一种从凝胶中高得率分离纯化核酸样品的微型装置制造方法 [0002]从凝胶中分离纯化样品是分子生物学实验中常用的技术手段和重要的操作步骤。样品分离纯化的质量直接影响下游研究工作的进行。目前在纯化核酸等分子的实验中，常用的仪器有B1-rad公司的Model422electro_Eluter等仪器,该仪器精巧、适用，可满足大多数实验室分离纯化生物大分子的需求。但是，分离纯化少量核酸样品，特别是纯化易降解的RNA样品时，该仪器显得操作繁琐。一是，设备即便已很精巧，但对于所分离的少量样品而言仍显体积大、配件多、操作环节多、费时费力等缺点，而且彻底灭活RNA酶不容易，少量污染即可减少样品RNA得率；二是,该设备某些部件,如Membrane Cap等,处理和安装不当或有气泡，直接影响电洗脱效率，或者无法进行电洗脱过程；三是，电洗脱缓冲液用量较大(700mL左右)；四是，全套设备成本较高。 实用新型内容 [0003]本实用新型的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种体积小、精确度高、电泳缓冲液用量少的从凝胶中高得率分离纯化核酸样品的微型装置。 [0004]本实用新型的目的可以通过以下技术方案来实现: [0005]一种从凝胶中高得率分离纯化核酸样品的微型装置，包括洗脱容器与电极，所述的洗脱容器内充装电洗脱缓冲溶液，所述的电极包括正电极与负电极，正电极与负电极间隔放置在洗脱容器内，并浸入电洗脱缓冲溶液内，正电极与负电极之间形成电泳环境，用于放置样品胶块；还包括调节和固定电极位置的支撑橡胶片与支撑样品胶块并调节样品胶块位置的橡胶垫，所述的支撑橡胶片设在洗脱容器内侧上部，所述的电极与支撑橡胶片插接，所述的橡胶垫平铺在洗脱容器内侧的下部，所述的样品胶块放置在橡胶垫上。 [0006]所述的洗脱容器的容积为I?1.5ml,电洗脱缓冲溶液的体积为200ul_0.8ml。
[0007]所述的洗脱容器选用一次性容积为1.5ml以下的离心管。
[0008]所述的电极与外部电源连接。
[0009]还包括冷却容器，所述的洗脱容器放置在冷却容器内。
[0010]所述的冷却容器内同时放置2?50个洗脱容器。
[0011]所述的洗脱容器外侧设有精度为0.1毫升的刻度。
[0012]与现有技术相比，本实用新型的从凝胶中高得率分离纯化核酸样品的微型装置具有以下优势:
[0013](I)本实用新型的装置为微环境、小容量电洗脱，在小于Iml的微型电泳环境中，操作精度高；
[0014](2)本实用新型的装置操作极简单，不需要复杂仪器，在低电压下(?50U)操作，可在科研院所的实验室推广使用；
[0015](3)样品分离快速，20分钟内即可有效回收PAGE胶中微量核酸分子，尤其适用易降解RNA样品的洗脱回收；
[0016](4)本实用新型的装置成本非常低，使用的洗脱容器可用容量管、容量瓶或离心管，使用的电洗脱缓冲溶液在Iml以下，运行成本低；
[0017](5)适合易降解RNA等样品的分离和纯化，广泛适用于大多数有分离纯化微量、易降解样品需求的实验室使用；
[0018](6)洗脱容器中设有调节和固定电极位置的支撑橡胶片与支撑样品胶块并调节样品胶块位置的橡胶垫，支撑橡胶片与橡胶垫的设置有利于调整电极的位置与电极间距离，橡胶垫的设置有利于将样品胶块以更好的角度放置在电极之间，使得样品分离快速。




[0019]图1为实施例1中从凝胶中高得率分离纯化核酸样品的微型装置结构示意图；
[0020]图2为实施例2中从凝胶中高得率分离纯化核酸样品的微型装置结构示意图；
[0021]图3为实施例3中从凝胶中高得率分离纯化核酸样品的微型装置结构示意图；
[0022]图4为在model422型和实施例1装置洗脱样品中miR_la的不同扩增曲线；
[0023]图5为在model422型和实施例1装置洗脱样品中miRNA_lb的不同扩增曲线；
[0024]图6为在model422型和实施例1装置洗脱样品中miRNA_2b的不同扩增曲线。


[0025]下面结合附图和具体实施例对本实用新型进行详细说明。
[0026]实施例1
[0027]—种从凝胶中高得率分离纯化核酸样品的微型装置，如图1所示，包括洗脱容器
1、电极2、冷却容器3，洗脱容器I放置在冷却容器3内，洗脱容器I内充装电洗脱缓冲溶液4，电极2包括正电极与负电极，正电极与负电极间隔放置在洗脱容器I内，并浸入电洗脱缓冲溶液4内，正电极与负电极之间形成电泳环境，用于放置样品胶块5 ;还包括调节和固定电极2位置的支撑橡胶片6与支撑样品胶块5并调节样品胶块5位置的橡胶垫7，支撑橡胶片6设在洗脱容器I内侧上部，电极2与支撑橡胶片6插接，橡胶垫7平铺在洗脱容器I内侧的下部，样品胶块5放置在橡胶垫7上。洗脱容器I的容积为I?1.5ml,电洗脱缓冲溶液4的体积为200ul-0.8ml。电极2与外部电源连接。洗脱容器I外侧设有精度为0.1毫升的刻度。
[0028]以B1-Rad公司的model422electro_eluter电洗脱仪和本实施例装置对洗脱样品进行质量比较:
[0029]分别用上述两型电洗脱装置洗脱PAGE胶中相同RNA样品，电洗脱后，用Real-timePCR检测电洗脱样品中上述三种小RNA，即miR-la、miR-lb和miR-2b的含量，见图4、图5和图6，比较两装置洗脱后样品得率。
[0030]图4中，Ela:从凝胶中高得率分离纯化核酸样品的微型装置洗脱样品，Mla:与前者样品量一样，model422型洗脱样品，从凝胶中高得率分离纯化核酸样品的微型装置洗脱后所得样品Ela经real-time PCR扩增，循环数小于model422型电洗脱仪所得样品Mla，提不iu者样品浓度闻于后者。
[0031]图5中，Elb:利用从凝胶中高得率分离纯化核酸样品的微型装置洗脱后得到样品(示样品得率高)；Mlb:与前者样品量一样，利用model422型洗脱仪洗脱后得到样品(示样品得率低)。
[0032]图6中，E2b:利用从凝胶中高得率分离纯化核酸样品的微型装置洗脱后得到样品(示样品得率高)M2b:与前者样品量一样，利用model422型洗脱仪洗脱后得到样品(示样品得率低)。
[0033]图4-6表明，在从凝胶中高得率分离纯化核酸样品的微型装置洗脱样品中，小RNA含量均高于Model422型电洗脱仪，说明从凝胶中高得率分离纯化核酸样品的微型装置可高效、便捷、高得率回收样本。
[0034]实施例2
[0035]一种从凝胶中高得率分离纯化核酸样品的微型装置，如图2所示，包括洗脱容器I与电极2，洗脱容器I的容积为1.5ml，洗脱容器I选用一次离心管。洗脱容器I内充装电洗脱缓冲溶液4，电洗脱缓冲溶液4的体积为0.8ml,电极2包括正电极与负电极，正电极与负电极间隔放置在洗脱容器I内，并浸入电洗脱缓冲溶液4内，正电极与负电极之间形成电泳环境，用于放置样品胶块5 ;还包括调节和固定电极2位置的支撑橡胶片6与支撑样品胶块5并调节样品胶块5位置的橡胶垫7，支撑橡胶片6设在洗脱容器I内侧上部，电极2与支撑橡胶片6插接，橡胶垫7平铺在洗脱容器I内侧的下部，样品胶块5放置在橡胶垫7上。电极2与外部电源连接。洗脱容器I外侧设有精度为0.1毫升的刻度。
[0036]使用方法为:将橡胶垫7放入洗脱容器I内，将样品胶块5放置于洗脱容器I内的橡胶垫7上，洗脱容器I内装电洗脱缓冲液4 ;正、负电极2插入洗脱容器1，支撑橡胶片6固定电极2，并将正、负电极置于样品胶块5两侧；样品胶块5由橡胶垫7支撑于管中部。加电后，样品中RNA或DNA样品可从样品胶块5中泳动而出，进入电洗脱缓冲液4中。收集总电洗脱缓冲液4 (少于Iml)，即可获得高得率样品。可根据需要，选择不同EPP管或离心管以满足获取不同量核酸的需要。
[0037]实施例3
[0038]如图3所示，与实施例1不同之处在于，冷却容器3内同时放置多个洗脱容器1，根据实际需要，放置的个数为2?50个之间。
[0039]上述的对实施例的描述是为便于该【技术领域】的普通技术人员能理解和使用实用新型。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本实用新型不限于上述实施例，本领域技术人员根据本实用新型的揭示，不脱离本实用新型范畴所做出的改进和修改都应该在本实用新型的保护范围之内。