专利名称：一种富含γ-氨基丁酸的檀香叶提取液及其制备方法Y -氨基丁酸，英文名称Gama Amino Butyric Acid,简称 GABA。GABA 是一种非蛋白氨基酸，广泛分布于动植物体内。在植物中，如豆属、参属、中草药等的种子、根茎和组织液中都含有GABA。在动物体内，GABA几乎只存在于神经组织中，其中脑组织中的含量大约为0. ro. 6mg/g，免疫学研究表明，其浓度最高的区域为大脑中黑质。GABA是目前研究较为深入的一种重要的抑制性神经递质，它参与多种代谢活动，具有很高的生理活性。根据目前的研究，发现GABA的生理活性主要表现在以下几方面 (1)镇静神经、抗焦虑。医学家已经证明GABA是中枢神经系统的抑制性传递物质，是脑组织中最重要的神经递质之一。其作用是降低神经元活性，防止神经细胞过热，GABA能结合抗焦虑的脑受体并使之激活，然后与另外一些物质协同作用，阻止与焦虑相关的信息抵达脑指示中枢； (2)降低血压。GABA还具有降血压作用，其主要作用机制是通过调节中枢神经系统达到降压效果。GABA能作用于脊髓的血管运动中枢，有效促进血管扩张，达到降低血压的目的。据报道，黄芪等中药的有效降压成分即为GABA ; (3)治疗疾病。1997年，大熊诚太郎的研究表明GABA与某些疾病的形成有关，帕金森病人脊髓中GABA的浓度较低，癫痈病患者脊髓液中的GABA浓度也低于正常水平。日本大阪大学医学院的研究显示GABA对Kupperman综合症具有显著的改善效果。另外，神经组织中GABA的降低也与Huntington疾病、老年痴呆等神经衰败症的形成有关。(4)降低血氨。我国的临床医学和日本的研究者也都认为，GABA能抑制谷氨酸的脱梭反应，与a-酮戊二酸反应生成谷氨酸，使血氨降低。更多的谷氨酸与氨结合生成尿素排出体外，以解除氨毒，从而增进肝机能。摄入GABA可以提高葡萄糖磷酸酷酶的活性，使脑细胞活动旺盛，可促进脑组织的新陈代谢和恢复脑细胞功能，改善神经机能。(5)提高脑活力。GABA能进入脑内三梭酸循环，促进脑细胞代谢，同时还能提高葡萄糖代谢时葡萄糖磷酸酷酶的活性，增加乙酞胆碱的生成，扩张血管增加血流量，并降低血氨，促进大脑的新陈代谢，恢复脑细胞功能。(6)促进乙醇代谢。以嗜酒者为对象，服用GABA再饮用60ml威士忌后采血测定血中乙醇及乙醛浓度，发现后者浓度明显比对照组低。GABA因其独特的功效而被用于保健食品中。据报道，1986年日本成功开发出含有GABA的茶系列饮料。近年来GABA也被添加到酒、豆浆等饮料中。CN101346069A公开了一种含有GABA的豆浆，其制作方法是将所述发芽处理大豆的粉碎物和水的混合液或者从所述混合液中去除水不溶性成分后的溶液，在规定的温度下保持规定的时间，使所述发芽豆浆的每12. 5g固体成分中的GABA含量达13 mg以上且使谷氨酸含量达13mg以上，然后进行使酶失活的酶失活处理工序，从而制造出来。CN1685896A公开了一种发芽糙米饮料，采用发芽糙米为主要原料，经磨浆、分离澄清后，与奶粉、蔗糖混合，均质，罐装杀菌，制成的含有GABA的饮料。CN101077092A公开了一种发芽糙米酸奶，以牛奶和发芽的糙米为主要原料，其制备方法主要包括浸泡、打浆、液化、糖化、调配、均质、杀菌、发酵、搅拌、罐装和冷藏。制成含有GABA的酸奶饮料。CN101467556A公开了一种含GABA的乳酸菌饮料，包括乳酸菌饮料和GABA，其中，按重量百分比GABA占0. 19T0. 5%，其余为乳酸菌饮料。在印度，民间用檀香叶提取物与牛奶一起口服缓解淋病，及用混合的檀香叶粉末与椰子油外敷治疗荨麻疹。闻冲等从檀香叶中分离出牡荆苷、异牡荆苷等8种黄酮类单体， 而牡荆苷、异牡荆苷是防癌抗肿瘤的天然药物成分。秦明芳等研究发现檀香叶水提醇沉液具有加强衰竭离体蛙心正性肌力和增加心率作用，还具有较好的抗疲劳作用。这些研究表明檀香叶含有很多生理活性物质，具有良好的开发潜力。本发明人研究得知檀香叶无毒，叶中富含30多种氨基酸，其中谷氨酸、谷氨酰胺、精氨酸含量较高，还含有GABA和较高含量的硒。虽然现有技术中存在利用产GABA的乳酸菌或酵母发酵植物提取液制成含GABA饮料的技术，但还没有利用布氏乳杆菌发酵檀香叶提取液制成富含GABA的技术和产品。
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种富含Y -氨基丁酸的檀香叶提取液的制备方法。本发明的另一目的在于提供有所述制备方法制备得到的富含Y-氨基丁酸的檀香叶提取液。所得到的檀香叶提取液中Y-氨基丁酸的含量达到2. 08g/L，可以应用于功能性食品、饮料、保健品等制备，拓宽了檀香叶的应用价值。本发明的上述目的通过如下技术方案予以实现 一种富含Y-氨基丁酸的檀香叶提取液的制备方法，包括如下步骤 (1)将采摘的檀香叶阴干后粉碎，按檀香叶粉末与水以lg:30ml"lg:70ml的比例置于水浴锅中6(TlO(rC下水浴提取1(T30 min，抽滤，获得檀香叶提取液备用；
(2)将脱脂奶粉5 15g、糖2(T70g、谷氨酸钠:TlOg加入到IL步骤(I)所得的檀香叶提取液中，并调节PH为5.0，在121°C下灭菌20 min得发酵饮料培养基，备用；
(3)将布氏乳杆菌活化、扩大培养，制成发酵剂备用；
(4)接入发酵饮料培养基质量3 5%的发酵剂进行发酵，发酵条件为3(T40°C、初始pH条件为5.0保温发酵48h，然后过滤、杀菌、冷却，得到所述富含Y-氨基丁酸的檀香叶提取液。作为一种优选方案，所述富含Y -氨基丁酸的檀香叶提取液的制备方法，优选为包括如下步骤
(1)将采摘的檀香叶阴干后粉碎，按檀香叶粉末与水以lg:50ml的比例置于水浴锅中100°C下水浴提取1(T30 min，抽滤，获得檀香叶提取液备用；
(2)将脱脂奶粉6g、糖25g、谷氨酸钠IOg加入到IL步骤(I)所得的檀香叶提取液中，并调节pH为5. O，121°C灭菌20 min得发酵饮料培养基，备用；
(3)将布氏乳杆菌活化、扩大培养，制成发酵剂备用；
(4)接入发酵饮料培养基质量3 5%的发酵剂进行发酵，发酵条件为3(T40°C、初始pH条件为5. 0保温发酵48h，然后过滤、杀菌、冷却，得到所述富含GABA的檀香叶提取液。本发明中，所述的活化、扩大培养依照本领域的常规方法进行，优选用MRS固体平板培养基进行菌种活化传代，从活化的MRS固体平板培养基上挑取适量菌体接入液体种子培养基中，30°C静止培养22h，备用。作为一种优选方案，所述糖优选为葡萄糖、蔗糖或淀粉。其中选用淀粉的富含GABA的檀香叶提取液较粘稠，不利于溶液过滤澄清。因此，作为一种更优选方案，所述糖更优选为葡萄糖或蔗糖。
一种由所述制备方法制备得到的富含GABA的檀香叶提取液。檀香叶提取液经过布氏乳杆菌发酵后，营养成分得到了很好的保留和细化，并且其中的GABA的含量在0. 77^2. 08g/L，最高可达2. 08g/L，布氏乳杆菌在发酵过程中还会产生乳酸，可以加强肠道蠕动、帮助消化，因此，所述的富含GABA的檀香叶提取液可以应用于功能性食品、饮料、保健品等制备，拓宽了檀香叶的应用价值。与现有技术相比，本发明具有如下有益效果
本发明所述制备方法通过合理的筛选培养基、发酵剂及发酵工艺，制备了一种富含GABA的檀香叶提取液；所述富含GABA的檀香叶提取液中GABA的含量在0. 11 2. 08g/L，最高可达2. 08g/L，采用布氏乳杆菌发酵，使得产品中含有一定量的乳酸，其可以加强肠道蠕动帮助消化，因此，所述的富含GABA的檀香叶提取液可以应用于功能性食品、饮料、保健品等制备，拓宽了檀香叶的应用价值。

采用如下的工艺步骤进行
(1)将采摘的檀香叶阴干后粉碎，按檀香叶粉末与水以lg:50ml的比例置于水浴锅中100°C下水浴提取10 min，抽滤，获得檀香叶提取液备用；
(2)将脱脂奶粉6g、葡萄糖25g、谷氨酸钠IOg加入到IL步骤(I)所得的檀香叶提取液中，并调节PH为5.0，在121°C下灭菌20 min得发酵饮料培养基，备用；
(3)将布氏乳杆菌活化、扩大培养，制成发酵剂备用；
(4)接入发酵饮料培养基的3质量％的发酵剂进行发酵，发酵条件为30°C、初始pH条件为5. 0保温发酵48h后，经过过滤、杀菌、冷却，得到所述富含Y -氨基丁酸的檀香叶提取液。经检测，本实施例所得富含GABA的檀香叶提取液的中GABA的含量为I. 33g/L。实施例2
采用如下的工艺步骤进行
(I)将采摘的檀香叶阴干后粉碎，按檀香叶粉末与水以lg:50ml的比例置于水浴锅中100°C下水浴提取20 min，抽滤，获得檀香叶提取液备用；
(2)将脱脂奶粉6g、蔗糖25g、谷氨酸钠IOg加入到IL步骤(I)所得的檀香叶提取液中，并调节PH为5.0，在121°C下灭菌20 min得发酵饮料培养基，备用；
(3)将布氏乳杆菌活化、扩大培养，制成发酵剂备用；
(4)接入发酵饮料培养基的3质量％的发酵剂进行发酵，发酵条件为35°C、初始pH条件为5. 0保温发酵48h后，经过过滤、杀菌、冷却，得到所述富含Y -氨基丁酸的檀香叶提取液。经检测，本实施例所得富含GABA的檀香叶提取液的中GABA的含量为I. 90g/L。实施例3
采用如下的工艺步骤进行
(1)将采摘的檀香叶阴干后粉碎，按檀香叶粉末与水以lg:50ml的比例置于水浴锅中100°C下水浴提取30 min，抽滤，获得檀香叶提取液备用；
(2)将脱脂奶粉6g、淀粉25g、谷氨酸钠IOg加入到IL步骤(I)所得的檀香叶提取液中，并调节PH为5.0，在121°C下灭菌20 min得发酵饮料培养基，备用；
(3)将布氏乳杆菌活化、扩大培养，制成发酵剂备用；
(4)接入发酵饮料培养基质量3%的发酵剂进行发酵，发酵条件为40°C、初始pH条件为5. 0保温发酵48h后，经过过滤、杀菌、冷却，得到所述富含Y -氨基丁酸的檀香叶提取液。经检测，本实施例所得富含GABA的檀香叶提取液的中GABA的含量为0. 77g/L。实施例4
采用如下的工艺步骤进行
(1)将采摘的檀香叶阴干后粉碎，按檀香叶粉末与水以lg:50ml的比例置于水浴锅中100°C下水浴提取20 min，抽滤，获得檀香叶提取液备用；
(2)将脱脂奶粉6g、葡萄糖25g、谷氨酸钠IOg加入到IL步骤(I)所得的檀香叶提取液中，并调节PH为5.0，在121°C下灭菌20 min得发酵饮料培养基，备用；
(3)将布氏乳杆菌活化、扩大培养，制成发酵剂备用；
(4)接入发酵饮料培养基质量4%的发酵剂进行发酵，发酵条件为40°C、初始pH条件为5. 0保温发酵48h后，经过过滤、杀菌、冷却，得到所述富含Y -氨基丁酸的檀香叶提取液。经检测，本实施例所得富含GABA的檀香叶提取液的中GABA的含量为I. 10 g/L。实施例5
采用如下的工艺步骤进行
(1)将采摘的檀香叶阴干后粉碎，按檀香叶粉末与水以lg:50ml的比例置于水浴锅中100°C下水浴提取30 min，抽滤，获得檀香叶提取液备用；
(2)将脱脂奶粉6g、蔗糖25g、谷氨酸钠IOg加入到IL步骤(I)所得的檀香叶提取液中，并调节PH为5.0，在121°C下灭菌20 min得发酵饮料培养基，备用；
(3)将布氏乳杆菌活化、扩大培养，制成发酵剂备用；
(4)接入发酵饮料培养基质量4%的发酵剂进行发酵，发酵条件为30°C、初始pH条件为5. 0保温发酵48h后，经过过滤、杀菌、冷却，得到所述富含Y -氨基丁酸的檀香叶提取液。经检测，本实施例所得富含GABA的檀香叶提取液的中GABA的含量为2. 08g/L。实施例6采用如下的工艺步骤进行
(1)将采摘的檀香叶阴干后粉碎，按檀香叶粉末与水以lg:50ml的比例置于水浴锅中100°C下水浴提取10 min，抽滤，获得檀香叶提取液备用；
(2)将脱脂奶粉6g、淀粉25g、谷氨酸钠IOg加入到IL步骤(I)所得的檀香叶提取液中，并调节PH为5.0，在121°C下灭菌20 min得发酵饮料培养基，备用；
(3)将布氏乳杆菌活化、扩大培养，制成发酵剂备用；
(4)接入发酵饮料培养基质量4%的发酵剂进行发酵，发酵条件为35°C、初始pH条件为5. 0保温发酵48h后，经过过滤、杀菌、冷却，得到所述富含Y -氨基丁酸的檀香叶提取液。经检测，本实施例所得富含GABA的檀香叶提取液的中GABA的含量为I. 15g/L。
实施例7
采用如下的工艺步骤进行
(1)将采摘的檀香叶阴干后粉碎，按檀香叶粉末与水以lg:50ml的比例置于水浴锅中100°C下水浴提取30 min，抽滤，获得檀香叶提取液备用；
(2)将脱脂奶粉6g、葡萄糖25g、谷氨酸钠IOg加入到IL步骤(I)所得的檀香叶提取液中，并调节PH为5.0，在121°C下灭菌20 min得发酵饮料培养基，备用；
(3)将布氏乳杆菌活化、扩大培养，制成发酵剂备用；
(4)接入发酵饮料培养基质量5%的发酵剂进行发酵，发酵条件为35°C、初始pH条件为5. 0保温发酵48h后，经过过滤、杀菌、冷却，得到所述富含Y -氨基丁酸的檀香叶提取液。经检测，本实施例所得富含GABA的檀香叶提取液的中GABA的含量为I. 93g/L。实施例8
采用如下的工艺步骤进行
(1)将采摘的檀香叶阴干后粉碎，按檀香叶粉末与水以lg:50ml的比例置于水浴锅中100°C下水浴提取10 min，抽滤，获得檀香叶提取液备用；
(2)将脱脂奶粉6g、蔗糖25g、谷氨酸钠IOg加入到IL步骤(I)所得的檀香叶提取液中，并调节PH为5.0，在121°C下灭菌20 min得发酵饮料培养基，备用；
(3)将布氏乳杆菌活化、扩大培养，制成发酵剂备用；
(4)接入发酵饮料培养基质量5%的发酵剂进行发酵，发酵条件为40°C、初始pH条件为5. 0保温发酵48h后，经过过滤、杀菌、冷却，得到所述富含Y -氨基丁酸的檀香叶提取液。经检测，本实施例所得富含GABA的檀香叶提取液的中GABA的含量为I. 94g/L。实施例9
采用如下的工艺步骤进行
(1)将采摘的檀香叶阴干后粉碎，按檀香叶粉末与水以lg:50ml的比例置于水浴锅中100°C下水浴提取20 min，抽滤，获得檀香叶提取液备用；
(2)将脱脂奶粉6g、淀粉25g、谷氨酸钠IOg加入到IL步骤(I)所得的檀香叶提取液中，并调节PH为5.0，在121°C下灭菌20 min得发酵饮料培养基，备用；
(3)将布氏乳杆菌活化、扩大培养，制成发酵剂备用；
(4)接入发酵饮料培养基质量5%的发酵剂进行发酵，发酵条件为30°C、初始pH条件为5.0保温发酵48h，然后过滤、杀菌、冷却，得到所述富含Y-氨基丁酸的檀香叶提取液。经检测，本实施例所得富含GABA的檀香叶提取液的中GABA的含量为I. 51g/L。
对比例I
采用如下的工艺步骤进行
(1)将采摘的檀香叶阴干后粉碎，按檀香叶粉末与水以lg:50ml的比例置于水浴锅中100°C下水浴提取10 min，抽滤，获得檀香叶提取液备用；
(2)将脱脂奶粉6g、葡萄糖25g、谷氨酸钠IOg加入到IL步骤(I)所得的檀香叶提取液中，并调节PH为5.0，121°C灭菌20 min得发酵饮料培养基，备用；
(3)将植物乳杆菌活化、扩大培养，制成发酵剂备用；
(4)接入发酵饮料培养基质量5%的发酵剂进行发酵，发酵条件为30°C、初始pH条件为5. 0保温发酵48h，然后过滤、杀菌、冷却，得到GABA提取液。经检测，本实施例所得GABA提取液的中GABA的含量为0. 01g/L。我们发现，采用布氏乳杆菌进行发酵才能获得本发明所述的富含Y-氨基丁酸的檀香叶提取液，当采用植物乳杆菌代替布氏乳杆菌时，所得提取液中GABA的含量显著下降。


本发明公开一种富含γ-氨基丁酸的檀香叶提取液及其制备方法。其通过如下方法制备得到将采摘的檀香叶阴干后粉碎，按檀香叶粉末与水以1g:30ml~1g:70ml的比例置于水浴锅中60~100℃下水浴提取10~30min，抽滤，获得檀香叶提取液备用；将脱脂奶粉5~15g、糖20~70g、谷氨酸钠3~10g加入到1L所述檀香叶提取液中，并调节pH为5.0，在121℃下灭菌20min得发酵饮料培养基，备用；将布氏乳杆菌活化、扩大培养，制成发酵剂备用；接入发酵饮料培养基质量3~5%的发酵剂进行发酵，发酵条件为30~40℃、初始pH条件为5.0保温发酵48h，然后过滤、杀菌、冷却，得到所述富含γ-氨基丁酸的檀香叶提取液。所述富含γ-氨基丁酸的檀香叶提取液可以应用于功能性食品、饮料、保健品等制备。