专利名称：一种苏云金芽孢杆菌及制备方法和应用的制作方法为了扩大苏云金芽孢杆菌的杀虫谱和提高杀虫活性，目前国内外均致力于新菌株的分离鉴定和新的杀虫基因的开发。在苏云金芽孢杆菌菌株的分离鉴定、筛选方面， 文献“三亚地区苏云金芽孢杆菌的筛选与生物活性测定(安徽农业科学，2009，37 (28) 13660-13661)”、“大茂山地区苏云金芽孢杆菌分布与多样性研究(中国农学通报，2011， 27(01) :166-169) ”、“桂林喀斯特地貌分布区苏云金芽抱杆菌菌株的分离鉴定(中国生物防治，2009，25 (2) :138-142) ”、“河北省果园苏云金芽孢杆菌菌株的分离鉴定(华北农学报，2010，25 (4) :201-205) ”、及“黑龙江凉水自然保护区苏云金芽孢杆菌的收集与鉴定(基因组学与应用生物学，2009，284 (4) :685-690) ”等对我国苏云金芽孢杆菌的分离、鉴定、分布特点、晶体蛋白质形态、杀虫特性等进行了研究。在高效、特异性菌株的筛选方面，文献“I 株对多种害虫高活性的苏云金杆菌BtCYZ-4(东北林业大学学报，2009，37 (9) =104-105) ”、 “一株对烟草甲高毒力的苏云金芽孢杆菌的分离与鉴定(化学与生物工程，2009, 26 (5) 42-45) ”、“对美国白蛾高毒力苏云金杆菌菌株的筛选(河北农业大学学报,2009, 32 (2) 89-92) ”、“对甜菜夜蛾高毒力苏云金杆菌的分离及生物测定(延边大学农学学报，2010, 34(2) :238-242) ”、“蛴螬高毒力苏云金芽孢杆菌研究(现代商贸工业，2010，9 :353-355) ”、 及“苏云金芽孢杆菌对松材线虫的杀线活性(中国生物防治，2010，26(1) :85-89)”等分别从众多的苏云金芽孢杆菌菌株中筛选到了对烟草甲、美国白蛾、甜菜夜蛾、蛴螬、线虫等害虫的高效特异性菌株；在杀虫基因克隆和工程菌构建方面，目前全世界内已克隆了 71类近 600多个苏云金芽孢杆菌的基因，文献“苏云金芽孢杆菌及其杀虫晶体蛋白基因资源的研究进展(上海农业学报，2010，26 (4) :135-139) ”、“苏云金芽孢杆菌cry9Aa基因的克隆、表达及活性分析(植物保护学报，2010，37 (6) =541-546) ”、“苏云金芽孢杆菌crylAc28基因的克隆及原核表达(东北农业大学学报，2010,41 (10) :61-67) ”、“一株对美国白蛾高毒力苏云金芽孢杆菌的杀虫基因鉴定(中国农学通报，2010，26 (3) :242-244) ”、“苏云金芽胞杆菌 cryllal7基因克隆、表达的研究(东北农业大学学报，2011，42 (4) :93-97) ”、“苏云金杆菌 cry7Ab8基因的克隆表达及其杀虫活性(华北农学报，2011，26 (2) :35-38) ”、及“一株含cry 新基因的苏云金杆菌菌株的研究(华北农学报，2011，26 (I) :54-57) ”等分别分离、鉴定、表达了一系列的新活性基因。在制剂研制方面，文献“抗紫外线降解苏云金芽胞杆菌微胶囊剂的制备工艺(华中农业大学学报，2009，28 (3) =281-285) ”、“ 17600IU/mg苏云金芽孢杆菌浓悬浮剂的研制(湖北农业科学，2010，49 (12) :3048-3051) ”、“0. 18%阿维菌素 100亿活芽孢/克苏云金杆菌粉剂防治马尾松毛虫试验(现代农业科技，2011年第13期143-144) ”、 “苏云金杆菌与粘虫颗粒体病毒联合作用对甜菜夜蛾的影响(扬州大学学报，2011，32 (2) 64-68) ”、“苏云金芽胞杆菌工程菌WG-001可湿性粉剂的增效化合物筛选(植物保护学报，2011,38(3) :271-275) ”等分别对苏云金芽孢杆菌杀虫剂的制剂化以及与其他杀虫制剂的联合应用工艺进行了研究。从生态环境和社会发展的整体出发，高效安全的生物农药的开发应用对人类、环境和农业的可持续发展都有着重要的意义，苏云金芽孢杆菌杀虫剂是生物农药中应用最广泛的一种无公害生物杀虫剂，有着广阔的发展前景。但目前生产应用的苏云金芽孢杆菌杀虫剂仍存在杀虫范围窄、有效成分易降解、易受环境因素影响等缺点。并且在生产实践中，由于人工的连续传代，苏云金杆菌芽孢和晶体变小、生长速度变慢、杀虫效果低下等缺点，所以仍需要不断从自然界中直接分离更加高效、广谱的苏云金芽孢杆菌用来开发杀虫剂
本发明的目的是在于提供了一种苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis),本发明命名为BtCS36(保藏号CCTCCM2012040)。该菌是从自然界直接分离，含有多个杀虫蛋白质编码基因，对鳞翅目的棉铃虫、茶尺蠖、小菜蛾、甜菜夜蛾、菜青虫等多种害虫具有高效毒杀作用，是一株对鳞翅目害虫高效且广谱的天然苏云金芽孢杆菌。该菌发酵性能优良，是一株具有开发、应用前景的苏云金芽孢杆菌天然菌株。本发明的另一个目的是在于提供了一种苏云金芽孢杆菌的制备方法，利用苏云金芽孢杆菌芽孢可耐78_82°C高温的特性以及可以形成伴胞晶体的特性，采用弹土法分离苏云金芽孢杆菌，以初孵甜菜夜蛾和棉铃虫为试虫，进行毒力生物测定，经过比较毒力致死中量LC5tl,筛选到高毒力菌株BtCS36。本发明的还有一个目的是在于提供了一种苏云金芽孢杆菌在杀虫剂发酵液制备中的应用方法，该方法发酵条件合理、简单易行、发酵周期短、发酵液毒力效价高。利用其生产新型Bt杀虫剂不仅可以高效防治多种鳞翅目害虫，保证农作物稳产高产，而且对生态环境安全，因此具有重要的现实意义和紧迫性。为了实现上述的目的，本发明采用以下技术措施—种苏云金芽孢杆菌的制备方法，其步骤是A、利用苏云金芽孢杆菌芽孢可耐78_82°C高温的特性以及可以形成伴胞晶体的特性，米用弹土法(Acta Microbiologica Sinica 30, 380-388),从中国土壤中(湖南长沙) 分离苏云金芽孢杆菌。B、以初孵甜菜夜蛾和棉铃虫为试虫，进行毒力生物测定，经过比较毒力致死中量 LC50,筛选到高毒力菌株BtCS36。C、采用形态观察和经典的生理生化鉴定方法，确立了 BtCS36基本的生理生化特性。BtCS36基本的生理生化特性见表I。其具体的生理生化特性如下I. H血清型以BtCS36的鞭毛抗原与Bt的标准抗血清进行交叉凝集反应及交叉吸收凝集反应试验，BtCS36的H血清型为H7。2.生化特性按Barjac的经典方法进行生理生化试验。表I苏云金芽孢杆菌BtCS36菌株的生化特征本发明公开了一种苏云金芽孢杆菌及制备方法和应用，保藏编号CCTCC M2012040。其步骤是:A、利用土壤中苏云金芽孢杆菌芽孢耐78－82℃高温以及形成伴胞晶体的特性，采用弹土法分离苏云金芽孢杆菌；B、以初孵甜菜夜蛾和棉铃虫为试虫，进行毒力生物测定，经过比较毒力致死中量LC50，筛选到高毒力菌株BtCS36。利用正交试验和小试发酵，确定了其发酵培养基配方和发酵工艺。利用该菌和确定的发酵工艺发酵周期为30小时左右，发酵液对棉铃虫的毒力效价达3000-5000IU/μl。生产新型Bt杀虫剂不仅可以高效防治多种鳞翅目害虫，保证农作物稳产高产，而且对生态环境安全，因此具有重要的现实意义和紧迫性。