专利名称：一种紫杉醇注射液及其制备方法紫杉醇(Paolitaxel，商品名Taxol))是从红豆杉科属植物短叶红豆杉中分离出的具有独特结构的二萜类成分，它的骨架被命名为紫杉烷(taxane)。由于其独特的药理作用和疗效而在临床上倍受重视。1992年12月29日，美国FDA正式批准紫杉醇作为治疗晚期卵巢癌的新抗肿瘤药上市，美国癌症协会所长伯罗德(Brode)将紫杉醇誉为近15年来发现的最主要的抗肿瘤新药。此后人们在其药理应用，药源等方面的研究取得了很大的进展。 目前本品临床用于卵巢癌和乳腺癌及NSCLC的一线和二线治疗。头颈癌、食管癌，精原细胞瘤，复发非何金氏淋巴瘤等。紫杉醇为一种抗癌作用机理独特的药物，即本品是一种新型类微管药物，可促进微管双聚体装配成微管，然后通过阻止微管解聚而使微管稳定.此种稳定性作用可抑制微管网正常重力学重组。微管网的重组为细胞生命周期和细胞分裂功能所必需。紫杉醇的抗癌作用机理主要是通过抑制微管网解聚而使肿瘤细胞的有丝分裂终止及使肿瘤细胞凋亡， 最后导致肿瘤细胞死亡。据报道紫杉醇除有抗有丝分裂作用外，还有激活巨噬细胞介导的抗肿瘤作用[1]。研究表明，紫杉醇注射液在体内、体外均有明显的抗肿瘤作用，且抗瘤谱广，属细胞毒类抗癌新药。临床上用于多种癌症的治疗。目前众多专利中提到采用聚氧乙烯蓖麻油与无水乙醇(1 1)制备紫杉醇注射液，但由于聚氧乙烯蓖麻油本身会引起体内组织胺释放，给药数分钟后，造成部分病人出现药物性皮疹、呼吸急促、支气管痉挛等过敏反应。目前临床使用为了预防过敏反应，在紫杉醇治疗前12小时和6小时均分别口服地塞米松20mg，治疗前30分钟 60分钟肌注或口服苯海拉明50mg，静注西咪替丁 300mg或雷尼替丁 500mg。这样使得整个过程非常不便且需要谨慎监测用药过程。而使用本专利中提到的聚乙二醇15羟硬脂酸酯生产的紫杉醇注射液恰好能够避免以上问题。
本发明目的是克服现有技术不足，提供了一种质量稳定且低毒性的紫杉醇注射液。本发明提供了一种紫杉醇注射液的制备方法，采用该方法生产的紫杉醇注射液解决了目前紫杉醇注射液在临床应用中存在的毒性问题。本发明紫杉醇注射液，含有紫杉醇、聚乙二醇15羟硬脂酸酯、无水乙醇及柠檬酸、 盐酸、酒石酸和苹果酸中的一种或几种。本发明紫杉醇注射液，优选处方为含有紫杉醇含量5. 4-6. 6mg/ml,聚乙二醇15羟硬脂酸酯含量为5 80 (V/V)，无水乙醇含量为20 95 % (V/V)，柠檬酸含量为 0. 005% 0. 02% (mg/ml)。 本发明紫杉醇注射液，最佳处方为含有紫杉醇含量为6mg/ml，聚乙二醇15羟硬脂酸酯含量为50% (V/V)，无水乙醇为50% (V/V)，柠檬酸为0.015%。上述本发明紫杉醇注射液，其中的柠檬酸可以替换为盐酸。上述本发明紫杉醇注射液，其中的柠檬酸可以替换为酒石酸。上述本发明紫杉醇注射液，其中的柠檬酸可以替换为苹果酸。本发明提供了一种紫杉醇注射液的制备方法，其中包含下述制备步骤实施例一①取适量无水乙醇溶解处方量的紫杉醇，得溶液A ；②取处方量的聚乙二醇15羟硬脂酸酯加入上述溶液中，得溶液B ；③配制的柠檬酸无水乙醇溶液，将上述溶液pH调节至3. 0-5. 0之间，得溶液 C ；④向上述溶液中加无水乙醇溶液至配制液的全量，搅勻，得溶液D ；⑤取溶液D，常规方法过滤，灌装，灭菌，包装，即得本发明紫杉醇注射液。在上述制备方法步骤中，步骤⑤中，柠檬酸溶液调节pH值优选至3. 5-4. 5。实施二①取适量无水乙醇溶解处方量的紫杉醇，得溶液A ；②取处方量的聚乙二醇15羟硬脂酸酯加入上述溶液中，得溶液B ；③配制1 %的盐酸无水乙醇溶液，将上述溶液PH调节至3. 0-5. 0之间，得溶液C ；④向上述溶液中加无水乙醇溶液至配制液的全量，搅勻，得溶液D ；⑤取溶液D，常规方法过滤，灌装，灭菌，包装，即得本发明紫杉醇注射液。在上述制备方法步骤中，步骤⑤中，柠檬酸溶液调节pH值优选至3. 5-4. 5。实施三①取适量无水乙醇溶解处方量的紫杉醇，得溶液A ；②取处方量的聚乙二醇15羟硬脂酸酯加入上述溶液中，得溶液B ；③配制1 %的酒石酸无水乙醇溶液，将上述溶液pH调节至3. 0-5. 0之间，得溶液 C ；④向上述溶液中加无水乙醇溶液至配制液的全量，搅勻，得溶液D ；⑤取溶液D，常规方法过滤，灌装，灭菌，包装，即得本发明紫杉醇注射液。在上述制备方法步骤中，步骤⑤中，柠檬酸溶液调节pH值优选至3. 5-4. 5。实施四①取适量无水乙醇溶解处方量的紫杉醇，得溶液A ；②取处方量的聚乙二醇15羟硬脂酸酯加入上述溶液中，得溶液B ；③配制1 %的苹果酸无水乙醇溶液，将上述溶液pH调节至3. 0-5. 0之间，得溶液 C ；④向上述溶液中加无水乙醇溶液至配制液的全量，搅勻，得溶液D ；⑤取溶液D，常规方法过滤，灌装，灭菌，包装，即得本发明紫杉醇注射液。在上述制备方法步骤中，步骤⑤中，柠檬酸溶液调节pH值优选至3. 5-4. 5。发明说明聚乙二醇15羟硬脂酸酯酯目前已被《欧洲药典》最新版收载。聚乙二醇15羟硬脂酸酯是一种非离子增溶剂和乳化剂，由15摩尔的环氧乙烷和1摩尔的12羟基硬脂酸反应制得。粘度极低，在30%的浓度时仍可肌肉注射。为了说明本发明紫杉醇注射液具有很好的稳定性和安全性，按照实施例1制备本发明紫杉醇注射液，灭菌条件选择115°C热压灭菌30min，得本发明产品一。将其放置在室温环境中，分别于刚放置时，放置3、6、12、24个月取样品检验，观察其外观和测定紫杉醇含量及有关物质含量，试验结果如下表1紫杉醇注射液室温考察稳定性试验结果^ — —- -------------^0天 3个月 6个月 12个月 24个月外观无色澄明无色澄明无色澄明无色澄明无色澄明含量(％) 紫杉醇98.57 98.36 98.29 98.05 97.98
最大杂质(%) 0.434 0.431 0.441 0.449 0.447
有关物质------
总杂质(％) 0.523 0.529 0.527 0.531 0.533从表1可以看出，本发明紫杉醇注射液在室温存放24个月后，产品含量和有关物质同存放初期相比基本没有变化，说明本发明质量稳定性好。取体重2. 6-3. Okg健康新西兰兔6只，由山东鲁抗医药集团有限公司提供，雌雄兼用，随机分为两组，即药物组和对照组。将家兔置于固定器内，药物组家兔左耳缘静脉滴注本发明产品一 10ml/kg，对照组家兔左耳缘静脉滴注0. 9%生理盐水10ml/kg，滴注速度为 20滴/min，每日上午给药1次，连续3天。滴注期间及滴注后，注意观察滴注部位有无红肿、 充血、出血和坏死等刺激作用。在末次给药24小时后，将动物处死，自点滴部位近心端Icm 处剪兔尔置10%福尔马林中固定送病理进行病理组织学检查。试验结果肉眼观察滴注本发明产品一兔耳部位未出现明显的红肿、充血、坏死等刺激反应，与滴注0. 9%氯化钠注射液组的兔耳无明显差异。病理学检查0. 9%氯化钠注射液对照组送标本为兔耳组织。皮肤组织结构正常，表皮无增厚，皮下组织未见充血、水肿等形态学改变。耳缘静脉未见扩张，血管内皮细胞也未见增及排列紊乱等改变，血管壁无增厚，官腔内无附壁血栓及炎性细胞浸润等改变。本发明产品一给药组镜检兔耳组织形态学同对照组，管壁未见附壁血栓，无组织变性或坏死等显著性刺激，无明显病理形态学改变。结论静脉滴注本发明产品一无明显血管刺激作用。取豚鼠体重在255_345g之间，由山东鲁抗医药集团有限公司提供，雌雄兼用共18 只，分为阴性对照(0.9%氯化钠注射液)组，受试物组及阳性对照(5%卵白蛋白生理盐水) 组，每组6只。各动物间日腹腔注射相应药业0.5ml/只，连续3次。分别在第一次注射后 14日及21日每组各取3只豚鼠静脉注射相应药液Iml/只，观察注射后15分钟内各豚鼠有无过敏反应。
结果见下表


本发明属医药技术领域，具体而言，本发明主要涉及一种紫杉醇注射液及其制备方法。本发明提供了一种质量稳定且低毒性的紫杉醇注射液。本发明紫杉醇注射液，含有紫杉醇、聚乙二醇15羟硬脂酸酯、无水乙醇及柠檬酸、盐酸、酒石酸和苹果酸中的一种或几种。本发明紫杉醇注射液，优选处方为含有紫杉醇含量5.4-6.6mg/ml，聚乙二醇15羟硬脂酸酯含量为5～80(V/V)，无水乙醇含量为20～95％(V/V)，柠檬酸含量为0.005％～0.02％(mg/ml)。