苏云金杆菌防光乳剂生产方法

赵振宗, 焦丙戎, 郭随义, 赵献忠

1992年5月27日

1991年8月11日

1991年8月11日

赵振宗, 焦丙戎, 郭随义, 赵献忠

A01N63/00GK1061437SQ91105610

苏云金 防光 乳剂 杆菌 生产

1.一种苏云金杆菌防光乳剂生产方法，包括菌种制备、接种、分离浓缩、加入乳化剂、防腐剂，其特征在于它是将经菌种制备工艺制备的菌种悬液接种到采取的适量的经发酵液制备工艺制备的发酵液中做种子液，发酵液经种子液的发酵培养和发酵液的发酵培养两步培养后，再经加盐处理、分离浓缩、加入乳化剂、防腐剂、防光剂的2.根据权利要求1所述的苏云金杆菌防光乳剂生产方法，其特征在于发酵液制备是将120目以上的豆饼粉或花生饼粉、蛋白胨或鱼粉、淀粉、酵母粉、磷酸二氢钾或磷酸氢二钾、植物油或动物油或泡敌在通空气的同时拌入水中制成的，所需物质的重量百分比为豆饼粉或花生饼粉 1.0-12%蛋白胨或鱼粉 0.01-1.0%淀粉 0.1-3.5%酵母粉 0.1-1.0%磷酸二氢钾或磷酸氢二钾 0.1-1.8%植物油或动物油或泡敌 0.1-4.0%3.根据权利要求1或2所述的苏云金杆菌防光乳剂生产方法，其特征在于发酵液的发酵培养是以种子液的发酵培养和发酵液的发酵培养两步完成的，第一步以适量的发酵液接种后做种子液，在压力为0.04-0.05MPa、种子液(立方米)∶通气量(立方米/分)＝1∶1.1-1∶1.3、温度为25-40℃的条件下发酵，培养至对数盛期;第二步将已发酵培养好的种子液注入发酵液中，在压力为0.04-0.05MPa、发酵液(立方米)∶通气量(立方米/分)＝1∶1.1-1∶1.3、温度为25-40℃的条件下发酵，培养至全部菌体形成老熟孢子囊，并有20-90%的芽晶脱落4.根据权利要求1或2所述的苏云金杆菌防光乳剂生产方法，其特征在于发酵液的加盐处理是向已发酵培养好的发酵液中加入0.1-0.3%的盐5.根据权利要求3所述的苏云金杆菌防光乳剂生产方法，其特征在于发酵液的加盐处理是向已发酵培养好的发酵液中加入0.1-0.3%的盐6.根据权利要求1或2所述的苏云金杆菌防光乳剂生产方法，其特征在于加入已加入乳化剂、防腐剂的发酵液中的防光剂为柠檬黄和明胶或日落黄和明胶，所需物质的重量百分比为柠檬黄或日落黄 0.01-0.1%明胶 0.1-10%7.根据权利要求3所述的苏云金杆菌防光乳剂生产方法，其特征在于加入已加入乳化剂、防腐剂的发酵液中的防光剂为柠檬黄和明胶或日落黄和明胶，所需物质的重量百分比为柠檬黄或日落黄 0.01-0.1%明胶 0.1-10%8.根据权利要求4所述的苏云金杆菌防光乳剂生产方法，其特征在于加入已加入乳化剂、防腐剂的发酵液中的防光剂为柠檬黄和明胶或日落黄和明胶，所需物质的重量百分比为柠檬黄或日落黄 0.01-0.1%明胶 0.1-10%9.根据权利要求5所述的苏云金杆菌防光乳剂生产方法，其特征在于加入已加入乳化剂、防腐剂的发酵液中的防光剂为柠檬黄和明胶或日落黄和明胶，所需物质的重量百分比为柠檬黄或日落黄 0.01-0.1%明胶 0.1-10%10.根据权利要求9所述的苏云金杆菌防光乳剂生产方法，其特征在于豆饼粉或花生饼粉、蛋白胨或鱼粉、淀粉、酵母粉、磷酸二氢钾或磷酸氢二钾、植物油或动物油或泡敌是在通空气的同时顺序拌入水中的11.根据权利10所述的苏云金杆菌防光乳剂生产方法，其特征在于向已发酵培养好的发酵液中加盐的同时冷却至25℃，调PH5.5

本发明涉及一种杀虫剂的生产方法，特别是一种苏云金杆菌防光乳剂生产方法，属微生物技术领域苏云金杆菌是一种微生物，用它制得的杀虫剂对鳞翅目等害虫有很大的杀伤作用，并且高效，药效期长，低残留，是一种理想的无公害微生物农药CN1035843A公开了一种苏云金杆菌固体薄层保湿发酵的方法，这种方法受季节的影响大，劳动强度高，不适应于工业化生产CN1043603A公开了一种苏云金杆菌颗粒混剂，这种方法制得的混剂，不仅含有难分解的化学杀虫剂-呋喃丹，残留期长，而且是以无任何杀虫作用的河沙为载体的，为颗粒状，只能洒施，药效低，应用面窄，防治范围受限制CN1037172A公开了一种苏云金杆菌颗粒剂生产工艺，该方法生产工艺主要由棉籽饼备料，钭面培养，发酵罐用液体培养菌种，筛20-60目颗粒载体，混入苏云金杆菌培养基，蒸汽消毒，接种，装入培养池内培养，干燥后检查分装等工序组成，这种方法生产的产品含菌数低，为颗粒状，只能洒施、应用面窄CN1035843A公开的苏云金杆菌固体薄层保湿发酵法生产的产品、CN1043603A公开的苏云金杆菌颗粒混剂、CN1037172A公开的苏云金杆菌颗粒剂生产工艺生产的产品均要避光贮存本发明的目的在于克服现有技术的不足，而提供一种苏云金杆菌防光乳剂的生产方法，该方法能防止菌体自溶，发酵菌数高，周期短，收率高，产品可用透明容器盛装，药效强、药效长，产品为乳剂可喷施、应用面宽本发明目的是这样实现的一种苏云金杆菌防光乳剂生产方法，包括菌种制备、发酵液制备、接种、发酵培养、发酵液加盐处理、分离浓缩、加入乳化剂、防腐剂、防光剂发酵液的制备是将120目以上的豆饼粉或花生饼粉、蛋白胨或鱼粉、淀粉、酵母粉、磷酸二氢钾或磷酸氢二钾、植物油或动物油或泡敌在通空气的同时拌入水中，所需物质的重量百分比为豆饼粉或花生饼粉 1.0-12%蛋白胨或鱼粉 0.01-1.0%淀粉 0.1-3.5%酵母粉 0.1-1.0%磷酸二氢钾或磷酸氢二钾 0.1-1.8%植物油或动物油或泡敌 0.1-4.0%发酵液的发酵培养是以种子液的发酵培养和发酵液的发酵培养两步完成的，第一步以适量的发酵液接种后做种子液，在压力为0.04-0.05MPa、种子液(立方米)∶通气量(立方米/分)＝1∶1.1-1∶1.3、温度为25-40℃的条件下发酵，培养至对数盛期;第二步将已发酵培养好的种子液注入发酵液中，在压力为0.04-0.05MPa、发酵液(立方米)∶通气量(立方米/分)＝1∶1.1-1∶1.3、温度为25-40℃的条件下发酵，培养至全部菌体形成老熟孢子囊，并有20-90%的芽晶的脱落发酵液的加盐处理是向已发酵培养好的发酵液中加入0.1-0.3%的盐防光剂为柠檬黄和明胶或日落黄和明胶，所需物质的重量百分比为柠檬黄或日落黄 0.01-0.1%明胶 0.1-10%本发明所提供的苏云金杆菌防光乳剂生产方法能防止菌体自溶，发酵菌数高，周期短，收率高，产品可用透明容器盛装，药效强、药效长且为乳剂可喷施，应用面宽下面将结合实施例对本发明作进一步的详述菌种来源自然病虫尸中分离、诱变筛选获得1、菌种制备a、茄瓶钭面培养基制备将蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、琼脂加入茄瓶中的水中，PH值7.2，再经0.11MPa的蒸汽消毒30分钟后，冷却至55℃，将茄瓶钭置，茄瓶中的液体凝固后即为茄瓶钭面培养基，所需物质的重量百分比为蛋白胨 1%牛肉膏 0.3%葡萄糖 0.1-1.0%琼脂 2%b、菌种培养将钭面培养基放入恒温箱中，经37℃、24小时试培养，观察无杂菌生长后，挑适量沙土管菌种，在无菌操作台上接入茄瓶钭面培养基，经37℃恒温培养17小时后，即在茄瓶钭面培养基表面长出菌苔c、菌种悬液制备以无菌操作，先往茄瓶中加入适量无菌水，然后用接种环刮取菌苔装入悬液瓶中，即制成菌种悬液2、发酵液制备将120目的豆饼粉、蛋白胨、淀粉、酵母粉、磷酸二氢钾、泡敌在通空气的同时顺序拌入发酵罐中的水中，所需物质的重量百分比为豆饼粉 1%蛋白胨 0.1%淀粉 0.1%酵母粉 0.1%磷酸二氢钾 0.1%泡敌 0.1%3、接种配制好的发酵液经0.09-0.13MPa的蒸汽消毒40分钟后，冷却至40℃，再采用无菌操作法将菌种悬液注入采取的10%的发酵液中，完成接种工作4、发酵培养a、种子液发酵培养，取已接种的发酵液做种子液，在压力为0.05MPa、种子液(立方米)∶通气量(立方米/分)＝1∶1.1、温度为33℃的条件下发酵，培养至对数盛期即完成种子液发酵培养b、发酵液发酵培养将已发酵培养好的种子液注入发酵液中，在压力为0.04MPa、发酵液(立方米)∶通气量(立方米/分)＝1∶1.1、温度为30℃的条件下发酵，培养至全部菌体形成老熟孢子囊，并有90%芽晶脱落即完成发酵液发酵培养5、发酵液的加盐处理向已发酵培养好的发酵液中加入0.1%的盐(NaCl)的同时冷却至25℃，调PH5.56、用分离机浓缩加盐处理好的发酵液，使含菌数达到120亿/毫升以上7、向浓缩后的发酵液中加入乳化剂-二甲苯和酸性蓖麻油，其重量百分比为二甲苯 3%酸性蓖麻油 3%8、向已加入乳化剂的发酵液中加入0.2%的已溶化好的苯甲酸钠防腐剂，防止菌体自溶、菌液腐败9、向已加入乳化剂、防腐剂的发酵液中加入防光剂-柠檬黄和明胶，其重量百分比为柠檬黄 0.1%明胶 5%