管疾病。脑血管病可简单分为两类，一类是由于血液流动的减少或断流造成的缺血性脑血管病，另一类是由于血管破裂造成出血性脑血管病。缺血性脑血管病主要是脑梗塞(包括脑血栓形成和脑栓塞)，除了脑梗塞以外，还有一种在M小时内可以完全恢复，不留任何后遗症的缺血性脑血管病，被称为短暂性脑缺血发作或一过性脑缺血发作，医生习惯简称为 TIA，也叫作小中风。出血性脑血管病也分为两类，一类是血管破裂，血液流入脑实质内，称为脑出血或脑溢血。另一类是血管破裂，血液流人包绕脑周围的蛛网膜下腔，称为蛛网膜下腔出血，医生简称为SAH。3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮，又称依达拉奉，其结构式为3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮是一种脑保护剂，可清除自由基，抑制脂质过氧化，从而抑制脑细胞、血管内皮细胞、神经细胞的氧化损伤。大鼠在缺血/缺血再灌注后静脉给予依达拉奉，可阻止脑水肿和脑梗塞的进展，并缓解所伴随的神经症状，抑制迟发性神经元死亡。3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮临床成人用量为60mg/d(毫克/天)，研究发现其有一定的副作用，如程度不明的急性肾功能衰竭、肝功能异常、血小板减少及弥漫性血管内凝血等不良反应。冰片是一味常用的中药，具有“回苏开窍”、“芳香走帘”、“引药上行”之功，常作“引药”，以增加其他药物的治疗效果；《本草衍义》指出冰片“独行则势弱，佐使则有功”。根据 2010版的中国药典，天然冰片中含右旋龙脑不得少于96.0%，合成冰片中含龙脑不得少于 55. 0%，以及38%左右的异龙脑，其纯度不高，非主要成分特别是樟脑的存在可能产生一些不良的效果。因此，有必要寻找一种纯度更高，可以减少不良效果的替代物
本发明的目的是提供一种药物组合物，包括3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮和 (+) -2-莰醇，此药物组合物配合使用时具有协同作用，可以提高治疗脑血管病的效果。更进一步地，由于市售的(+)-2-莰醇的纯度一般在99%以上，非主要成分的减少进一步降低了毒副作用。优选地，3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮和(+)-2-莰醇的重量比为4 1 1 4，优选的重量比为2 1 1 2，进一步优选的重量比为4 1，进一步优选的重量比为2 1。上述的药物组合物中还可以含有溶剂，可以使3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮和(+)-2-莰醇更好地混合。所述溶剂可以选用水溶性有机溶剂、或者水溶性有机溶剂与水的混合物。常用的水溶性有机溶剂主要有醇类溶剂、醚类溶剂、酮类溶剂等。常用的醇类溶剂有乙醇、异丙醇、乙二醇、丙二醇，聚乙二醇等；常用的醚类溶剂有乙二醇单乙基醚、乙二醇单丁基醚等；常用的酮类溶剂有丙酮、N-甲基-2-吡咯烷酮。水溶性有机溶剂优选使用丙二醇。本发明的另一个目的是提供一种将上述药物组合物用于制备治疗脑血管病药物中的应用。优选地，将上述药物组合物用于制备治疗缺血性脑血管病或者脑梗塞药物中的应用。本发明所提供的药物组合物，包括3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮和(+) -2-莰醇，在治疗脑血管病时，具有协同作用，可以显著增加治疗效果，可以减低3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮的起效剂量，并且毒性小。实施例6取依达拉奉lg，(+)-2-莰醇2g，加入IOOg的丙二醇溶液中，搅拌使完全溶解，缓缓加入注射用水使之溶解并至1000ml，即得。实施例7取依达拉奉4g，(+)-2-莰醇lg，加入400g的丙二醇溶液中，搅拌使完全溶解，缓缓加入注射用水使之溶解并至1000ml，即得。实施例8取依达拉奉lg，(+)-2-莰醇lg，加入200g的丙二醇溶液中，搅拌使完全溶解，缓缓加入注射用水使之溶解并至1000ml，即得。实施例9取依达拉奉lg，(+)-2-莰醇2g，加入200g的丙二醇溶液中，搅拌使完全溶解，缓缓加入注射用水使之溶解并至1000ml，即得。实施例10取依达拉奉2g，(+)-2-莰醇0.5g，加入200g的丙二醇溶液中，搅拌使完全溶解， 缓缓加入注射用水使之溶解并至1000ml，即得。实施例11取依达拉奉4. 5g，(+)-2-莰醇0. 5g，加入400g的丙二醇溶液中，搅拌使完全溶解， 缓缓加入注射用水使之溶解并至1000ml，即得。实施例12取依达拉奉2g，(+)-2-莰醇lg，加入IOOg的丙二醇溶液中，搅拌使完全溶解，缓缓加入注射用水使之溶解并至1000ml，即得。实施例13取依达拉奉8g，(+)-2-莰醇4g，加入500g的丙二醇溶液中，搅拌使完全溶解，缓缓加入注射用水使之溶解并至1000ml，即得。实施例14取依达拉奉2g，加入IOOg的丙二醇溶液中，搅拌使完全溶解，缓缓加入注射用水使之溶解并至1000ml，即得。实施例15取依达拉奉8g，加入400g的丙二醇溶液中，搅拌使完全溶解，缓缓加入注射用水使之溶解并至1000ml，即得。实施例16对局灶性脑缺血再灌损伤的保护的作用1、依达拉奉/(+)-2-莰醇(重量比1 2，1 1，2 1)对局灶性脑缺血再灌损伤的作用1. 1材料与方法1. 1. 1实验动物Sprague-Dawley (SD)大鼠，雄性，清洁级，体重 270190g1.1.2受试药品依达拉奉原料药(+) -2-莰醇原料药，纯度99%以上市售依达拉奉注射液，南京先声东元制药有限公司产品，规格10mg/5ml1.1.3 方法1. 1. 3. 1脑缺血模型的制备采用颈内动脉线栓法制备大脑中动脉阻塞(Middle cerebral artery occlusion, MCAO)脑缺血再灌注模型。动物用7%水合三氯乙醛(6ml/kg)麻醉后，俯卧位固定于手术台上，消毒皮肤，颈部正中切开，分离右侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉，轻轻剥离迷走神经，结扎并剪断颈外动脉，循颈内动脉向前，结扎翼腭动脉。夹闭颈总动脉近心端，从颈外动脉的结扎线的远端作一切口，插入外径为0. 285mm的尼龙线，进过颈总动脉分叉进入颈内动脉，然后徐徐插入至有轻微阻力为止(自分叉处约20mm)，阻断大脑中动脉的所有血供，右侧脑缺血2. Oh后，轻轻拔出尼龙线，恢复血供进行再灌注，缝合皮肤，消毒。1. 1.3.2动物分组与给药实验动物分为三个组方比例组(依达拉奉/(+)-2-莰醇重量比例分别为1 2、 1 1、2 1，各组的给药剂量均为0.75mg/kg)，阳性药依达拉奉;3mg/kg组及模型组，共5 组。制备脑缺血模型后，将动物机率均等单盲分配至各组。动物于再灌注后立即静脉给药1 次，模型组动物给于等体积的生理盐水。脑缺血后M小时评价神经缺陷症状，而后处死动物，取脑，染色，拍照测定脑梗死面积。1. 1. 3. 3神经缺陷症状评分及脑梗死面积的测定采用改良Bederson 5分制法进行神经缺陷症状评价。采用单盲法评价脑缺血后大鼠的神经缺陷症状，即由试验设计者将动物按组标记，对神经缺陷症状进行评分的试验者不知道动物的分组情况，评分结束后，评分者将各种标记的评分结果呈交设计者，由设计者揭盲，获得各试验组每只动物的评分。附表神经缺陷症状评分Bederson 5分制法 0提尾悬空时，动物旳两前肢均伸向地板方向，且无其他行为缺陷 1 提尾悬空时，动物的手术对(左)侧前肢表现为腕肘屈曲、肩内旋、肘外
展、紧贴胸壁
2将动物置于光滑平板上，推手术侧肩向对侧移动时阻力降低 3动物自由行走时，向手术对侧环行或转圏
4肢体软瘫，肢体无自发活动_脑梗死程度的测定，动物处死后，断头取脑，去除嗅球、小脑和低位脑干，用生理盐水冲洗大脑表面血迹，吸去表面残留水迹，于-20°C放置20min，取出后立即于视线交叉平面垂直向下作冠状切面，并向后每隔2mm切一片，将脑片置于2% TTC染液中孵育 (370C 90min)，正常脑组织染成深红色，缺血脑组织则呈苍白色，用生理盐水冲洗后，迅速将脑片从前向后按顺序排成一排，吸干表面残留水迹，拍照。照片用图像分析软件处理，根据公式计算左脑相应的体积以及梗死灶体积，求出梗死灶百分比。
梗死体积计算法V = t (Ai+A^Ag+.........+An)t为切片厚度，A为梗死面积。% I = 100% X (VC-VL)/VC% I为梗死体积百分比，VC为对照侧(左脑半球)脑体积，VL为梗死侧(右脑半球)非梗死区域体积。1.1. 3. 4统计学分析定量资料表示为均值士标准差。脑梗死面积和神经缺陷症状评分采用单因素方差分析，kheffVs检验测定两组间的差异显著性。将差异P < 0. 05定义为差异显著。1. 2实验结果1. 2. 1对神经缺陷症状的影响神经缺陷症状的程度见表1，与模型组相比，依达拉奉/⑴-2-莰醇三种重量比例 1 2、1 1、2 1均能显著改善神经缺陷症状(p = 0.001,0. 002，0.000)。依达拉奉组与模型组比较，虽有改善神经缺陷症状的趋势，但未达到显著水平。表1.依达拉奉与(+)-2-莰醇复方用药对神经缺陷症状的影响


一种药物组合物，包括3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮和(+)-2-莰醇。该药物组合物可用于治疗脑血管疾病，并且具有更低的毒副作用。