专利名称：一种从普洱茶中提取他汀类化合物的工艺及其产品的制作方法 目前，心脑血管疾病已成为全球人类死亡的主要原因。在欧美等发达国家，该病的死亡率居各种疾病之首，占死亡总人数的40％～50％。在我国，其死亡率仅次于恶性肿瘤，居第二位。缺血性心脑血管病的病理基础是动脉粥样硬化(atherosclerosis)，其病理核心是胆固醇在动脉壁的沉着，几乎所有的脂蛋白均涉及此过程，诸如极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、中间密度脂蛋白胆固醇(IDL)以及三酰甘油(TG)等。凡血浆中VLDL，IDL，LDL及载脂蛋白B(apoB)浓度高于正常值为高脂蛋白血症，易导致动脉粥样硬化。云南普洱茶的独特品质和悠久历史，是我国茶文化的重要组成部分。普洱茶是以云南普洱地区所产的云南大叶种茶晒青毛茶为原料，经过后发酵(或人工后发酵)形成的符合普洱茶云南省地方标准的散茶和紧压茶的总称。普洱茶的降血脂功效近年来越来越受到各界人士的关注。早在清朝年间就曾有过对普洱茶降血脂功效的记载，清·方以智稿，其子中通、中履等编《物理小识》云“普洱茶蒸之成团，西蕃市之，最能化物。”清·赵学敏《本草纲目拾遗》云“普洱茶膏，黑如漆，醒酒第一；消食化痰，清胃生津。普雨茶，蒸之成团，西蕃市之，最能化物。普洱茶味苦性刻，解油腻牛羊毒，苦涩，逐痰下气，利肠通泄。”清·吴大勋《滇南闻见录》云“团茶，能消食理气，去积滞，散风寒，最为有益之物。”历史的茶效记载，往往是凭感官、感受和经验而得，多数只知其然而不知其所以然。而时至今日，现代医学科学的发展，新的分析手段的应用，茶叶理化成分的科学研究正向前发展，既知其然，也必知其所以然。普洱茶的类别和茶性不同，广泛引起了国内外专家、学者的特别关注。到目前为止，许多学者对于普洱茶降血脂的功效非常关注并且开展了广泛的探讨，特别是北京利康绿色医药生物技术研究所对普洱熟茶的降血脂功效在生理效应及病理干预和药理药化等方面进行了深入地研究。日本学者I·Tomita等用中国云南生产的普洱茶和日本绿茶进行动物试验，观察对血清脂质代谢的影响，结果发现喂饲茶叶提取物6至8周后，血浆胆固醇脂类明显降低，而且连续喂饲普洱茶可以促进脂肪组织中甘油三酯分解。王旭华等对云南沱茶降低血清血脂进行动物试验，沱茶煎剂(40％)每鼠2ml灌胃，结果发现20至40h后血清血脂(胆固醇、磷脂质和甘油三脂)开始明显降低。法国的一家医院临床实验证明，饮用云南普洱茶对脂肪代谢作用明显，血脂的含量可下降13％(一个月中每日喝三碗)，云南普洱沱茶还能加速降低血液中酒精含量。巴黎圣安东尼医学系临床教学主任爱米乐·卡罗比医师实验证明，普洱茶对脂肪的代谢有意想不到的良好效果，凡饮用云南普洱茶的40％以上的病例有不同程度的体重减轻，年龄在40至50的病例效果更显著；对降低人体所含脂类化合物效果好的占34％，效果中等的占33％对降低人体所含甘油三脂、胆固醇、血尿酸等有不同程度的作用，有30％的人降低了胆固醇。法国国立健康和医学研究所80年代以来的临床试验表明，普洱沱茶可降血脂，使20名血脂含量很高的病人，两个月内血脂下降22％。巴黎亨利伦多医院贝纳尔贾可托教授，在克雷泰伊的莫道尔医院给20位血液脂肪过多的病人一天喝三碗云南沱茶，一个月后，发现病人血液中的脂肪几乎减少了四分之一。何国藩等对茶叶降血脂效应的研究认为，普洱茶对高脂模型兔有降低胆固醇、甘油三酯含量的效应；此外，饮普洱茶后能引起人的血管舒张、血压下降、心率减慢和脑部血流量减少等生理效应，故对老年人和高血压与动脉硬化患者，均有良好作用。昆明医学院临床试验证明使用云南普洱沱茶医治高脂血症55例与疗效较好的降脂药物安妥明治疗的31例对比，云南普洱茶的疗效高于安妥明，其降低胆固醇的效果则与安妥明相似，且长期饮用无副作用。
巴黎大学营养生理学试验室主任吕通教授，在奥尔赛营养生理学试验室用两组白鼠进行实验，一组用普通食物喂养，一组用富含胆固醇物喂养，两组都同时加入云南沱茶茶汁。9个月，血液化验结果，第一组脂肪降低10％，第二组脂肪降低30％。吕通教授说“云南沱茶中有一种或数种不详物质，在水中溶解后有促进新陈代谢、降低胆固醇的作用。”他汀类物质是一类组织选择性羟甲基戊二酰辅酶A(HMG2CoA)还原酶抑制剂，能竟争性地抑制胆固醇的生物合成，致细胞内胆固醇减少，反馈调节细胞表面低密度脂蛋白(LDL)受体的活力，促进血浆中LDL-C水平下降。在20世纪70年代，Brown等首次将Compactin(美伐他汀)作为细菌代谢物由Penicillium brevicom pactin(短密青霉)中提取出来。随后Endo等报道由Penicillium citrinum(桔青霉)菌株提取出了ML-236A，ML-236B(Compactin)和ML-236C，并研究了这几种物质的降胆固醇活性。不久，Endo等又报道了来自Monascusrubber(红曲霉菌)的Monacolin K(洛伐他汀)。另外，Alberts等也由Aspergillum terreus(土曲霉)提取出相同的化合物，并命名为Mevinolin(洛伐他汀)。在同一培养液中同时分离出4α，5二氢Mevinolin。


本发明的目的是为了从一种普通易得的后发酵普洱茶原料中提取出具有优质降脂降低胆固醇作用的他汀类化合物的提取工艺。
本发明的另一个目的是提供一种采用上述工艺制得的产品。
本发明的从普洱茶中提取他汀类化合物的工艺包括将普洱碎茶发酵液常温下离心分别得到滤液和茶渣，将滤液上大孔吸附树脂柱，用乙醇洗脱，收集洗脱液；将茶渣经丙酮浸提得到浸提液；合并洗脱液及浸提液后真空浓缩，用浓盐酸调PH值至2-5，并降温至10-19℃，加入乙酸丁酯充分溶解后，取丁酯相，经1-6次水洗，合并丁酯相，将丁酯相经常规减压蒸馏浓缩，静置结晶后即可得到他汀类化合物。
本发明的从普洱茶中提取他汀类化合物的工艺还可以包括将他汀类化合物进一步经过乙醇重结晶得到精粉。
本发明的从普洱茶中提取的他汀类化合物再加入不同的辅料即可制成片剂、胶囊、口服液或滴丸剂。
其中，所述大孔吸附树脂柱为南开大学化工厂产品AB-8、X-5、S-8、NKA-II，ADS-17。
根据我们的研究，普洱茶中丰富的他汀类物质来源于普洱茶后发酵过程中产生的优势菌群。普洱茶由生茶发酵为熟茶的过程中，主要优势菌群为黑曲霉、青霉属、根霉属、灰绿曲霉、酵母属等，这些菌属在适当的湿度、温度、和气候土质等特定环境下可以产生他汀类物质。例如，从存放5年以上的普洱熟茶浸出液中可分离出他汀类化合物120.2mg/kg，从陈年普洱碎茶末浓缩液中可分离出的他汀类化合物为260.1mg/kg。
本发明的从普洱茶中提取他汀类化合物的工艺不仅为普洱茶深加工开辟了一个新途径，也为生产降血脂类药物的有效成分——他汀类化合物提供了一种新资源和原料，且具有原料易得、工艺简单、产率高等特点。

实施例1一种从普洱茶中提取他汀类化合物的工艺，包括将普洱碎茶发酵液离心分别得到滤液和茶渣，将滤液经大孔吸附树脂柱AB-8(南开大学化工厂产品)，用70％乙醇洗脱，得到洗脱液，收集洗脱液(硅胶柱)，将茶渣经丙酮浸提得到浸提液；合并洗脱液及浸提液后进入真空浓缩罐真空浓缩，用浓盐酸调PH值为3，并降温至10℃，加入乙酸丁酯充分溶解后，取丁酯相，经3次水洗，合并丁酯相，将丁酯相经常规减压蒸馏浓缩，静置结晶，再用乙醇重结晶得到精粉。
将上述他汀精粉80份，加入20份淀粉，混合均匀装胶囊即可得到胶囊产品。
实施例2一种从普洱茶中提取他汀类化合物的工艺，包括将普洱碎茶发酵液离心分别得到滤液和茶渣，将滤液经大孔吸附树脂柱X-5，用70％乙醇洗脱，吸附得到洗脱液，收集洗脱液，将茶渣经丙酮浸提得到浸提液；合并洗脱液及浸提液后进入真空浓缩罐真空浓缩，用浓盐酸调PH值至4，并降温至19℃，加入乙酸丁酯充分溶解后，取丁酯相，经3次水洗，合并丁酯相，将丁酯相经常规减压蒸馏浓缩，静置结晶，再用乙醇重结晶得到精粉。
将上述他汀精粉与辅料按下述配方混合，制粒，60℃以下低温干燥即可制成含片。
普洱他汀提取物 80份山梨醇 60份葡萄糖粉 20份糊精 35份羧甲基纤维素钠 5份实施例3一种从普洱茶中提取他汀类化合物的工艺，包括将普洱碎茶发酵液离心分别得到滤液和茶渣，将滤液经大孔吸附树脂柱NKA-II，用70％乙醇洗脱，吸附得到洗脱液，收集洗脱液，将茶渣经丙酮浸提得到浸提液；合并洗脱液及浸提液后进入真空浓缩罐真空浓缩，用浓盐酸调PH值至3，并降温至15℃，加入乙酸丁酯充分溶解后，取丁酯相，经4次水洗，合并丁酯相，将丁酯相经常规减压蒸馏浓缩，静置结晶，再用乙醇重结晶得到精粉。
将上述他汀精粉80份，加入20份聚乙二醇6000或硬脂酸，加热溶化混匀后滴入液体石蜡中，按要求克重制成滴丸剂即可。


本发明为一种从普洱茶中提取他汀类化合物的工艺及其产品。其工艺包括将普洱碎茶发酵液离心分别得到滤液和茶渣，再经浸提、浓缩、加入乙酸丁酯溶解后，经水洗、减压蒸馏、浓缩、静置结晶后即可得到他汀类化合物。本发明的从普洱茶中提取他汀类化合物的工艺不仅为普洱茶深加工开辟了一个新途径，也为生产降血脂类药物的有效成分——他汀类化合物提供了一种新的资源和原料，且具有原料易得、工艺简单、产率高等特点。