药物组合物在制备治疗心肌缺血和保护心脏药物中的应用的制作方法【技术领域】，具体涉及一种药物组合物在制备治疗心肌缺血和保护心脏药物中的应用。[0002]心血管疾病是严重威胁人类健康的疾病之一，并与肿瘤、传染性疾病并列为当今人类的三大“杀手”。随着现代社会人类的生活节奏、生活方式、饮食结构发生变化，心血管疾病的发病率逐年上升，并且发病趋于年轻化。因此，寻找心血管方面药物是现代药学研究的重要任务。[0003]在心血管疾病中，心肌缺血缺氧是指心脏血液灌注量减少，致使心脏的供氧量减少，从而心肌代谢发生障碍，心脏不能进行正常工作的一种病理状态。其中，最主要、最常见的病因是由于冠状动脉粥样硬化而导致的冠脉狭窄或闭塞，从而引起心肌缺血，继而缺氧。由此引起的心脏病即大家常说的缺血性心脏病，即“冠心病”。心肌缺血是严重危害人类健康的疾病，多发于中老年人群。然而，近年来随着生活水平的提高，人们生活方式和饮食结构的变化，心肌缺血呈现年轻化的趋势，甚至一些20-30岁的年轻人也出现心肌冠状动脉缺血。因此，心肌缺血的防治是非常重要的。[0004]在近几十年来，随着科学技术的日益发展和医药工作者的不懈努力，在心肌缺血的治疗领域有了很大的进展。当前的心肌缺血的治疗方案就是根据药理学、流行病学和病理生理学共同研究成果制定的。其中，重要的预防措施就是减少危险因素的发生。但是，对一些比较严重、症状明显，存在明显的冠状动脉疾病的患者，在减少危险因素的同时，通常还需要外界干预，如:采用药物疗法(药物联合应用)，外科手术，或二者联用。药物治疗、介入治疗和手术治疗是现代治疗心肌缺血最主要的三种方法。各方法都有其独特的优势，用于不同的人群，需要通过临床诊断做出合理的判断，以采用合适的方法。其中药物治疗是最重要的方法之一，也是应用最广泛的方法。[0005]冠心舒通胶囊由广枣、丹参、丁香、冰片、天竺黄五种中药组成，具有良好的治疗冠心病心绞痛的作用。其中丹参色赤味苦，性平而降，属阴中阳品，在本草纲目第七卷草部记载丹参为心与心包络的血分药物，而现代医学研究简介所说，丹参含有丹参隐酮1、IIA、IIB、异丹参酮I和异丹参酮II等多种活性成分，对心血管系统均显示不同程度的保护作用，对异丙肾上腺素和结扎冠状动脉左前降支造成的心肌缺血均有保护作用，可以增加冠状动脉血流量，降低冠脉阻力，以及对肝、肾的保护作用等，在治疗心肌缺血方面，丹参常与作为主成分与其他中药配伍，或者使用有效部位提取物用于临床高血压、心肌缺血和心肌缺血并发症的治疗。广枣性平，味甘、酸，具有行气活血、养心安神的功效，中医上主要用于气滞血瘀、胸痹、心悸气短、安生等功效，通过对其化学成分系统研究，其中包括没食子酸、水杨酸、原儿茶酸、儿茶素、胡萝卜苷、硬脂酸、柠檬酸、槲皮素及金丝桃苷等化学成分，目前有关广枣的药效物质主要集中在总黄酮部分，相关研究发现广枣黄酮具有保护缺血心肌、抑制血小板聚集、增强免疫力等多种药理活性，在广枣总黄酮提取物中，化合物主要以槲皮素和山柰酚为主，已有许多报道表明这两种化学成分有显著的抗心肌细胞缺氧复氧损伤作用，在治疗心血管系统疾病方面具有较好的疗效，在中药组方中常用来治疗脑部疾病和心血管疾病。在心血管方面，天竺黄对离体血管有直接扩张作用，表现为血管的灌流量增加，当血管处于挛缩状态时，天竺黄对血管的直接扩张作用更明显，在一些治疗心血管疾病的中药组方中，天竺黄常常与其它一些中药进行配伍组方，发挥辅助性作用。[0006]本发明以冠心舒通胶囊为研究基础，在前人研究的成果上，对该药物组合物治疗冠心病的作用机制做了药理方面研究，更细化冠心舒通胶囊的治疗用途，为临床应用奠定基础。

[0007]本发明的目的在于提供一种药物组合物的新治疗用途，具体是有抗心肌缺血和保护心脏作用，从而能够间接治疗冠心病和心绞痛。
[0008]本发明的药物组合物原料由广枣480份、丹参240份、丁香60份、冰片30份、天竺黄30份组成。
[0009]本发明药物组合物的制备辅料可以是药剂学上可接受的任意赋形剂或载体。
[0010]本发明药物组合物的应用可以是药剂学上可接受的剂型，包括丸剂、颗粒剂、硬囊剂、软胶囊剂、片剂、滴丸剂、口服液制剂等，其中优选硬胶囊剂。 [0011]为了进一步开发和验证该药物组合物在治疗心肌缺血和保护心脏上的治疗用途，我们进行了一系列药理药效学研究，现将主要研究结果总结如下:
[0012]试验I对大鼠心肌缺血的保护作用研究
[0013]I实验材料:SD大鼠，雌雄兼用，体重190~210g，第四军医大学实验动物中心提供。
[0014]2实验方法:
[0015]2.1对大鼠体重的影响实验:将大鼠随机分为8组，分别为胶囊大浓度组、胶囊小浓度组、广枣组、丹参组、天竺黄组、辛伐他汀组、假手术组和模型组，每组10只大鼠，每组大鼠均灌胃给药8周，每周测量大鼠的体重。
[0016]2.2对血清以及组织中生化指标的影响实验:分组及给药方式与试验I中2.1项下相同。各组给药8周后，采血检测血清中丙二醛(MDA)的含量以及乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力，检测经过GraphPad Prism分析软件统计数据。
[0017]2.3对大鼠心肌组织凋亡蛋白Caspase3、Bcl_2和Bax的表达影响实验:分组及给药方式与试验I中2.1项下相同。各组给药8周后，将心肌组织提取总蛋白后进行SDS-PAGE凝胶电泳后进行转膜，最后显影，得到的凋亡蛋白的显影图，采用Image Pro Plus(IPP)图像分析软件进行光密度分析，再经过GraphPad Prism统计软件进行数据分析。
[0018]2.4对大鼠心肌组织氧化损伤相关蛋白p_eN0S、gp91phox和p47phox的表达影响:分组及给药方式与试验I中2.1项下相同。各组给药8周后，同2.3方法得到该类蛋白显影图，并进行数据分析。
[0019]2.5对大鼠心肌组织NOS亚基eNOS、iNOS和nNOS的mRNA表达影响实验:分组及给药方式与试验I中2.1项下相同。各组给药8周后，提取心肌组织的mRNA，进行RT-PCR，对产物进行琼脂糖凝胶电泳后进行显影，得到NOS亚基的mRNA显影图，采用Quantity One图像分析软件进行光密度分析，再经过GraphPad Prism统计软件进行数据分析。
[0020]2.6对大鼠心肌组织NADPH氧化酶亚基的mRNA表达影响实验:分组及给药方式与试验I中2.1项下相同。各组给药8周后，心脏组织提取总RNA后，对NADPH氧化酶亚基p22phox、p47phox、p67phox和gp91phox的mRNA进行逆转录得cDNA,对产物进行琼脂糖凝胶电泳后进行显影，得到NADPH氧化酶亚基的cDNA显影图,采用Quantity One图像分析软件进行光密度分析，再经过GraphPad Prism统计软件进行数据分析。
[0021]2.7对大鼠心肌组织胸主动脉的马松染色实验:分组及给药方式与试验I中2.1项下相同。各组给药8周后，对获得的心肌缺血大鼠胸主动脉经过4%的多聚甲醛固定后，进行石蜡包埋，间接连续切片后进行马松染色，在400倍镜下观察并拍照。
[0022]2.8对大鼠心肌组织苏木精一伊红染色实验:分组及给药方式与试验I中2.1项下相同。各组给药8周后，对获得的心肌缺血大鼠心脏组织经过4%的多聚甲醛固定后，进行石蜡包埋，间接连续切片后进行HE染色，在400倍观察并拍照。
[0023]3实验结果
[0024]3.1各组给药8周，每周测量大鼠的体重。胶囊大浓度组、胶囊小浓度组、广枣组、丹参组、天竺黄组、辛伐他汀组、假手术组和模型组的每只大鼠的体重趋势图见图1。通过分析显示，假手术组与模型组大鼠在术后恢复期间体重并无统计学意义(P >0.05);模型组与其余给药组(胶囊大浓度组、胶囊小浓度组、广枣组、丹参组、天竺黄组和阳性药物组)体重相比无统计学意义(P > 0.05)。因此，可以确定该药物组合物的干预对大鼠的体重无影响。
[0025]3.2胶囊大浓度组、胶囊小浓度组能够显著降低丙二醛含量；胶囊大浓度组、胶囊小浓度组、广枣组、丹参组能显著提高超氧化物歧化酶(SOD)活力，降低肌酸激酶(CK)活力；胶囊大浓度组、胶囊小浓度组、广枣组、丹参组、天竺黄组等乳酸脱氢酶(LDH)活力明显降低，实验结果见图2。
[0026]3.3广枣，丹参能显著提高一氧化氮合酶(NOS)活力和一氧化氮(NO)含量，实验结果见图3。
[0027]3.4胶囊大浓度组、胶囊小浓度组和其组分广枣、丹参和天竺黄可以显著降低血清和胸主动脉中谷草转氨酶(AST)活力，实验结果见图4。
[0028]3.5胶囊大浓度组、胶囊小浓度组及其组分广枣、丹参、天竺黄可显著降低Caspase3蛋白表达含量，Bax蛋白表达含量显著,胶囊大浓度组、胶囊小浓度组和其组分丹参能显著提高Bcl-2蛋白含量，实验结果见图5。
[0029]3.6胶囊大浓度组、胶囊小浓度组及组分广率、丹参、天竺黄对p-eNOS蛋白表达含量有显著性升高，该药物组合物药物及组分广率，丹参可显著降低gp91phox以及p47phox蛋白含量，实验结果见图6。
[0030]3.7胶囊大浓度组、胶囊小浓度组及组分广枣、丹参、天竺黄显著提高nNOS的mRNA表达含量，此胶囊大浓度组、胶囊小浓度组及组分广枣、丹参对NADPH氧化酶亚基表达有不同程度降低 ，实验结果见图7和图8。
[0031]3.8胶囊大浓度组、胶囊小浓度组及组分广枣、丹参、天竺黄引起胸主动脉厚度及胶原含量不同程度的降低，胸主动脉壁排列整齐，对胸主动脉有很好的保护作用，实验结果见图9。
[0032]3.9胶囊大浓度组、胶囊小浓度组及组分广枣、丹参、天竺黄对心肌损伤均有不同程度的逆转，心肌组织致密，心脏横纹肌梭状结构排列整齐，表现出很好的心肌损伤保护作用，实验结果见图10。
[0033]试验2该药物组合物及其效成分对缺氧大鼠血管平滑肌细胞的保护作用
[0034]I实验材料:SD大鼠，雌雄兼用，体重190~210g，第四军医大学实验动物中心提供。
[0035]2实验方法:
[0036]2.1原代培养SD大鼠血管平滑肌细胞:颈椎脱白处死大鼠，浸入75%酒精lmin，在超净台中沿大鼠胸部中线逐层剪开，打开胸腔，快速分离并取出主动脉胸段，放入预冷的Hanks液中，用Hanks液洗涤3次，去除结缔组织和血污，移入盛有无血清的DMEM平皿中，类似剥袖套的方式轻柔剥除外膜，眼科剪纵向剪开血管，用弯头镊轻轻刮内膜，以去除内皮细胞。用无血清的DMEM漂洗血管中膜I次，在含20% FBS的DMEM培养皿中，将其剪成lmm3大小的组织块。用弯头吸管将组织块移入25cm2的塑料培养瓶中，使组织均匀分布于培养瓶壁，小块相互间距离0.5cm左右。加入含20% FBS的DMEM培养基5mL，倒置培养瓶于37°C、5 %的C02培养箱中，4~6h后轻轻翻转培养瓶，使组织块浸入培养基中，静置培养，每3d观察一次，培养基变黄即可换液。VSMC爬出来后每3~5d换液一次，大约培养3周左右，细胞覆盖培养瓶底达80%即可用0.125%的胰蛋白酶消化液传代，待细胞生长稳定之后，培养基中血清含量可以降 低至10%。
[0037]2.2对缺氧大鼠血管平滑肌细胞存活率的影响实验:用0.125%胰蛋白酶消化VSMC，计数后配成单细胞悬液，以每孔I X 104个细胞接种于96孔培养板后，将培养板放入C02培养箱中，37°C、5% C02及饱和湿度条件下培养24h。待细胞贴壁后加入Ang II (10-6mol/L)刺激24h后分别加入5 μ Μ、50 μ Μ、500 μ M以及5mM的冠心舒通胶囊、丹参提取物、广枣提取物、天竺黄醇提部位、天竺黄水体部位以及冰片刺激24h后显色，在490nm测定吸光度，以记录的OD值反应活性和增殖。
[0038]2.3对缺氧VSMC中LDH释放、SOD及NOS活力的影响实验:将消化下来的单层VSMC接种于24孔板中，待24h贴壁后分别加入放入5 μ Μ、50 μ Μ、500 μ M的冠心舒通胶囊、广枣提取物、丹参提取物、天竺黄水提物、天竺黄醇提物以及冰片刺激24h后，将培养板放入含有95% N2三气培养箱中，缺氧培养16h复氧2h，吸出培养基上清检测LDH放。下层贴壁细胞经RIPA消化下来后检测细胞中SOD活力。
[0039]3实验结果:
[0040]3.1冠心舒通胶囊及其有效成分均对Ang II所致的VSMC增殖有一定的抑制作用。其中冰片对VSMC的抑制作用剂量依赖性非常显著。而丹参与广枣的抑制作用则与冠心舒通胶囊的抑制作用趋势一致。通过对天竺黄的醇提物及水提物进行考察，天竺黄醇提物的抑制作用明显高于天竺黄水提物的抑制作用，实验结果见图11。
[0041]3.2冠心舒通胶囊及其有效组分对缺氧VSMC均有不同程度的保护作用，并且考察出天竺黄醇提物作用明显好于天竺黄水提物作用，实验结果见图12。
[0042]试验3该药物组合物及其有效组分对心肌细胞的保护作用
[0043]I实验材料:SD大鼠，雌雄兼用，体重190~210g，第四军医大学实验动物中心提供。
[0044]2实验方法:
[0045]2.1大鼠心肌细胞原代培养:取4-5天大的大鼠乳鼠，置入以用酒精中10分钟左右消毒，从酒精中捞出。快速剪开胸腔，取出心脏。放置于冷的无菌D-Hanks溶液中，先减去心脏主动脉血管等组织，再用冷的无菌D-Hanks溶液清洗几次，将心脏移至干净的培养皿中，采用挑剪的方法将心脏剪成组织碎块；之后将这些组织碎块移至带有搅拌磁子的三角锥形瓶中(带旋口)，加入2ml的0.25%的胰酶，再加入2ml0.016%的II型胶原酶，于37°C水浴下，用磁力搅拌器进行搅拌，第一次消化10分钟，吸取消化后的细胞悬液于离心管中，再次加入2ml的0.25%的胰酶，再加入2ml0.016 %的II型胶原酶，于37°C水浴下，用磁力搅拌器进行搅拌，第二次开始消化，每次5分钟，吸取消化后的细胞悬液于离心管中，重复此过程，直至组织快被完全消化即可。合并所得的细胞悬液，加入含20%胎牛血清的DMEM培养基，3000r离心，弃去上清液，再家兔20%胎牛血清的DMEM培养基将沉淀的细胞吹打混匀，后接入细胞培养凭或孔板中培养备用，作为空白对照。肥大心肌细胞诱导:用10-6M的血管紧张素II (Ang-1I )诱导原代细胞，作为药物作用细胞和阴性对照。
[0046]2.2冠心舒通胶囊及其有效组分对血管紧张素II诱导的心肌细胞肥大的抑制作用实验:将消化成单层的心肌细胞接种于96孔板中，24h贴壁后加入IyM的Ang II刺激24h后，加入5 μ Μ、50 μ Μ、500 μ M冠心舒通胶囊和丹参提取物、广枣提取物、天竺黄水提物、天竺黄醇提物以及冰片孵育24h后，显色后测吸光度值。
[0047]2.3冠心舒通 胶囊其有效组分对缺氧心肌细胞的保护作用实验:将消化成单层的心肌细胞接种于24孔板中，待贴壁后分别加入5 μ M、50 μ Μ、500 μ M冠心舒通胶囊和丹参提取物、广枣提取物、天竺黄水提物、天竺黄醇提物以及冰片孵育24h后，将培养板放入含有96% N2的三气培养箱中缺氧16后再复氧2h，吸取细胞上清检测细胞LDH的释放、NO含量以及MDA含量的变化。而贴壁细胞经RIPA消化后检测细胞中SOD和NOS活力。
[0048]3实验结果:
[0049]3.1冠心舒通胶囊及其有效组分均可不同程度的抑制Ang II所之作用致的大鼠心肌细胞增殖，其中天竺黄醇提物的作用明显优于天竺黄水提物的抑制作用，实验结果见图13 ；
[0050]3.2冠心舒通胶囊对缺氧心肌细胞有抗氧化应激作用，不同程度的降低了心肌细胞LDH的释放。从而阐明了该药物组合物及其有效组分对缺氧心肌细胞的保护作用，实验结果见图14。
[0051]试验4冠心舒通胶囊对大鼠的肾脏损伤作用研究
[0052]I实验材料:SD大鼠，雌雄兼用，体重190~210g，第四军医大学实验动物中心提供。
[0053]2实验方法
[0054]2.1心肌缺血大鼠左肾肾脏的苏木精一伊红染色(HE)实验:分组及给药方式与试验I中2.1项下相同。各组给药8周后，对获得的心肌缺血大鼠左肾肾脏组织经过4%的多聚甲醛固定后，进行石蜡包埋，间接连续切片后进行苏木精-伊红(HE)染色，在400倍镜下观察拍照。
[0055]2.2心肌缺血大鼠尿量及尿液中生化指标的检测实验:分组及给药方式与试验I中2.1项下相同。各组给药8周后，通过搜集各组心肌缺血大鼠尿液，检测尿液中丙二醛(MDA)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)和尿蛋白各生化指标变化。
[0056]3实验结果:
[0057]如图15所示。图中主要为肾小管染色，从图中可以发现，与假手术组相比，广枣组的肾脏组织的肾小管有轻度萎缩和代偿性肥大；除此之外，胶囊大浓度组、胶囊小浓度组、丹参组、天竺黄组和辛伐他汀组与假手术组和模型组的肾脏染色相似，没有发生明显的损伤。
[0058]通过搜集各组心肌缺血大鼠尿液，检测尿液中生化指标，如图16所示。从图16 (A)中可以发现，胶囊大浓度组、胶囊小浓度组、广枣组、丹参组、天竺黄组、辛伐他汀组、假手术组和模型组的尿量并没有差异。从图16(B)所示，与假手术组相比，模型组的尿液中MDA含量显著上升，(p〈0.05)而胶囊大浓度组、广枣组、丹参组和辛伐他汀组可显著降低尿液中MDA含量(p〈0.05)。从图16(C)可以发现，模型组与假手术组的尿液中Cr含量无显著性差异；广枣组Cr含量有所上升，天竺黄组Cr含量显著下降(p〈0.05);其余各组的Cr含量与模型组对比并没有差异，无统计学意义。如图16(D和E)所示，模型组与假手术组的尿液中BUN与尿蛋白含量没有差异，无统计学意义；此外，与模型组对比，仅广枣组的BUN与尿蛋白含量显著升高(P〈0.05)，其余各组的BUN与尿蛋白含量与模型组对比并没有差异，无统计学意义。
[0059]综上所述，冠心舒通胶囊无论剂量大小均对心肌细胞、血管平滑肌有保护作用，而且对肾脏不会造成明显损伤，其治疗作用与广枣、丹参、天竺黄的使用密切相关，但经过合理配比后，胶囊剂的整体疗效优于单位药材的应用，这些功效对保护心脏和治疗冠心病心绞痛打下良好基础。



[0060]图1大鼠平均体重变化趋势图
[0061]图2胶囊大浓度组、胶囊小浓度组及各有效组分对心肌缺血大鼠血清中丙二醛(A)、超氧化物歧化酶(B)、肌酸激酶(C)和乳酸脱氢酶(D)的影响。注:*表示与模型组对比ρ〈0.05 ;林表示与模型组对比ρ〈0.01。
[0062]图3胶囊大浓度组、胶囊小浓度组和各有效组分及阳性药对心肌缺血大鼠血清中一氧化氮合酶(A)和一氧化氮(B)的影响注:*表示与模型组对比ρ〈0.05 ;**表示与模型组对比ρ〈0.01。
[0063]图4胶囊大浓度组、胶囊小浓度组和各有效组分及阳性药对心肌缺血大鼠血清中(A)以及胸主动脉组织中(B)谷草转氨酶的含量的影响。注:*表示与模型组对比ρ〈0.05;**表示与模型组对比ρ〈0.01。
[0064]图5该胶囊大浓度组、胶囊小浓度组及各组分对心肌缺血大鼠心肌组织中凋亡蛋白的影响 A:Caspase3、Bcl_2 和 Bax 的 Western Blot 电泳条带；B:Caspase3、Bcl_2 和 Bax的相对表达量。注:*表示与模型组对比p〈0.05 表示与模型组对比p〈0.01
[0065]图6胶囊大浓度组、胶囊小浓度组及各组分对心肌缺血大鼠心肌组织中氧化损伤相关蛋白的影响 A:p_enos、gp9Iphox 和 p47phox 的 Western Blot 电泳条带；B:p_enos、gp9Iphox和p47phox的相对表达量。注:*表示与模型组对比ρ〈0.05 ;**表示与模型组对比 ρ〈0.01o
[0066]图7胶囊大浓度组、胶囊小浓度组及各组分对心肌缺血大鼠心肌组织中NOS亚基的mRNA表达的影响A:eNOS, iNOS和nNOS的PCR电泳条带B:eNOS, iNOS和nNOS的相对表达量。注:*表示与模型组对比p〈0.05 表示与模型组对比p〈0.01。
[0067]图8胶囊大浓度组、胶囊小浓度组及各组分对心肌缺血大鼠心肌组织中NADPH亚基的 mRNA 表达的影响 A:p22phox、p47phox、p67phox 和 gp9Iphox 的 PCR 电泳条带；B:p22phox、p47phox、p67phox和gp91phox的相对表达量。注:*表示与模型组对比ρ〈0.05 ；**表示与模型组对比ρ〈0.01。
[0068]图9假手术组㈧、模型组⑶胶囊大浓度(C)、胶囊小浓度⑶、广枣(E)、丹参(F)、天竺黄(G)和辛伐他汀(H)的胸主动脉组织的马松染色。
[0069]图10假手术组㈧、模型组⑶胶囊大浓度(C)、胶囊小浓度⑶、广枣(E)、丹参(F)、天竺黄(G)和辛伐他汀(H)的心脏组织的HE染色。[0070]图11胶囊大浓度组、胶囊小浓度组及各组分对缺氧VSMC增殖作用。
[0071 ] 图12胶囊大浓度组、胶囊小浓度组及各组分对缺氧VSMC中LDH释放的影响。
[0072]图13胶囊大浓度组、胶囊小浓度组及各组分对血管紧张素II诱导的心肌细胞肥大的抑制作用
[0073]图14胶囊大浓度组、胶囊小浓度组及各组分对缺氧心肌细胞的保护作用
[0074]图15假手术组㈧、模型组⑶、胶囊大浓度(C)、胶囊小浓度⑶、广枣(E)、丹参(F)、天竺黄(G)和辛伐他汀⑶的肾脏组织的HE染色
[0075]图16胶囊大浓度组、胶囊小浓度组及各组分对心肌缺血大鼠尿量以及尿液中丙二醛(MDA)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)和尿蛋白的影响。注:*表示与模型组对比ρ〈0.05表示与模型组对比Ρ〈0.01。

[0076]实施例1:取广枣120g粉碎成细粉，均分成二份，备用，再取360g广枣粉碎成最粗粉，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(中国药典2005年版一部附录10)，用70%乙醇作溶剂，进行渗漉，收集渗漉液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.30~1.35 (500C )，加入一份广枣细粉，拌匀，60°C减压干燥，粉碎成细粉。取丹参240g提取三次，第一次用乙醇加热回流1.5小时，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.30(55~60°C );第二次用50%乙醇加热回流1.5小时，滤过；第三次加水煎煮2小时，滤过，合并第二、第三次滤液，回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.40 (55~60°C )，与第一次的浓缩液合并，混匀，浓缩至相对密度为1.35~1.39 (55~60°C )，加入另一份广枣细粉，拌匀，60°C减压干燥，粉碎成细粉。天竺黄30g粉碎成细粉，均分成二份，备用。丁香60g用水蒸气蒸馏提取挥发油，将挥发油均匀喷入一份天竺黄细粉内，混匀，密闭；冰片30g与另一份天竺黄细粉混合，研细，与上述各细粉混匀，装入胶囊，制成1000粒，口服。一次3粒，一日3次。四周为一疗程。
[0077]实施例2:取广枣120g粉碎成细粉，均分成二份，备用，再取360g广枣粉碎成最粗粉，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(中国药典2005年版一部附录10)，用70%乙醇作溶剂，进行渗漉，收集渗漉液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.30~1.35 (500C )，加入一份广枣细粉，拌匀，60°C减压干燥，粉碎成细粉。取丹参240g提取三次，第一次用乙醇加热回流1.5小时，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.30(55 ~60°C );第二次用50%乙醇加热回流1.5小时，滤过；第三次加水煎煮2小时，滤过，合并第二、第三次滤液，回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.40 (55~60°C )，与第一次的浓缩液合并，混匀，浓缩至相对密度为1.35~1.39 (55~60°C )，加入另一份广枣细粉，拌匀，60°C减压干燥，粉碎成细粉。天竺黄30g粉碎成细粉，均分成二份，备用。丁香60g用水蒸气蒸馏提取挥发油，将挥发油均匀喷入一份天竺黄细粉内，混匀，密闭；冰片30g与另一份天竺黄细粉混合，研细，与上述各细粉混匀，加入适量淀粉、微粉硅胶及硬脂酸镁，质粒，压制成片，包衣，制成1000片剂。口月艮。一次3片，一日3次。四周为一疗程。[0078]实施例3:取广枣120g粉碎成细粉，均分成二份，备用，再取360g广枣粉碎成最粗粉，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(中国药典2005年版一部附录10)，用70%乙醇作溶剂，进行渗漉，收集渗漉液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.30~1.35 (500C )，加入一份广枣细粉，拌匀，60°C减压干燥，粉碎成细粉。取丹参240g提取三次，第一次用乙醇加热回流1.5小时，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.30(55~60°C );第二次用50%乙醇加热回流1.5小时，滤过；第三次加水煎煮2小时，滤过，合并第二、第三次滤液，回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.40 (55~60°C )，与第一次的浓缩液合并，混匀，浓缩至相对密度为1.35~1.39 (55~60°C )，加入另一份广枣细粉，拌匀，60°C减压干燥，粉碎成细粉。天竺黄30g粉碎成细粉，均分成二份，备用。丁香60g用水蒸气蒸馏提取挥发油，将挥发油均匀喷入一份天竺黄细粉内，混匀，密闭；冰片30g与另一份天竺黄细粉混合，研细，与上述各细粉混匀，加入适量淀粉、羧甲基纤维素钠、甜菊苷，混匀过80目筛，加适量水质粒，60°C减压干燥，整粒，分装，制成1000g颗粒剂。口服。一次10~30g，一日3次。四周为一疗程。
[0079]实施例4:取广枣120g粉碎成细粉，均分成二份，备用，再取360g广枣粉碎成最粗粉，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(中国药典2005年版一部附录10)，用70%乙醇作溶剂，进行渗漉，收集渗漉液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.30~1.35 (500C )，加入一份广枣细粉，拌匀，60°C减压干燥，粉碎成细粉。取丹参240g提取三次，第一次用乙醇加热回流1.5小时，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.30(55~60°C );第二次用50%乙醇加热回流1.5小时，滤过；第三次加水煎煮2小时，滤过，合并第二、第三次滤液，回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.40 (55~60°C )，与第一次的浓缩液合并，混匀，浓缩至相对密度为1.35~1.39 (55~60°C )，加入另一份广枣细粉，拌匀，60°C减压干燥，粉碎成细粉。天竺黄30g粉碎成细粉，均分成二份，备用。丁香60g用水蒸气蒸馏提取挥发油，将挥发油均匀喷入一份天竺黄细粉内，混匀，密闭；冰片30g与另一份天竺黄细粉混合，研细，与上述各细粉混匀，过120~180目筛。将明胶、水及甘油(1:1:0.3-0.45)融胶后保温代用，药粉加适量植物油(大豆油或色拉油)搅匀，胶体磨研成均匀黏糊状物，减压除气，压制，制成1000粒软胶囊剂，口服。一次3粒，一日3次。四周为一疗程。
[0080]实施例5:取广枣120g粉碎成细粉，均分成二份，备用，再取360g广枣粉碎成最粗粉，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(中国药典2005年版一部附录10)，用70%乙醇作溶剂，进行渗漉，收集渗漉液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.30~1.35 (500C )，加入一份广枣细粉，拌匀，60°C减压干燥，粉碎成细粉。取丹参240g提取三次，第一次用乙醇加热回流1.5小时，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.30(55~60°C );第二次用50%乙醇加热回流1.5小时，滤过；第三次加水煎煮2小时，滤过，合并第二、第三次滤液，回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.40 (55~60°C )，与第一次的浓缩液合并，混匀，浓缩至相对密度为1.35~1.39 (55~60°C )，加入另一份广枣细粉，拌匀，60°C减压干燥，粉碎成细粉。天竺黄30g粉碎成细粉，均分成二份，备用。丁香60g用水蒸气蒸馏提取挥发油，将挥发油均匀喷入一份天竺黄细粉内，混匀，密闭；冰片30g与另一份天竺黄细粉混合，研细，与上述各细粉混匀，过120目筛，加入到4倍量3:1的熔融聚乙二醇4000-聚乙二醇6000中，搅拌均匀，转移至滴丸机，滴制成丸，除去表面的二甲基硅油，包装，制成1000g滴丸剂。口服。一次3g,—日3次。四周为一疗程。
[0081]实施例6:取广枣120g粉碎成细粉，均分成二份，备用，再取360g广枣粉碎成最粗粉，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(中国药典2005年版一部附录10)，用70%乙醇作溶剂，进行渗漉，收集渗漉液，回收乙醇，并浓缩至相对密度1.30~1.35 (500C )，加入一份广枣细粉，拌匀，60°C减压干燥，粉碎成细粉。取丹参240g提取三次，第一次用乙醇加热回流1.5小时，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.30(55~60°C );第二次用50%乙醇加热回流1.5小时，滤过；第三次加水煎煮2小时，滤过，合并第二、第三次滤液，回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.40 (55~60°C )，与第一次的浓缩液合并，混匀，浓缩至相对密度为1.35~1.39 (55~60°C)，加入另一份广枣细粉，拌匀，60°C减压干燥，粉碎成细粉。天竺黄30g粉碎成细粉，均分成二份，备用。丁香60g用水蒸气蒸馏提取挥发油，将挥发油均匀喷入一份天竺黄细粉内，混匀，密闭；冰片30g与另一份天竺黄细粉混合，研细，与上述各细粉混匀，加水静置，过滤，滤液加适量1，2-丙二醇、尼泊金乙酯、阿斯巴坦，最后再加蒸馏水，搅拌均匀后， 灌封灭菌，制成1000ml 口服液，口服。一次10-30ml，一日3次。四周为一疗程。