专利名称：脑心通分散片及制备方法和质量控制方法脑心通胶囊用于治疗气虚血滞、脉络瘀阻所致脑卒中，症见半身不遂、肢体麻木、口眼歪斜、舌强语蹇及胸痹心痛、胸闷、心悸、气短；或脑栓塞、冠心病心绞痛属上述证候者，其疗效较好。但胶囊剂存在患者服药后局部药物浓度过高等不足之处，而分散片是近年来发展起来的一种速效制剂，有“固体口服液”之美誉，集片剂与口服液体制剂的优点于一身，并克服了两者的不足，能解决现有胶囊剂存在的问题。另外，为了全面考察和控制产品的质量，保证药品的临床疗效，需要制定合理而稳定的质量控制标准。
本发明的目的在于提供一种脑心通分散片及制备方法和质量控制方法，本发明在现有技术的基础上，将脑心通胶囊改剂为分散片，克服了现有胶囊剂的不足，集片剂与口服液体制剂的优点于一身，显著提高了其生物利用度，更加方便患者用药；并且研究制定了科学合理的质量控制方法，以有效地控制和提高产品质量。本发明是这样构成的它是由黄芪66g、赤芍27g、水蛭27g、桃仁27g、丹参27g、当归27g、川芎27g、红花13g、制乳香13g、制没药13g、鸡血藤20g、牛膝27g、桂枝20g、桑枝27g、地龙27g、全蝎13g和微晶纤维素185g、交联聚乙烯吡咯烷酮160g、低取代羟丙基纤维素32g、微粉硅胶11g、硬脂酸镁2g、阿司帕坦11g制备而成。脑心通分散片的制备方法为取地龙、全蝎，粉碎成细粉，黄芪、赤芍、水蛭、桃仁、丹参、当归、川芎、红花、乳香、没药、鸡血藤、牛膝、桂枝、桑枝共十四味粉碎成细粉，与上述粉末配研，加入微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、微粉硅胶、交联聚乙烯吡咯烷酮及阿司帕坦，混合均匀，用95％乙醇制软材，20目筛网制粒，于60℃±5℃干燥，干颗粒用20目筛网整粒，整粒后的颗粒中加入硬脂酸镁，混合均匀，压成片，包装，即得。脑心通分散片的质量控制方法所述质量控制方法主要包括性状、检查、鉴别、含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别是对丹参、黄芪、当归和川芎、牛膝的薄层鉴别；含量测定为对制剂中芍药苷的含量测定。丹参的鉴别方法是以丹参酮IIA对照品为对照，以甲苯∶甲酸乙酯＝19∶1为展开剂的薄层鉴别方法；黄芪的鉴别方法是以黄芪甲苷对照品为对照，以氯仿∶甲醇∶水＝13∶6∶2、10℃以下放置的下层溶液为展开剂的薄层鉴别方法；当归和川芎的鉴别方法是以当归对照药材和川芎对照药材为对照，以正己烷∶醋酸乙酯＝9∶1为展开剂的薄层鉴别方法；牛膝的鉴别方法是以牛膝对照药材为对照，以氯仿∶甲醇＝40∶1为展开剂的薄层鉴别方法。具体的鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)取本制剂15片，研细，称取10g，置索氏提取器中，加乙醚100ml，水浴上回流提取至近无色，药渣备用，提取液挥干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶甲酸乙酯＝19∶1为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本制剂15片，研细，称取10g，置索氏提取器中，加乙醚100ml，水浴上回流提取至近无色，将药渣挥干乙醚，置索氏提取器中，加甲醇100ml，水浴上回流提取至近无色，提取液蒸干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水3～5ml使溶解，放冷，通过内径1.5cm、长12cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝13∶6∶2、10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本制剂15片，研细，称取10g，加乙醚30ml，置水浴上回流1小时，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯5ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材及川芎对照药材各0.5g，分别加乙醚20ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(4)取本制剂8片，研细，称取4g，加乙醚30ml，置水浴上回流1小时，滤过，滤液浓缩至10ml，加盐酸1ml，加热回流1小时后浓缩至约5ml，加水10ml，用60～90℃石油醚20ml分次提取，提取液合并，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取牛膝对照药材2g，加乙醇20ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇＝40∶1为展开剂，饱和30分钟，上行展开约12cm，取出，晾干，喷以2％磷钼酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。
芍药苷的含量测定方法是以芍药苷对照品为对照，以甲醇∶水∶冰醋酸＝25∶75∶0.2为流动相的高效液相色谱法。
具体的含量测定方法为照《中国药典》2000年版一部附录VID高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰醋酸＝25∶75∶0.2为流动相；检测波长为230nm；理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500；对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷减压干燥36小时的芍药苷对照品10mg，置25ml量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本制剂，研细，取约0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入70％乙醇50ml，密塞，放置过夜，超声处理30分钟，摇匀，滤过，药渣及滤器用70％乙醇20ml分数次洗涤，洗液并入滤液中，蒸至近干，残渣加70％乙醇微热使溶解，转移至25ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂每片含赤芍以芍药苷C23H28O11计，不得少于0.40mg。
本发明所述质量控制方法包括性状药物为淡棕黄色至棕色片，气特异，味微苦；鉴别(1)取本制剂15片，研细，称取10g，置索氏提取器中，加乙醚100ml，水浴上回流提取至近无色，药渣备用，提取液挥干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶甲酸乙酯＝19∶1为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本制剂15片，研细，称取10g，置索氏提取器中，加乙醚100ml，水浴上回流提取至近无色，将药渣挥干乙醚，置索氏提取器中，加甲醇100ml，水浴上回流提取至近无色，提取液蒸干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水3～5ml使溶解，放冷，通过内径1.5cm、长12cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝13∶6∶2、10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本制剂15片，研细，称取10g，加乙醚30ml，置水浴上回流1小时，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯5ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材及川芎对照药材各0.5g，分别加乙醚20ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(4)取本制剂8片，研细，称取4g，加乙醚30ml，置水浴上回流1小时，滤过，滤液浓缩至10ml，加盐酸1ml，加热回流1小时后浓缩至约5ml，加水10ml，用60～90℃石油醚20ml分次提取，提取液合并，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取牛膝对照药材2g，加乙醇20ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇＝40∶1为展开剂，饱和30分钟，上行展开约12cm，取出，晾干，喷以2％磷钼酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；检查分散均匀性 取本制剂2片，置20℃±1℃的100ml水中，振摇3分钟，应全部崩解并通过二号筛；其他 应符合《中国药典》2005版一部附录ID片剂项下有关的各项规定；含量测定照《中国药典》2000年版一部附录VID高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰醋酸＝25∶75∶0.2为流动相；检测波长为230nm；理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500；对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷减压干燥36小时的芍药苷对照品10mg，置25ml量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本制剂，研细，取约0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入70％乙醇50ml，密塞，放置过夜，超声处理30分钟，摇匀，滤过，药渣及滤器用70％乙醇20ml分数次洗涤，洗液并入滤液中，蒸至近干，残渣加70％乙醇微热使溶解，转移至25ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂每片含赤芍以芍药苷C23H28O11计，不得少于0.40mg。
本方中黄芪有补气开阳、益卫解表、利水消肿之功能；丹参、红花有活血祛瘀、凉血消肿、养血安神之功效；当归、川芎、赤芍清热凉血、祛瘀止痛、补气活血行气；乳香、没药活血止痛、消肿生肌；桂枝、地龙清热息风、温阳通经、利尿通络；全蝎、水蛭有破血逐瘀、息风止经、解毒散结、通经止痛之功效，诸药合用，具有益气活血、化瘀通络之功效，临床上用于气虚血滞、脉络瘀阻所致脑卒中，症见半身不遂、肢体麻木、口眼歪斜、舌强语蹇及胸痹心痛、胸闷、心悸、气短；或脑栓塞、冠心病心绞痛属上述证候者。
与现有技术相比，本发明分散片具有下列优点崩解时间短，分散状态佳；药物溶出迅速，吸收快，生物利用度高；生产设备与普通片剂相同，适宜于工业化大生产；服用方便且方法多样，可以直接吞服或在水中分散后与果汁、牛奶等并服，尤其适合老、幼及吞咽困难的患者；生产、携带、运输方便，质量稳定。此外，本发明质量控制方法精密度高，重现性好，测量结果准确，可有效保证该制剂的临床疗效。
本申请人进行了一系列的实验研究，以保证本发明制剂的制备工艺和质量控制方法科学、合理、可行，从而使该制剂具有良好的疗效。
一、制备工艺研究1.制剂工艺处方的筛选与研究表1 制剂处方工艺筛选


制法将以上各方除硬脂酸镁外，其余各味均匀混合，用95％乙醇作润湿剂制软材，用20目筛制粒，60℃±5℃烘干，20目筛整粒，混入硬脂酸镁，压片，结果表明硬度＞4kg时处方1最为理想，因此确定处方1为脑心通分散片最终处方，采用处方1进行中试生产，结果成品收得率较高，说明该工艺可行，适合工业化大生产要求，三批中试产品的试验数据见表2。
脑心通分散片最终确定处方如下生药细粉一个处方量微晶纤维素 185g交联聚乙烯吡咯烷酮 160g低取代羟丙基纤维素 32g微粉硅胶11g硬脂酸镁2g阿司帕坦11g共制成1000片，每片重0.80g。
制备工艺称取处方量的生药细粉，与微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、微粉硅胶、交联聚乙烯吡咯烷酮及阿司帕坦混合均匀，用95％乙醇作润湿剂制软材，20目筛制粒，于60℃±5℃干燥，20目筛网整粒，干颗粒中加入硬脂酸镁，混合均匀，压片、包装，即得。
表2 三批中试产品的试验结果


结论本制剂三批中试产品试验结果表明，其工艺合理、稳定，成品收得率较高，所得成品经质量检验，结果表明均符合规定。
二、药效学研究参照Longa等方法制成大脑中动脉梗死(MCAO)模型，应用干湿重法观察脑含水量变化、HE染色观察梗死周围炎性细胞浸润、免疫组化方法观察脑组织中II-6的表达。研究不同剂量脑心通对脑梗死后大鼠行为学评分，脑含水量及脑组织中炎性细胞因子IL-6表达的影响。结果脑梗死组织周围炎细胞浸润和II-6阳性细胞表达于梗死后6h开始增多，48h达高峰，并持续到7d。脑心通治疗组大鼠脑梗死后脑水肿减轻，行为学评分降低，脑组织中II-6阳性细胞减少，大、中剂量脑心通治疗组效果较为显著。结论脑心通有抑制炎性细胞因子IL-6的过度表达，保护神经元，减轻脑水肿的作用，提示脑心通在临床上可用于治疗脑部疾病。
采用结扎犬冠状动脉左前降支制造急性心肌缺血模型，脑心通犬十二指肠给药后以心外膜电图、血清LDH和CK活性的变化、TTC染色法确定心肌缺血范围及程度。结果脑心通制剂能明显减轻心外膜电图标测的心肌缺血程度和心肌缺血范围，降低血清LDH和CK活性，缩小心肌梗死范围。提示脑心通具有抗犬急性心肌缺血损伤的作用，临床上可用于治疗心肌缺血引起的心血管疾病。
三、质量控制方法研究(一)样品及对照药来源样品本申请人自制，批号为050301、050302、050303。
丹参酮IIA对照品来源于中国药品生物制品检定所，批号110766-200416。
黄芪甲苷对照品来源于中国药品生物制品检定所，批号0781-200210。
当归对照药材来源于中国药品生物制品检定所，批号120927-200411。
川芎对照药材来源于中国药品生物制品检定所，批号0918-200004。
(二)含量限度本制剂规格为0.80g，脑心通分散片含量测定采用高效液相色谱法，每片含芍药苷(C23H28O11)不得少于0.40mg。
(三)性状本制剂为生药细粉加适量辅料，经制粒压片而成，参照脑心通胶囊质量标准性状项下的规定内容及经多批样品试制结果，确定脑心通分散片的性状为药物为淡棕黄色至棕色片；气特异，味微苦。
(四)鉴别参考国家食品药品监督管理局国家药品标准WS-10001(ZD-0001)-2002脑心通胶囊鉴别项下的内容，用薄层的方法对本制剂主药丹参、黄芪、当归、川芎、牛膝进行鉴别。
1、丹参的薄层鉴别(1)取本制剂15片，研细，称取10g，置索氏提取器中，加乙醚100ml，水浴上回流提取至近无色，药渣备用，提取液挥干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶甲酸乙酯(19∶1)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)点样量的选择经实验选择供试品溶液与对照品溶液各点样2μl、5μl、10μl，结果发现供试品溶液与对照品溶液点样5μl、10μl时斑点较好，较为清晰。故本鉴别项对照品溶液与供试品溶液选用5μl作为点样量。
(3)专属性实验取缺丹参的阴性样品约5g，同供试品法操作制成阴性供试品溶液，展开后在对照品处无相应斑点，说明阴性样品对本实验无干扰。
2、黄芪的薄层鉴别(1)取鉴别1、(1)项下的药渣，挥干乙醚，置索氏提取器中，加甲醇100ml，水浴上回流提取至近无色，提取液蒸干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水3～5ml使溶解。放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长12cm)，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(13∶6∶2)、10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰。供试品溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)点样量的选择经实验选择供试品溶液与对照品溶液各点样2μl、5μl、10μl，结果发现供试品溶液与对照品溶液点样2μl时斑点不清晰，10μl时斑点较大，分离不好，5μl时斑点较好，较为清晰。故本鉴别项对照品溶液与供试品溶液选用5μl作为点样量。
(3)专属性实验取缺黄芪的阴性样品约5g，同供试品法操作制成阴性供试品溶液，展开后在对照品处无相应斑点，说明阴性样品对本实验无干扰。
3、当归、川芎的薄层鉴别(1)取本制剂15片，研细，称取10g，加乙醚30ml，置水浴上回流1小时，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯5ml使溶解，作为供试品溶液。另取当归对照药材及川芎对照药材各0.5g，分别加乙醚20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(9∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(2)点样量的选择经实验选择供试品溶液与对照品溶液各点样2μl、5μl、10μl，结果发现供试品溶液与对照品溶液点样5μl、10μl时斑点较好，较为清晰。故本鉴别项对照品溶液与供试品溶液选用5μl作为点样量。
(3)专属性实验取缺当归、川芎的阴性样品5g，同供试品法操作制成阴性供试品溶液，展开后在对照品处无相应斑点，说明阴性样品对本实验无干扰。
4、牛膝的薄层鉴别(1)取本制剂8片，研细，称取4g，加乙醚30ml，置水浴上回流1小时，滤过，滤液浓缩至10ml，加盐酸1ml，加热回流1小时后浓缩至约5ml，加水10ml，用60～90℃石油醚20ml分次提取，提取液合并，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取牛膝对照药材2g，加乙醇20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(40∶1)为展开剂，饱和30分钟，上行展开约12cm，取出，晾干，喷以2％磷钼酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。
(2)点样量的选择经实验选择供试品溶液与对照品溶液各点样2μl、5μl、10μl，结果发现供试品溶液与对照品溶液点样5μl、10μl时斑点较好，较为清晰，2μl时斑点较浅，故本鉴别项对照品溶液与供试品溶液选用5μl作为点样量。
(3)专属性实验取缺牛膝的阴性样品约1g，同供试品法操作制成阴性供试品溶液，展开后在对照品处无相应斑点，说明阴性样品对本实验无干扰。
(五)检查1、分散均匀性取本制剂两片，置100ml水中振摇，在20℃±1℃水中，3分钟应全部崩解并通过2号筛。
表3 分散时间考察结果

2、砷盐按中国药典2000年版一部附录IXF砷盐检查法第一法进行检查，结果符合规定。
表4 砷盐测定结果

3、重金属按中国药典2000年版一部附录IXE重金属检查法第二法进行检查，结果符合规定。
表5 重金属测定结果

4、片重差异本制剂片重大于0.3g，按中国药典2000年版一部规定片重差异应在±5％以内，取本制剂三批样品20片检查，结果见下表6。
表6 片重差异检查结果

本制剂三批样品测定结果表明，片重差异均在规定范围之内。
5、微生物限度照微生物限度检查法(中国药典2000年版一部附录XIII)检查，三批样品的检查结果见下表。
表7 微生物限度检查结果


(六)含量测定1、方法(1)仪器与试药HP1100高效液相色谱仪，HP色谱工作站。
甲醇、冰乙酸为色谱纯，水为重蒸馏水，其余为分析纯。
供试品(脑心通分散片)批号050301、050302、050303。
(2)色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水-冰醋酸(25∶75∶0.2)为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500。色谱柱型号Hypersil ODS25μmφ4.6×250mm。
(3)对照品溶液的配制精密称取经五氧化二磷减压干燥36小时的芍药苷对照品10mg，置25ml量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
(4)供试品溶液的配制取本制剂，研细，取约0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入70％乙醇50ml，密塞，放置过夜，超声处理30分钟，摇匀，滤过，药渣及滤器用70％乙醇20ml分数次洗涤，洗液并入滤液中，蒸至近干，残渣加70％乙醇微热使溶解，转移至25ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
(4)检测波长的选择量取芍药苷对照品溶液在紫外分光光度计上测定紫外光谱图，在400～200nm波长范围内扫描，结果在230nm波长处有最大吸收峰，故选择230nm作为本制剂的检测波长。
2、提取条件的选择(1)提取方法的比较a、取本制剂，研细，取约0.8g两份，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入70％乙醇50ml，密塞，放置过夜，超声处理30分钟，摇匀，滤过，药渣及滤器用70％乙醇20ml分数次洗涤，洗液并入滤液中，蒸至近干，残渣加70％乙醇微热使溶解，转移至25ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
b、取本制剂，研细，取约0.8g两份，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入70％乙醇50ml，密塞，回流提取30分钟，摇匀，滤过，药渣及滤器用70％乙醇20ml分数次洗涤，洗液并入滤液中，蒸至近干，残渣加70％乙醇微热使溶解，转移至25ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
取续滤液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
表8 提取方法的比较结果

结果显示两者的提取结果，加热回流提取与超声提取效率差不多，考虑到习惯，选择用超声提取作为提取方法。
(2)提取溶剂选择a、照供试品溶液配制方法。
b、取本制剂，研细，取约0.8g两份，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入稀乙醇50ml，密塞，放置过夜，超声处理30分钟，滤过，药渣及滤器用稀乙醇20ml分数次洗涤，洗液并入滤液中，蒸至近干，残渣加稀乙醇微热使溶解，转移至25ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
取续滤液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
表9 提取溶剂的比较结果

结果显示70％乙醇提取的含量结果较高，因此选用70％乙醇作为提取溶剂。
(3)提取时间选择a、照供试品溶液配制方法。
b、取本制剂，研细，取约0.8g两份，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入70％乙醇50ml，密塞，超声处理30分钟，滤过，药渣及滤器用70％乙醇20ml分数次洗涤，洗液并入滤液中，蒸至近干，残渣加70％乙醇微热使溶解，转移至25ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。取续滤液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
表10 提取时间的比较结果

结果显示静置过夜后可以提取完全，因此选用放置过夜，再超声处理30分钟，提取效果较好。
3、空白试验取缺赤芍的阴性样品约0.8g，照样品含量测定项下提取，按上述色谱条件分析。与对照品相应的位置上，无明显其它峰出现。结果证明阴性样品对该试验无干扰。
4、标准曲线的绘制精密称取经五氧化二磷减压干燥36小时的芍药苷对照品10mg，置25ml量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml、1.4ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，各进样10μl，测定峰面积，以浓度C为横坐标，峰面积为纵坐标，绘图得标准曲线，回归方程为Y＝-5.89+12.883X，r＝0.9998测定结果见下表。
表11 线性考察

结果表明芍药苷在24.31μg/ml～56.73μg/ml范围内峰面积与浓度具有良好的线性关系。
6、精密度试验取本制剂(批号050301)按上法配制供试品溶液，重复进样5次，结果RSD为2.38％(n＝5)结果见下表。
表12 精密度试验结果

7、重现性试验按供试品配制方法配制6份供试品，分别测定每份样品含量，结果平均含量为1.12mg/g，RSD为4.82％(n＝6)结果见下表。
表13 重现性试验结果

8、回收率试验精密称取一已知含量的供试品(批号050301)，分别添加芍药苷对照品(浓度为40.52μg/ml)10ml，按上述方法制成供试品溶液，依法进行测定，计算回收率，测定结果见下表。
表14 回收率试验结果

9、稳定性试验取供试品溶液一份，每隔一定时间测定，测得芍药苷峰面积如下表，结果表明，供试品溶液在室温下放置24小时内稳定。测定结果见下表。
表15 稳定性试验结果

10、三批样品的测定及含量限度的确定按供试品溶液的配制方法，对十批样品进行含量测定，以确定其含量限度，十批样品的含量测定结果见下表。
表16 含量测定结果

最后确定其含量限度为0.40mg/片，应符合规定。
(七)对比结果、结论本制剂三批产品，按质量标准进行检测，结果表明都符合规定要求，无显著性差异。

本发明的实施例2所述质量控制方法包括以下内容性状药物为淡棕黄色至棕色片，气特异，味微苦；鉴别(1)取本制剂15片，研细，称取10g，置索氏提取器中，加乙醚100ml，水浴上回流提取至近无色，药渣备用，提取液挥干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶甲酸乙酯＝19∶1为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本制剂15片，研细，称取10g，置索氏提取器中，加乙醚100ml，水浴上回流提取至近无色，将药渣挥干乙醚，置索氏提取器中，加甲醇100ml，水浴上回流提取至近无色，提取液蒸干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水3～5ml使溶解，放冷，通过内径1.5cm、长12cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝13∶6∶2、10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本制剂15片，研细，称取10g，加乙醚30ml，置水浴上回流1小时，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯5ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材及川芎对照药材各0.5g，分别加乙醚20ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(4)取本制剂8片，研细，称取4g，加乙醚30ml，置水浴上回流1小时，滤过，滤液浓缩至10ml，加盐酸1ml，加热回流1小时后浓缩至约5ml，加水10ml，用60～90℃石油醚20ml分次提取，提取液合并，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取牛膝对照药材2g，加乙醇20ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇＝40∶1为展开剂，饱和30分钟，上行展开约12cm，取出，晾干，喷以2％磷钼酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；检查分散均匀性取本制剂2片，置20℃±1℃的100ml水中，振摇3分钟，应全部崩解并通过二号筛；其他应符合《中国药典》2005版一部附录ID片剂项下有关的各项规定；含量测定照《中国药典》2000年版一部附录VID高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰醋酸＝25∶75∶0.2为流动相；检测波长为230nm；理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500；对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥36小时的芍药苷对照品10mg，置25ml量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本制剂，研细，取约0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入70％乙醇50ml，密塞，放置过夜，超声处理30分钟，摇匀，滤过，药渣及滤器用70％乙醇20ml分数次洗涤，洗液并入滤液中，蒸至近干，残渣加70％乙醇微热使溶解，转移至25ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂每片含赤芍以芍药苷C23H28O11计，不得少于0.40mg。
本发明的实施例3质量控制方法可包括以下内容性状药物为淡棕黄色至棕色片，气特异，味微苦；鉴别(1)取本制剂15片，研细，称取10g，加乙醚30ml，置水浴上回流1小时，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯5ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材及川芎对照药材各0.5g，分别加乙醚20ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(2)取本制剂8片，研细，称取4g，加乙醚30ml，置水浴上回流1小时，滤过，滤液浓缩至10ml，加盐酸1ml，加热回流1小时后浓缩至约5ml，加水10ml，用60～90℃石油醚20ml分次提取，提取液合并，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取牛膝对照药材2g，加乙醇20ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇＝40∶1为展开剂，饱和30分钟，上行展开约12cm，取出，晾干，喷以2％磷钼酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；检查分散均匀性 取本制剂2片，置20℃±1℃的100ml水中，振摇3分钟，应全部崩解并通过二号筛；其他 应符合《中国药典》2005版一部附录ID片剂项下有关的各项规定；含量测定照《中国药典》2000年版一部附录VID高效液相色谱法测定
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰醋酸＝25∶75∶0.2为流动相；检测波长为230nm；理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500；对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷减压干燥36小时的芍药苷对照品10mg，置25ml量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本制剂，研细，取约0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入70％乙醇50ml，密塞，放置过夜，超声处理30分钟，摇匀，滤过，药渣及滤器用70％乙醇20ml分数次洗涤，洗液并入滤液中，蒸至近干，残渣加70％乙醇微热使溶解，转移至25ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂每片含赤芍以芍药苷C23H28O11计，不得少于0.40mg。
本发明的实施例4质量控制方法可包括以下内容性状药物为淡棕黄色至棕色片，气特异，味微苦；鉴别(1)取本制剂15片，研细，称取10g，置索氏提取器中，加乙醚100ml，水浴上回流提取至近无色，药渣备用，提取液挥干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯∶甲酸乙酯＝19∶1为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本制剂15片，研细，称取10g，置索氏提取器中，加乙醚100ml，水浴上回流提取至近无色，将药渣挥干乙醚，置索氏提取器中，加甲醇100ml，水浴上回流提取至近无色，提取液蒸干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水3～5ml使溶解，放冷，通过内径1.5cm、长12cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝13∶6∶2、10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本制剂8片，研细，称取4g，加乙醚30ml，置水浴上回流1小时，滤过，滤液浓缩至10ml，加盐酸1ml，加热回流1小时后浓缩至约5ml，加水10ml，用60～90℃石油醚20ml分次提取，提取液合并，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取牛膝对照药材2g，加乙醇20ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇＝40∶1为展开剂，饱和30分钟，上行展开约12cm，取出，晾干，喷以2％磷钼酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；检查分散均匀性 取本制剂2片，置20℃±1℃的100ml水中，振摇3分钟，应全部崩解并通过二号筛；其他 应符合《中国药典》2005版一部附录ID片剂项下有关的各项规定。
本发明的实施例5质量控制方法可包括以下内容性状药物为淡棕黄色至棕色片，气特异，味微苦；鉴别(1)取本制剂15片，研细，称取10g，置索氏提取器中，加乙醚100ml，水浴上回流提取至近无色，将药渣挥干乙醚，置索氏提取器中，加甲醇100ml，水浴上回流提取至近无色，提取液蒸干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水3～5ml使溶解，放冷，通过内径1.5cm、长12cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70％乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝13∶6∶2、10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品溶液色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本制剂15片，研细，称取10g，加乙醚30ml，置水浴上回流1小时，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯5ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材及川芎对照药材各0.5g，分别加乙醚20ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷∶醋酸乙酯＝9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
含量测定照《中国药典》2000年版一部附录VID高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰醋酸＝25∶75∶0.2为流动相；检测波长为230nm；理论板数按芍药苷峰计算应不低于1500；对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷减压干燥36小时的芍药苷对照品10mg，置25ml量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本制剂，研细，取约0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入70％乙醇50ml，密塞，放置过夜，超声处理30分钟，摇匀，滤过，药渣及滤器用70％乙醇20ml分数次洗涤，洗液并入滤液中，蒸至近干，残渣加70％乙醇微热使溶解，转移至25ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂每片含赤芍以芍药苷C23H28O11计，不得少于0.40mg。


本发明提供了一种脑心通分散片及制备方法和质量控制方法，它是由黄芪、赤芍、水蛭、桃仁、丹参、当归、川芎、红花、制乳香、制没药、鸡血藤、牛膝、桂枝、桑枝、地龙、全蝎和适当辅料制备而成的；与现有技术相比，本发明分散片具有下列优点崩解时间短，分散状态佳；药物溶出迅速，吸收快，生物利用度高；生产设备与普通片剂相同，适宜于工业化大生产；服用方便且方法多样，尤其适合老、幼及吞咽困难的患者；生产、携带、运输方便，质量稳定。