专利名称:多孔吸附载体固态发酵装置的制作方法图1,本实用新型是采用的多孔吸附载体固态发酵的装置来发酵生产抗生素、基因工程重组菌蛋白酶和高密度脂蛋白药物等。下面结合图1、2来进一步说明本实用新型的装置。该装置包括液体种子发酵罐1、文氏接种管2、超声雾化器3、循环风机4、固态发酵密封罐5、气体分布板6、多孔吸附载体筒7、气体循环通道8、固态发酵罐盖门9、阀门10、气体分布环11和多孔吸附载体支架12;在卧式固态发酵密封罐5内的支架12上放置装有多孔吸附载体的多孔吸附载体筒7,在多孔吸附载体筒7的两端设有气体分布板6;该气体分布板6的直径为固态发酵罐5直径的8/10,气体分布板6上的开孔率0.5-07;在卧式固态发酵密封罐5一端安装循环风机4以及与气体分布板6相对的气体分布环11,该气体分布环11的直径为气体分布板6直径的2/3,气体分布环11上开孔率为0.2-0.5;固态发酵密封罐5的另一端为进出多孔吸附载体筒7的快开盖门9;在卧式固态发酵密封罐体5内,通过循环风机4使罐体内的气体由多孔吸附载体内筒7内与气体循环通道8之间形成循环;在卧式固态发酵密封罐体5外部,由文氏接种管2将液体种子发酵罐1内种子液接种到多孔吸附载体上;根据固态发酵罐内湿度状况,开启超声雾化器3控制罐体内的一定湿度。其中开孔率是指在一板上所开孔占总面积的比例。采用本实用新型的多孔吸附载体固态发酵方法为(1)在卧式固态发酵密封罐体5中的多孔吸附载体筒7内装入海绵、纸浆、沸石和蛭石等多孔吸附载体及其可溶性培养基,其中多孔吸附载体与培养基的固液比为1∶2,升温到120℃灭菌20-30分钟,开启循环风机4,将培养基冷却到40℃后,由文氏管2接种液体种子罐1内的种子液(相对于培养基重量5%的种子液)于接入多孔吸附载体中,控制多孔载体内的温度30℃,湿度85%--95%,进行发酵;(2)在固态发酵过程中,通过超声雾化器控制罐体内一定湿度,进入罐体内的无菌空气通气量为0.8-1.2vvm(每分钟通入罐体的空气量为罐体体积的0.8-1.2倍);(3)发酵终点后,打开罐体快开盖门9,取出多孔吸附载体内筒7,将其多孔载体和发酵产物分别倒入三个抽提罐内;首先加入10倍的提取液于第1提取罐内,搅拌浸提1小时,然后,将其浸提液压入第2提取罐浸提,依次,到第三提取罐浸提,再将浸提液按传统分离纯化方法精制不同产品;实施例1多孔吸附载体固态发酵技术克拉维酸在卧式固态发酵密封罐体5中的多孔吸附载体筒7内装入纸浆多孔吸附载体及其可溶性培养基(固液比为1∶2.5),升温到120-125℃灭菌20-30分钟,开启循环风机4,将培养基冷却到40℃后,由文氏管2接种液体种子罐内的种子液(相对于培养基重量5%的种子液)于接入多孔吸附载体中,控制多孔载体内的温度25--28℃,湿度85%--95%,进行发酵;在固态发酵过程中,通过超声雾化器控制罐体内一定湿度,进入罐体内的无菌空气通气量为1.0vvm(每分钟通入罐体的空气量为罐体体积的1.0倍);发酵终点后,打开罐体快开盖门9,取出多孔吸附载体内筒7,将其多孔载体和发酵产物分别倒入三个抽提罐内;首先加入10倍的提取液于第1提取罐内,搅拌浸提1小时,然后,将其浸提液压入第2提取罐浸提,依次,到第三提取罐浸提,再将浸提液按传统分离纯化方法精制不同产品;菌种克拉维链霉菌(Streptomyces clavuligerus);多孔吸附载体木浆;培养基大豆蛋白胨0.5%,甘油0.8%,KH2PO40.1%,FeSO4.7H2O0.001%,LiCl 0.8%,pH7.0;载体(固相)与培养基(液相)比1∶2;发酵温度25--28℃液体接种量10%(与固相比); 发酵周期4-5天发酵效价120-150r/g(固相);发酵浸提液纯度45-53%。实施例2多孔吸附载体固态发酵技术基因工程菌碱性蛋白酶其操作过程同实施例1;菌种枯草杆菌(Bacillus subtilis PG1723-3);多孔吸附载体海绵;培养基可溶性淀粉0.8%,胰蛋白胨0.2%,乳糖0.2%,卡那霉素0.005%,氯化钙0.02%,pH10.5;载体(固相)与培养基(液相)比1∶1.5;发酵温度28--32℃液体接种量10%(与固相比);发酵周期3--4天发酵效价12160-12350IU/g(固相);发酵浸提液纯度45--55%。实施例3多孔吸附载体固态发酵技术基因工程菌高密度脂蛋白药物其操作过程同实施例1;菌种巴斯德毕赤酵母菌(Pichia pastoris YAC);多孔吸附载体海绵或蛭石;培养基甲醇0.8%,甘油12.5%,油酸0.1%,组氨酸0.1%,硫酸铵1.0%,pH5.5;载体(固相)与培养基(液相)比1∶1--1.5;发酵温度25--27℃液体接种量10%(与固相比);发酵周期3--4天发酵效价1.12g/g(固相);发酵浸提液纯度45--50%。
多孔吸附载体固态发酵装置制作方法
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