专利名称：来氟米特在制备治疗狼疮性肾炎及肾病综合症的药物中的应用的制作方法所属领域本发明涉及来氟米特的应用，尤其涉及来氟米特在制备治疗狼疮性肾炎及肾病综合症的药物中的应用。系统性红斑狼疮的病因未明，与遗传、感染、性激素、药物、物理、化学及心理因素都有一定的关系。狼疮性肾炎的确切发病机制目前尚未完全阐明。在内在的和外来的尚不明了的因素的作用下，机体丧失了正常的免疫耐受性，以至淋巴细胞不能正确的识别自身组织，而出现的自身免疫反应。在该病中，T细胞功能紊乱，TH细胞功能过强，除对自身B细胞提供特异性辅助外，对其递呈的外来抗原亦能发生增强性反应。TH细胞功能过强，造成B细胞过度增殖，产生大量的自身抗体而发病。在活动期系统性红斑狼疮患者周围血中可测到抗核抗体、抗中性粒细胞胞浆抗体等。这些抗体在循环中与相应抗原结合成免疫复合物，沉积于肾小球，是狼疮性肾炎的主要发病机制。DNA于肾小球基底膜结合，并与循环中抗DNA抗体原位形成免疫复合物亦可能参与狼疮性肾炎的发生。免疫复合物沉积于肾小球，固定并活化补体，所释放的趋化因子吸引中性粒细胞，当后者脱颗粒时释放炎症介质而导致肾小球肾炎。此外，TNFα、β可引起肾小球系膜细胞DNA合成增加，促进系膜细胞炎症。IL-1能刺激B细胞的增殖和分化，介导B细胞产生抗体，促进炎症蛋白及炎症介质的释放。IL-2也对病变发展起一定作用。在狼疮性肾炎的治疗方面，首先考虑应用激素。激素具有强大的免疫抑制作用，可以明显改善疾病的预后。在给予激素的同时，可加服一些免疫抑制剂，包括环磷酰胺、硫唑嘌呤、骁悉等。与激素合用有协同作用，可减少激素的用量。但众所周知，激素的副作用极大，可引起高血糖、高血压及消化道出血、肥胖等。环磷酰胺等免疫抑制剂也有较大副作用，如骨髓抑制、继发感染、肝脏损害等。故人们一直致力于寻找一种新的更好的治疗药物。本发明使用来氟米特作为制备治疗狼疮性肾炎及肾病综合症的药物。来氟米特是异噁唑类化合物，化学名α，α，α，-三氟-5-甲基-异噁唑-N-酰基-对甲苯胺，分子式为C12H9F3N2O2，分子量为270.2，其结构式如下 来氟米特的活性代谢物A771726的结构式如下 来氟米特是国家I类新药，其商品名为爱若华，是一种新型低毒的免疫调节剂，可以抑制体液免疫、细胞免疫和非特异性免疫。来氟米特口服吸收后在肝脏和肠壁内迅速转化为活性代谢物A771726，通过A771726在体内发挥所有药理作用。其作用机理如下1、A771726通过抑制二氢乳清酸脱氢酶，阻断二氢乳清酸转化为乳清酸，从而阻断嘧啶的从头合成，防止嘧啶的过度生成，影响DNA和RNA的合成，阻断细胞从G1期进入S期，使活化的细胞处于休眠状态。依赖从头合成途径的细胞，如活化的淋巴细胞是来氟米特作用的主靶细胞。2、来氟米特可以抑制酪酸激酶的活性和细胞粘附。3、抑制B淋巴细胞转化为浆细胞，减少抗体的产生和分泌。在狼疮性肾炎中，TH细胞功能过强，来氟米特通过抑制嘧啶的从头合成途径，从而使激活的淋巴细胞处于休眠状态，从而使功能过强的TH细胞处于静止状态，阻止了其对B细胞的影响。在狼疮性肾炎中，B细胞过度增殖，产生大量的自身抗体而发病。来氟米特通过抑制嘧啶的从头合成途径，从而阻止了B细胞的增殖，并阻止了B细胞向浆细胞转化，从而抑制了抗体的产生。另外，来氟米特还可直接抑制抗体的分泌，对B细胞产生IgG和IgM的抑制分别为61％和96％，从而减少了循环免疫复合物的产生，减轻了循环免疫复合物在肾小球的沉积和原位免疫复合物的形成，减轻了炎症反应。另外，免疫复合物沉积于肾小球，固定并活化补体，所释放的趋化因子吸引中性粒细胞，导致肾小球肾炎。来氟米特能抑制中性粒细胞趋化，从而减轻了肾小球肾炎。
在狼疮性肾炎中，TNFα、β可引起肾小球系膜细胞的DNA合成增加，促进系膜细胞炎症。IL-1能介导B细胞产生抗体。IL-2表达增加，对疾病发展也起一定作用。来氟米特可抑制TNFα、IL-1β的表达，并对IL-2的信息传导有抑制作用，故可减缓组织结构的炎症反应。从上述几方面可以推断，来氟米特对狼疮性肾炎及肾病综合症有较好治疗作用。来氟米特的代谢来氟米特口服吸收后于肠壁和肝脏内迅速转化为活性代谢物—A771726，它在体内发挥所有主要的药理作用，来氟米特在血浆中的浓度非常低，在最初来氟米特药代动力学研究中，主要检测活性代谢物A771726的血浆浓度。A771726的达峰时间在0.558±0.506天，半衰期8.79±0.77天。多剂量给药(20mg，qd)连续30天，其A771726血药浓度接近稳态。在临床应用中使用三天(50mg/天)负荷剂量可以快速达到稳态浓度。来氟米特口服的生物利用度80％，高脂饮食对A771726血浓度不会产生大的影响。A771726于肝、肾和皮肤组织内分布浓度较高，脑组织中含量低。游离A771726浓度较低，并且广泛和血浆蛋白结合(99.3％)，结合蛋白量在治疗浓度时呈线性关系。来氟米特吸收后被代谢为主要产物A771726及许多微量代谢物，这些微量代谢物中只有三氟甲基苯胺(TFMA)能被检测，在血浆中很少测到母体化合物。体内和体外试验发现肝脏和胃肠壁具有代谢作用。肝细胞质和细胞的微粒体已经是被药物代谢的部位。A771726在体内进一步代谢，从肾脏排泄以及直接从胆汁排泄。43％从尿中排泄，48％从粪便中排泄，样品分析显示最初在尿中的代谢物是葡萄糖苷酸和A771726的苯胺羰酸衍生物，粪便的主要代谢物是A771726。在两个代谢途径中，最初96小时主要是从肾脏排泄，以后粪便排泄占主导地位。文献报导，静脉给药(A771726)研究中，清除率大约31ml/h。活性炭或消胆胺可促进药物代谢，使体内A771726的半衰期从大于1周减少至大约1天，肠肝循环是导致A771726半衰期较长的主要因素。血液透析和腹膜透析研究表明A771726是不可透析的。来氟米特的毒理作用来氟米特小鼠单次灌胃或腹腔注射给药，观察14天测得LD50分别为258.9mg/kg及166.9mg/kg。SD大鼠6个月口服来氟米特(1.8、3.5、6.6mg/kg)长期毒性试验显示高剂量组有厌食、体重减轻现象，雌性大鼠ALP及AST有增高现象，高剂量组中7只(23％)于给药期死于感染。低、中剂量组无动物死亡。应用移植模型，口服高剂量来氟米特20mg/kg及30mg/kg治疗大鼠112天，显示其靶器官为再生活跃的器官骨髓、脾脏、小肠粘膜，以及免疫器官如胸腺及脾脏，与国外资料吻合。Lewis大鼠出现肝功能损害及骨髓抑制。Bagle狗6个月口服来氟米特(2、10、16、20mg/kg)长期毒性试验显示，仅高剂量组使红系细胞总数略下降及血球压积降低。来氟为特的微生物回复突变试验，哺乳动物培养细胞染色体畸变试验，及啮齿动物微核试验结果均无致突变作用。来氟米特于中、高剂量10、20mg/kg有致畸作用。
综上所述，来氟米特对狼疮性肾炎及肾病综合症有较好治疗作用，且毒副作用小，临床病例的使用，进一步证实了该药具有显著疗效。因此，来氟米特用于狼疮性肾炎及肾病综合症有较好的应用前景。临床报告经来氟米特(爱若华)治疗的15例SLE患者均符合1982年美国风湿病学会SLE诊断标准。年龄为15-51岁(平均37±13)。其中女13名，男2名。病程为2个月至7年。均经肾组织病理活检证实有狼疮肾炎，其中II型3例，IV型8例，V型3例，VI型1例。患者概况如表1。
治疗方案根据病情轻重和体重的差异给予来氟米特60mg/日3-7日，然后减量至40mg/日7日左右或直接减量至维持量20mg/日。对于已确诊多年曾用过免疫抑制剂的患者，激素量不变，加用来氟米特月余以后激素逐渐减量，未用其他免疫抑制剂。对于刚刚确诊的患者，在常规应用激素治疗同时服用来氟米特，月余激素减量，未用其他免疫抑制剂。
评价指标监测血常规，尿常规，24h尿蛋白定量，免疫指标，血生化系列(肝功、肾功、血糖、血脂、血浆蛋白、离子、肌酶)。服药后每周测一次血、尿常规和24h尿蛋白定量，每月测一次生化系列与免疫指标。
结果近8个月来用来氟米特治疗15例狼疮性肾炎患者。其中1例因自身原因治疗第3天自动退出治疗。另外1例因服药两周后出现恶心、呕吐、腹泻不能耐受药物而退出治疗。(剂量为60mg/日共7日——40mg/日共7日)。该患者(女，狼疮肾炎V型)已确诊SLE3年，发病时浮肿、关节痛、外周血白细胞低于4.0×109/1、颜面红斑、心悸、呼吸困难、尿蛋白(2+)-(3+)，给予甲强和CTX治疗，CTX应用约2年，共用12g，尿蛋白曾转阴，但近1年半患者尿蛋白始终(1+)-(2+)。患者病理活检为膜性肾病(狼疮肾炎V型)。患者在用来氟米特之前口服强的松30mg/日，24小时尿蛋白测定总蛋白3.8g/l(2750ml)，服用来氟米特一周后尿总蛋白为1g/l(2300ml)，第2周尿总蛋白为0.6g/l。现患者一般状态良好，无浮肿及发热、乏力。服用强的松20mg/日。余13例患者的治疗情况如下治疗后治疗后 治疗后治疗后指标治疗前2周 4周 6周 2个月24h尿蛋白定量 4.05±3.65 3±1.983.02±1.661.54±0.63*1.24±0.63ANA 1∶93.32(11/15) 1∶22.97(1/4)1∶20抗dsDNA抗体 (29±16)％ (13.6±2.2)％(12±2)％C3 0.56±0.17(9/15)0.59±0.05(1/4) 0.83±0.43C4 0.207±0.0290.24±0.09 0.26±0.07T-Ch6.34±2.32 10.18±3.74 9.08±1.796.97±1.06 5.76±0.73TG 3.475±2.32 4±2.57 3.65±3.064.28±4.28 1.44±0.56ALB 32.15±9.19 29.14±9.92 34.14±6.28 38.30±3.4836.40±4.73BUN 9.07±3.48 8.53±3.78 6.12±1.806.06±1.68 5.33±1.81Cr 108.6±78.7585.3±30.2 81.3±4.6953.93±13.48 64.03±14.8*p＜0.05即24h尿蛋白测定在6周和2个月时与用药前相比有统计学意义。▲ 其余指标在2个月以前与用药前相比无明显统计学差异，但在6周至2个月时BUN、Cr、ALB基本恢复正常。
由上可见在6周至2个月时24h尿蛋白定量明显减少，血浆蛋白逐渐恢复正常，全身浮肿消失，肾功好转直至恢复正常，高血脂水平逐渐降低。免疫指标ANA和抗ds-DNA抗体滴度降低，C3、C4水平恢复正常。
在15例中有4例出现副作用，主要为胃肠道症状、恶心、呕吐、厌食，多为原有“胃炎”，用药后消化道症状明显加重。只1例因恶心、呕吐、腹泻而停用来氟米特治疗，余3例服用吗叮啉对症处置后症状均缓解，不影响治疗。


来氟米特在制备治疗狼疮性肾炎及肾病综合症的药物中的应用,来氟米特通过抑制抗体的产生和抑制抗体的分泌,从而减轻了循环免疫复合物在肾小球的沉积和原位免疫复合物的形成,减轻了炎症反应,另外来氟米特能抑制中性粒细胞趋化,从而减轻了肾小球肾炎,同时还可抑制TNFα、IL—1β的表达,并对IL—2的信息传导有抑制作用,故可减缓组织结构的炎症反应,临床也显示该药对狼疮性肾炎及肾病综合症具有显著疗效且副作用小。