专利名称：一种功能性双歧杆菌微胶囊的制作方法 双歧杆菌(Bifidobacteria)是人体肠道中典型的益生菌。但由于机体衰老、环境污染、饮食改变、滥用抗生素、放化疗等原因，往往使人体肠道的双歧杆菌数量下降，导致肠道微生态失调，造成机体病变。所以，研制并开发双歧杆菌微生态制剂(Microecologics)，通过外源方式补充并增加双歧杆菌在人体肠道定植的数量，对于调整人体肠道微生态平衡，提高免疫力，增强体质，具有重要意义。近年来，国内外双歧杆菌微生态制剂发展迅猛，在医药工业中占有越来越重要的地位，产品已达70多种。然而，由于双歧杆菌具有对营养要求苛刻、专性厌氧、对低pH环境敏感等特殊的生物学性状，使得双歧杆菌活菌制品，尤其是液态制品的保藏极为困难。目前国内外双歧杆菌液态制品在冷藏条件下，活菌保藏期(活菌含量≥1×106cfu/mL)一般只有5-7天。此外，由于胃酸对双歧杆菌具有杀伤作用，再加上消化道上端的胆盐环境对双歧杆菌的存活具有不利影响，摄入人体的双歧杆菌活菌数量在此过程中大幅下降，从而使双歧杆菌的益生作用大打折扣。因此，为了确保双歧杆菌制品在销售和消费时具有足够的活菌数量，双歧杆菌生物保护技术的研究与开发势在必行。
本发明的目的在于提供一种功能性双歧杆菌微胶囊制剂，解决了双歧杆菌活菌制品保藏期短、在保藏过程中活菌数量下降速度快等问题。本发明的构思是这样的。微胶囊技术是当今世界迅速崛起的高新技术之一，目前已开始应用于保护生物活性分子、组织和细胞以抵抗不利环境并在贮藏期内保持它们的活性。微胶囊系指采用特殊手段将固、液、汽物质包埋而成的微小致密胶囊，胶囊的直径以μm表示，在特定条件下，其内容物可控制释放，具有良好的功能特性和贮藏稳定性，可以解决传统工艺中不能解决的问题。本发明在大量试验研究的基础上，以食用凝胶为主要囊材，以中和剂CaCO3为辅材，以从健康人体中分离选育出的高活力双歧杆菌为试验菌株，确定了双歧杆菌微胶囊的配方组成。具体地，本发明的功能性双歧杆菌微胶囊的配方组成以质量比表示为食用凝胶∶CaCO3∶双歧杆菌菌液＝1.5-3.5∶0.2∶100，其中，食用凝胶由海藻酸钠和明胶组成，其组成以质量比表示为海藻酸钠∶明胶＝1-3∶0-1。本发明中，海藻酸钠为主要囊材，囊材为食用凝胶，由海藻酸钠、明胶组成，也可以只用海藻酸钠，不加明胶。该囊材安全无毒、不能被双歧杆菌分解，而且价廉易得。本发明的双歧杆菌微胶囊直径为1-2mm，活菌含量达109cfu/g以上。本发明的功能性双歧杆菌微胶囊的制备方法包括以下步骤(1)按比例将海藻酸钠、明胶、CaCO3和双歧杆菌菌液混合均匀；(2)将上述混合物喷入浓度为0.1-0.25mol·L-1的CaCl2溶液中即可制成双歧杆菌微胶囊成品。经实验证明，本发明的双歧杆菌微胶囊具有以下功能特性耐胃酸性、耐胆盐性、肠溶性。
本发明的双歧杆菌微胶囊在酸乳中具有很好的贮藏稳定性微胶囊化双歧杆菌在酸乳基质中降低了对温度和环境中氧的敏感性，耐酸能力增强，贮藏稳定性提高，活菌保藏期显著延长，在pH值为4.2的酸乳基质中，4℃有氧冷藏28d，活菌数仍在1×109cfu/g以上；在pH值4.2的酸乳基质中，室温(20～30℃)有氧贮藏28d，活菌数仍在1×107cfu/g以上。
本发明取得以下技术效果本发明的双歧杆菌微胶囊，具有良好的耐胃酸性、耐胆盐性、肠溶性，避免了胃酸和胆盐对摄入人体的双歧杆菌的杀伤作用，提高了双歧杆菌定植在人体肠道的活菌数量，实现了双歧杆菌对人体的益生作用，从而解决了人们在服用双歧杆菌活菌制品中存在的技术难题；本发明与其它微胶囊制作方法相比，不仅微胶囊化效率和菌体存活率高而且工艺简单、制作方便、实用性强；本发明的双歧杆菌微胶囊贮藏稳定性高，活菌保藏期长，解决了双歧杆菌乳制品活菌保藏期短的技术关键问题。

以下实施例用于说明本发明。
实施例1一、双歧杆菌微胶囊的配方组成以质量比表示为食用凝胶∶CaCO3∶双歧杆菌菌液＝1.5∶0.2∶100，其中，食用凝胶为海藻酸钠。
二、制备(1)按比例将海藻酸钠、CaCO3和双歧杆菌菌液混合均匀；(2)将上述混合物喷入浓度为0.1mol·L-1的CaCl2溶液中即可制成双歧杆菌微胶囊成品。
本发明的双歧杆菌微胶囊15天菌体存活率为0.35％，活菌含量仍在106cfu/g以上。
实施例2一、双歧杆菌微胶囊的配方组成以质量比表示为食用凝胶∶CaCO3∶双歧杆菌菌液＝2∶0.2∶100，其中，食用凝胶为海藻酸钠。
二、制备(1)按比例将海藻酸钠、CaCO3和双歧杆菌菌液混合均匀；(2)将上述混合物喷入浓度为0.2mol·L-1的CaCl2溶液中即可制成双歧杆菌微胶囊成品。
本发明的双歧杆菌微胶囊15天菌体存活率为2.29％，活菌含量仍在106cfu/g以上。
实施例3一、双歧杆菌微胶囊的配方组成以质量比表示为食用凝胶∶CaCO3∶双歧杆菌菌液＝2.5∶0.2∶100，其中，食用凝胶由海藻酸钠和明胶组成，其组成以质量比表示为海藻酸钠∶明胶＝1∶1；二、制备(1)按比例将海藻酸钠、明胶、CaCO3和双歧杆菌菌液混合均匀；(2)将上述混合物喷入浓度为0.2mol·L-1的CaCl2溶液中即可制成双歧杆菌微胶囊成品。
本发明的双歧杆菌微胶囊15天菌体存活率为0.67％，活菌含量仍在106cfu/g以上。
实施例4一、双歧杆菌微胶囊的配方组成以质量比表示为食用凝胶∶CaCO3∶双歧杆菌菌液＝3.5∶0.2∶100，其中，食用凝胶由海藻酸钠和明胶组成，其组成以质量比表示为海藻酸钠∶明胶＝3∶1，二、制备(1)按比例将海藻酸钠、明胶、CaCO3和双歧杆菌菌液混合均匀；(2)将上述混合物喷入浓度为0.1mol·L-1的CaCl2溶液中即可制成双歧杆菌微胶囊成品。
本发明的双歧杆菌微胶囊15天菌体存活率为1.23％，活菌含量仍在106cfu/g以上。
上述实施例中，15天菌体存活率是指制备出的微胶囊置于生理盐水中常温(20～30℃)保藏15天时的菌体存活率，该值＝(15天活菌数/0天的活菌数)×100％。菌体存活率是衡量微胶囊稳定性的重要指标之一。


本发明公开了一种功能性双歧杆菌微胶囊制剂。以海藻酸钠、明胶组成的食用凝胶为囊材，以一定比例将海藻酸钠、明胶、CaCO