专利名称：一种红花注射液制备方法中药红花为菊科植物Carthamus tinctorius L.的干燥花，是一种常用活血化瘀中药，可用于冠心病、心绞痛、脉管炎等诸多血液循环障碍疾病的治疗，临床上红花以水煎液入药。近年来研究表明羟基红花黄色素A是其主要有效化学成分[ZangBX，JinM，SiN，etal..Acta Pharm Sin(药学学报)，2002，37(9)696-699]，它具有多方面的心血管药理作用，可抗凝、促进纤溶、抗血栓形成、改善微循环等[JinM，WuW，ChenWM，etal.Chin Pharm J(中国药学杂志)，2001，37(3)167-169.]。另据报导，羟基红花黄色素具有热不稳定性，易氧化的特点。红花注射液为一有效治疗闭塞性脑血管疾病、冠心病、脉管炎的中药制剂，传统的制备方法为水煎煮提取、高浓度醇沉除杂法。制备工艺中没有考虑到提取过程中温度、空气中氧对主要成分羟基红花黄色素A的破坏作用；此外，在醇沉时，直接使用高浓度醇醇沉，没有考虑沉淀物与羟基红花黄色素的共聚沉淀对羟基红花黄色素的损失作用。因此，通过对市场上多家企业生产的红花注射液产品分析，发现用传统工艺制备的注射液中羟基红花黄色素A含量极低，有的品种中甚至检测不到羟基红花黄色素A的存在。说明传统工艺有一定的缺陷。
本发明的目的是提供一种利用红花制备红花注射液的方法，该方法制得的红花注射液中羟基红花黄色素A含量高。本发明的制备方法包括如下步骤(1)提取以红花为原料，加所投红花重量8～20倍的水，在40～90℃通入惰性气体保护的条件下，提取30～90分钟，提取液过滤，滤渣再加入所投红花重量8～20倍的水，控制温度在80～100℃提取两次，提取时间为30～90min，过滤，合并三次滤液，滤液减压浓缩至相对密度为1.0～1.3，得第一次红花浓缩液；(2)醇沉第一次红花浓缩液在不断搅拌下，加入70wt％～95wt％药用乙醇，使醇含量达10wt％～30wt％，静置10～30分钟，再加入80wt％～95wt％乙醇使醇含量达50wt％～70wt％，冷藏静置24～48小时，过滤去除沉淀，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.0～1.2，再加乙醇使醇含量达60wt％～85wt％，冷藏静置24～48h，过滤，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.10～1.3，得到第二次红花浓缩液；(3)水沉第二次红花浓缩液按体积比加入5～20倍量去离子水，冷藏静置12～48小时，过滤去除沉淀，控制温度在60℃以下，减压浓缩滤液至相对密度为1.0～1.05，得到第三次红花浓缩液；(4)配液第三次红花浓缩液用20wt％～50wt％氢氧化钠溶液调pH至7.0～8.0，加注射用水使红花溶液的最终体积与所投红花重量比例为2升∶1千克，过滤，灌封，灭菌，即得红花注射液成品。如上所述的惰性气体最好为氮气。本着在对原传统工艺不作实质性改变的前提下，本发明对传统的工艺条件作了适当的改进，按本发明制备的红花注射液质量符合红花注射液的产品质量标准，且羟基红花黄色素A含量可达0.5mg/ml以上。本发明优点①在第一次提取中，由于提取温度低，又加之通入氮气保护，有效地减少了提取过程中红花黄色素A的损失。②第一次醇沉采用较低浓度醇沉，使沉淀物逐渐分级沉出，避免了大量沉淀物与羟基红花黄色素A的共聚沉淀，进而减少了醇沉过程对羟基红花黄色素A的损失。
③按本法制得的红花注射液内在质量符合中国药典要求，且羟基红花黄色素A含量不低于0.5mg/ml。
④红花注射液的质量标准中，颜色为黄红色至棕红色的澄明液体。按本法制得的红花注射液成品颜色为黄红色，颜色浅于传统工艺制备的红花注射液的棕红色。
具体实施实例实施例1取红花20kg，加10倍重量水，通入氮气在50℃条件下提取80min，过滤，滤渣再分别加入所投红花重量8倍、8倍量的水，90℃提取两次，第一次提取50min，第二次提取30min，过滤，合并三次提取液，减压浓缩至相对密度为1.20，得第一次红花浓缩液，第一次红花浓缩液在在不断搅拌下，加入80wt％乙醇使醇含量达20wt％，静置30min，再加入95wt％乙醇使溶液醇含量达70wt％，冷藏静置48h，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.20，再加95wt％乙醇使醇含量达75wt％，冷藏静置48h，过滤，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.20，第二次红花浓缩液，在第二次红花浓缩液中按体积比加入10倍量的水，冷藏静置24h，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.03，第三次红花浓缩液，用30％氢氧化钠溶液对第三次红花浓缩液调pH值为7.7，加注射用水使红花溶液的最终体积为40升，滤过，灌封，灭菌，即得成品。HPLC法测定成品中羟基红花黄色素A的含量为0.6mg/ml。
实施例2取红花50kg，加15倍重量水，通入氮气在60℃条件下提取40min，过滤，滤渣再分别加入所投红花重量10倍、10倍量的水，95℃提取两次，第一次提取50min，第二次提取50min，过滤，合并三次提取液，减压浓缩至相对密度为1.18，得第一次红花浓缩液，第一次红花浓缩液在在不断搅拌下，加入85wt％乙醇使醇含量达20wt％，静置30min，再加入95wt％乙醇使溶液醇含量达65wt％，冷藏静置48h，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.16，再加95wt％乙醇使醇含量达75wt％，冷藏静置48h，过滤，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.22，得第二次红花浓缩液，在第二次红花浓缩液中按体积比加入10倍量的水，冷藏静置24h，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.02，第三次红花浓缩液，用30％氢氧化钠溶液对第三次红花浓缩液调pH值为7.3，加注射用水使红花溶液的最终体积为100升，滤过，灌封，灭菌，即得成品。HPLC法测定成品中羟基红花黄色素A的含量为0.57mg/ml。
实施例3取红花100kg，加15倍重量水，通入氮气在55℃条件下提取50min，过滤，滤渣再分别加入所投红花重量12倍、12倍量的水，90℃提取两次，第一次提取50min，第二次提取50min，过滤，合并三次提取液，减压浓缩至相对密度为1.20，得第一次红花浓缩液，第一次红花浓缩液在在不断搅拌下，加入89wt％乙醇使醇含量达15wt％，静置30min，再加入95wt％乙醇使溶液醇含量达68wt％，冷藏静置40h，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.18，再加95wt％乙醇使醇含量达80wt％，冷藏静置48h，过滤，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.25，第二次红花浓缩液，在第二次红花浓缩液中按体积比加入15倍量的水，冷藏静置48h，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.05，第三次红花浓缩液，用45％氢氧化钠溶液对第三次红花浓缩液调pH值为7.5，加注射用水使红花溶液的最终体积为200升，滤过，灌封，灭菌，即得成品。HPLC法测定成品中羟基红花黄色素A的含量为0.55mg/ml。
实施例4取红花200kg，加15倍重量水，通入氮气在65℃条件下提取60min，过滤，滤渣再分别加入所投红花重量15倍、10倍量的水，90℃提取两次，第一次提取80min，第二次提取50min，过滤，合并三次提取液，减压浓缩至相对密度为1.26，得第一次红花浓缩液，第一次红花浓缩液在在不断搅拌下，加入88wt％乙醇使醇含量达16wt％，静置20min，再加入95wt％乙醇使溶液醇含量达60wt％，冷藏静置48h，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度为1.15，再加95wt％乙醇使醇含量达82wt％，冷藏静置48h，过滤，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.20，第二次红花浓缩液，在第二次红花浓缩液中按体积比加入20倍量的水，冷藏静置48h，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.02，第三次红花浓缩液，用50％氢氧化钠溶液对第三次红花浓缩液调pH值为7.2，加注射用水使红花溶液的最终体积为400升，滤过，灌封，灭菌，即得成品。HPLC法测定成品中羟基红花黄色素A的含量为0.54mg/ml。


一种红花注射液制备方法是以红花为原料进行加水提取，滤液减压浓缩至相对密度为1.0～1.3，得第一次红花浓缩液，在不断搅拌下分三次加入药用乙醇进行醇沉，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.10～1.3，得第二次红花浓缩液；再加入去离子水进行水沉，减压浓缩滤液至相对密度为1.0～1.05，得到第三次红花浓缩液，用氢氧化钠溶液调pH至7.0～8.0，加注射用水过滤，灌封，灭菌，即得红花注射液成品。本发明具有羟基红花黄色素A含量在0.5mg/ml以上，用于治疗闭塞性脑血管疾病、冠心病、脉管炎等效果优于传统制备工艺的产品的优点。