菠萝蛋白酶提取工艺的制作方法【技术领域】[0001 ] 本发明涉及菠萝蛋白酶提取【技术领域】，具体涉及菠萝蛋白酶制作工艺。[0002]菠萝蛋白酶是一种天然的无毒、无副作用的蛋白质，作为一种疏基水生成肽或氨基酸形成具有独特风味的蛋白质水解液。主要应用于食品和医药中，尤其在食品中有广泛的应用，可水解动物蛋白，水解羊胎素及大豆等，使食品的蛋白质水解成小分子肽或氨基酸大分子蛋白质，水解为易吸收的小分子氨基酸和蛋白质肉制品的精加工，可制成相应饼干松化剂、嫩肉粉等，更广泛的应用于肉类嫩化、饼干松脆、酒类澄清、面粉改良、大豆分解、高级口服液、保健产品等，可增加食品中氨基酸含量，改良食品风味，降低成本，且能大大提高食品营养价值，并作为非生物稳定剂制成的啤酒饮料澄清剂、酒类发酵剂等应用于酒类I酿造工业、酱油酿造工业、饮料生产工业等。技术创新点，在于工艺配制有了新的改善，催化调和剂有了新的突破，冻干工艺有待进一步的提高，改变了历史上从理论的分析上不可能达到的活性程度，高活性是很难从技术上做突破的。
[0003]本发明的目的是提供菠萝蛋白酶提取工艺，它更大的提高酶的活性和延长活性保存时间，技术的公关把酶活性从50万U/g提高到150万U/g以上，并且保证在不影响活性的前提下，控制水分在5%左右，使酶活性在常温下保6个月提高到18个月以上而不变；能够抑制肿瘤细胞的生长、防治心血管疾病、抑制毒素分泌；可用于烧伤脱痂、消炎等，且增强药物吸收力。[0004]为了解决所存在的问题，本发明是采用以下技术方案:它的工艺流程:1、将菠萝下脚料的榨汁液通入 吸附柱中进行吸附，上柱控制流速为80(T1000L/ h;废液在200u/ml以上时串入下柱，在200u/ml以下时排入污水处理站；2、当高岭土集合量达到50十亿酶活力单位后停止上柱，用15%Na0H中和高岭土至流出液PH7.0±0.2，排干树脂后，通入7~9%NaCl溶液浸泡30min后洗脱，洗脱流速控制在80(Tl000L/h，收集洗脱液即为高价滤液；3、往高价滤液中加入盐酸(I:3)调节PH5.0±0.2进行酸化，然后加入高价滤液259UW/V)的硫酸盐进行盐析，待完全溶解后，4 V静置12h ;4、将盐析物离心，并用4 °〇纯化水淋洗2~3次后即的菠萝蛋白酶粗酶；5、将粗酶投入溶解罐中，加入10倍的纯化水，边搅拌边用20%Na0H调PH7.0-7.5，使溶液澄清，过滤，将净化液泵入精制罐；6、在搅拌下，用盐酸(1:3)调节PH4.0±0.2，静置I小时使酶析出；7、放料，用离心机甩滤20-30分钟后，用冷纯化水淋洗2~3次后即得菠萝蛋白酶湿品；8、湿品过20目筛；真空度一0.08、.09MPa下常温减压干燥4~8h，控制水分0.2%以下得干品；9、干品过60目筛后；放料，按5kg/桶进行包装。[0005]本发明具有以下有益效果: 1、抑制肿瘤细胞的生长。[0006]2、对心血管疾病的防治是有益的，能抑制血小板聚集引起的心脏病发作和中风，缓解心绞痛症状，缓和动脉收缩，加速纤维蛋白原的分解。
[0007]3、抑制毒素分泌；实验证明菠萝酶能降低毒素结合活性并能抑制热不稳定毒素(LI)、霍乱毒素(CT)及热稳定毒素(ST)的分泌效应。
[0008]4、用于烧伤脱痂；菠萝酶能选择性地除去死皮，使新皮移植得以尽早进行。动物实验证明，菠萝酶对邻近的正常皮肤无不良影响。局部使用抗生素不影响菠萝酶的效果。
[0009]5、消炎作用；菠萝酶在各种组织中能有效地治疗炎症和水肿(包括血栓静脉炎、骨骼肌损伤、血肿、口腔炎、糖尿病人溃疡及运动损伤)；菠萝酶具有激活炎症反应的潜力。据统计资料推测，含有菠萝酶的混合物(含菠萝酶、胰蛋白酶、芸香苷)在疗效和安全性方面，更优于类固醇的消炎药，将菠萝酶与低剂量的抗菌素及其它酶混用的方法治疗风湿性关节炎有望取得好的疗效；菠萝酶还可治疗腹泻。
[0010]6、增进药物吸收；将菠萝酶与各种抗生素(如四环素，阿莫西林等)联用，能提高其疗效。相关研究表明，它能促进抗生素在感染部位的传输，从而减少抗生素的用药量。据推断，对于抗癌药物，也有类似的作用。此外，菠萝酶能促进营养物质的吸收。
[0011]7、更大的提高酶的活性和延长活性保存时间，技术的公关把酶活性从50万U/g提高到150万U/g以上，并且保证在不影响活性的前提下，控制水分在5%左右，使酶活性在常温下保6个月提高到18个月以上而不变。
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本【具体实施方式】采用以下技术方案:它的工艺流程:1、将菠萝下脚料的榨汁液通入吸附柱中进行吸附，上柱控制流速为80(Tl000L/ h;废液在200u/ml以上时串入下柱，在200u/ml以下时排入污水处理站；2、`当高岭土集合量达到50十亿酶活力单位后停止上柱，用15%Na0H中和高岭土至流出液PH7.0±0.2，排干树脂后，通入7~9%NaCl溶液浸泡30min后洗脱，洗脱流速控制在80(Tl000L/h，收集洗脱液即为高价滤液；3、往高价滤液中加入盐酸(1:3)调节PH5.0±0.2进行酸化，然后加入高价滤液25% (W/V)的硫酸盐进行盐析，待完全溶解后，4 V静置12h;4、将盐析物离心，并用4 °C纯化水淋洗2~3次后即的菠萝蛋白酶粗酶；5、将粗酶投入溶解罐中，加入10倍的纯化水，边搅拌边用20%Na0H调PH7.0-7.5，使溶液澄清，过滤，将净化液泵入精制罐；6、在搅拌下，用盐酸(1:3)调节PH4.0±0.2，静置I小时使酶析出；7、放料，用离心机甩滤20-30分钟后，用冷纯化水淋洗2~3次后即得菠萝蛋白酶湿品；8、湿品过20目筛；真空度一0.08、.09MPa下常温减压干燥4~8h，控制水分
0.2%以下得干品；9、干品过60目筛后；放料，按5kg/桶进行包装。
[0013]本【具体实施方式】更大的提高酶的活性和延长活性保存时间，技术的公关把酶活性从50万U/g提高到150万U/g以上，并且保证在不影响活性的前提下，控制水分在5%左右，使酶活性在常温下保6个月提高到18个月以上而不变；能够抑制肿瘤细胞的生长、防治心血管疾病、抑制毒素分泌；可用于烧伤脱痂、消炎等，且增强药物吸收力。