专利名称：一种杞黄益肾制剂的制备方法和质量控制方法杞黄益肾制剂原料由淫羊藿、巴戟天、当归、三七、枸杞子、黄精、黄芪和丹参组成， 功能主治是温补肾阳，活血化瘀。适用于肾阳虚兼血瘀引起的腰膝酸软，阳痿，夜尿频多，心悸，头晕，胸闷，肢体麻木，四肢乏力等症。主要原料刺小檗科植物心叶淫羊藿，具有很高的药用价值。味性归经辛、甘，温。归肝、肾经主治功能补肾阳，强筋骨，祛风湿。淫羊藿含淫羊藿甙(icariin)、淫羊藿次甙(icarisoside)等，朝鲜淫羊藿含淫羊藿甙、淫羊藿新甙 (印imed0Side)A、B、C、D、E等.箭叶淫羊藿含淫羊藿甙、脱水淫羊藿甙元-3-0-α -鼠李糖甙，淫羊藿甙元-3-0- α -鼠李糖甙，槲皮素等。本发明以杞黄益肾中的淫羊藿苷为指标，采用高效液相色谱法，测定含量，该质量控制方法简便、准确、精密度高、重现性好，为控制杞黄益肾制剂质量标准提供了可靠的依据。
本发明目的公开杞黄益肾制剂、其制备方法，本发明另一个目的是公开杞黄益肾制剂的质量控制方法，包括对含量测定方法。一种杞黄益肾制剂由如下原料药按重量份制成淫羊藿80-100 巴戟天80-100 当归80-100三七10-30枸杞子 80-100 黄精 80-100黄芪80-100丹参 60-80一种杞黄益肾制剂优选如下原料药按重量份制成淫羊藿83巴戟天96当归83三七洸枸杞子83黄精96黄芪83丹参76一种杞黄益肾制剂优选如下原料药按重量份制成淫羊藿96 巴戟天83 当归96三七12 枸杞子96 黄精83黄芪96 丹参62一种杞黄益肾制剂优选如下原料药按重量份制成淫羊藿92 巴戟天92 当归86 三七12枸杞子86 黄精86 黄芪86 丹参72一种杞黄益肾制剂优选如下原料药按重量份制成淫羊藿86 巴戟天86 当归92 三七洸枸杞子92 黄精92 黄芪92 丹参62一种杞黄益肾制剂的制备方法如下三七粉碎，50%-80%醇提1-4次，过滤，浓缩至20_25°C时相对密度为1. 10-1.22， 备用；药渣与其余原料药合并，水煮1-4次，合并煎液，滤过，浓缩至20-25°C时相对密度为 1. 10 1. 22，加入醇至含醇量50-80 %，醇沉，滤液浓缩，同三七药液合并，加水，静置，过滤，滤液加辅料制成液体制剂或浓缩加辅料制成口服制剂。一种杞黄益肾制剂的制备方法优选如下将三七粉碎成粗粉，加10、8倍量50 %乙醇加热提取二次，依次2、1小时，滤过， 合并滤液，回收乙醇至相对密度为1. 10(20°C )备用。药渣与淫羊藿等七味合并，加10、8、 6倍量水，煎煮三次，依次为3、2、1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1. 10 1. 22 (250C )，加入乙醇使含醇量达50%，充分搅拌，静置M小时，滤过，滤液回收乙醇，药液同三七药液合并，加水1倍量搅勻，低温静置72小时，滤过，滤渣用少量水洗涤，洗液并入滤液中，加辅料制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、注射剂或口服液。杞黄益肾制剂的质量控制方法，包括如下鉴别和/或含量测定方法A取本发明1-2日口服剂量固体或液体制剂，加乙醚提取1-4次，弃去乙醚液，再用水饱和的正丁醇提取1-4次，合并提取液，浓缩1，用氨试液洗涤1-4次，弃去碱水层， 正丁醇层蒸干，残渣加甲醇至溶解，作为供试品溶液。另取人参皂苷Rbl、Rgl及Re对照品，加甲醇制成每Iml各含Img的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5 μ 1、对照品溶液2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水 (6.5 3 1)10°C以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；B取本发明1-2日口服剂量固体或液体制剂，用盐酸调PH值至2-3，加乙醚提取 1-4次，，浓缩至原体积的一半，用2-4%氢氧化钠提取1-4次，每次20ml，合并提取液，用盐酸调PH值至2-3，加乙醚提取1-4次，合并提取液，蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液。另取丹参对照药材5g，加水80ml，煎煮30-60分钟，滤过，滤液同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种深夜各5各μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-甲酸(9 4 0. 25)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铁试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。C色谱条件与系统适用性试验用十八烷基键合硅胶为填充剂；20-30 70-80的乙腈-水为流动相检测波长为270nm，理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备精密称取淫羊藿苷对照品适量，加甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，即得。供试品溶液的制备取本发明1次口服剂量固体或液体制剂，加水至溶解，通过已处理好的大孔树脂柱，用水洗脱，弃去水液，再用10-40 %乙醇洗脱，弃去乙醇洗脱液，继用50-80 %乙醇洗脱，收集洗脱淮，蒸干，残渣加甲醇溶解，超声处理5-30分钟，并转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，用微孔滤膜滤过，弃去初滤液5ml，收集继滤液，即得。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明每次口服剂量含淫羊藿苷 C33H40015 不得少于 2. 8mg。本发明对质量控制方法，能够测定杞黄益肾剂型包括但不限于片剂、颗粒剂、胶囊齐U、注射剂、口服液等临床或药学上应用的剂型。5本发明的淫羊藿苷含量测定方法学考察，利用UV-2401PC型紫外分光光度仪，对淫羊藿苷对照品，在200 400nm波长下进行紫外扫描，结果在270nm波长处有最大吸收， 因此选择270nm为检测波长。用4种流动相进行试验，结果表明流动相为乙腈-水(30 70) 时，效果最佳，柱压低，峰型尖锐，阴性无干扰。精密吸取样品(061201)供试液10 μ 1，重复进样5次，测定其峰面积，淫羊藿苷峰面积值的RSD = 0. 99%，试验结果表明，精密度良好。稳定性试验结果表明，淫羊藿苷含量测定的样品供试液在他内稳定性良好。对同一批样品(061201)制备样品供试液，测得峰面积值并计算含量，其淫羊藿苷峰面积值的RSD =0.84% ；淫羊藿苷含量的RSD = 0.85%，试验结果表明含量测定方法重现性良好。空白试验结果表明在被测成分异秦皮啶的保留时间处无干扰。具体实施例如下实施例1杞黄益肾口服液的制备取原料淫羊藿92g，巴戟天92g，当归86g，三七12g，枸杞子86g，黄精86g，黄芪 86g，丹参 72g ；将三七粉碎成粗粉，加10、8倍量50 %乙醇加热提取二次，依次2、1小时，滤过， 合并滤液，回收乙醇至相对密度为1. 10(20°C )备用。药渣与淫羊藿等七味合并，加10、8、 6倍量水，煎煮三次，依次为3、2、1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1. 10 1.22 (250C )，加入乙醇使含醇量达50%，充分搅拌，静置M小时，滤过，滤液回收乙醇，药液同三七药液合并，加水1倍量搅勻，低温静置72小时，滤过，滤渣用少量水洗涤，洗液并入滤液中，加入甜菊素4g、苯甲酸钠2. 5g，搅勻，放置，加水至1000ml，搅勻，分装，灭菌，即得。实施例2 鉴别实验(1)取实施例11-2日口服剂量固体或液体制剂，加乙醚提取2次，每次30ml，弃去乙醚液，再用水饱和的正丁醇提取3次，每次30ml，合并提取液，浓缩至30ml，用氨试液洗涤 2次，每次30ml，弃去碱水层，正丁醇层蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取人参皂苷Rbl、Rgl及Re对照品，加甲醇制成每Iml各含Img的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5 μ 1、对照品溶液2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(6.5 3 1)10°C以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(2)取实施例140ml，用盐酸调PH值至2-3，加乙醚提取2-3次，每次30ml，浓缩至 20ml，用2%氢氧化钠提取2次，每次20ml，合并提取液，用盐酸调PH值至2_3，加乙醚提取 2次，每次30ml，合并提取液，蒸干，残渣加醋酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液。另取丹参对照药材5g，加水80ml，煎煮45分钟，滤过，滤液同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种深夜各5各μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-甲酸 (9:4: 0. 25)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铁试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。实施例3 照高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基键合硅胶为填充剂乙腈-水(30 70) 为流动相；检测波长为270nm.理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备精密称取淫羊藿苷对照品适量，加甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，即得。供试品溶液的制备精密称取实施例110ml，通过已处理好的DlOl大孔树脂柱(内径1. 5cm,长15cm)，用水200ml洗脱，弃去水液，再用15%乙醇50ml洗脱，弃去15%乙醇洗脱液，继用70%乙醇IlOml洗脱，收集洗脱淮，蒸干，残渣加甲醇10ml，超声处理5分钟使溶解，并定量转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，用微孔滤膜滤过，弃去初滤液5ml，收集继滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定， 即得。实施例1每支含淫羊藿苷C33H40015不得少于2. 8mg。


本发明公开杞黄益肾制剂、制备方法和质量控制方法。杞黄益肾制剂原料由淫羊藿、巴戟天、当归、三七、枸杞子、黄精、黄芪和丹参组成，功能主治是温补肾阳，活血化瘀。适用于肾阳虚兼血瘀引起的腰膝酸软，阳痿，夜尿频多，心悸，头晕，胸闷，肢体麻木，四肢乏力等症。主要原料刺小檗科植物心叶淫羊藿，具有很高的药用价值。本发明的质量控制方法简便、准确、精密度高、重现性好，为控制杞黄益肾制剂质量标准提供了可靠的依据。