专利名称：甘露寡糖脂质体纳米制剂的生产工艺的制作方法甘露寡糖脂质体纳米制剂是一种天然高新制剂，它可作为禽类替代抗生素和化学药物的饲料添加剂，能够避免抗药性和药物残留对畜产品的污染，减少畜禽有害排泄物、 蛋白质用量和氮污染，应用前景广阔。据统计，目前国内每年鸡的存栏数为40亿只，若有 1. 0%的使用率，即每年应用鸡4000万只，以平均每只用量5mL计，则年需求量达200000L。 按市场价格每升200元计算，则年销售额达4000万元，纯利润可达为1200万元(利润率按 30%计)。然而，目前制备甘露寡糖脂质体纳米制剂的方法(逆向蒸发法和薄膜分散法)生产效率低难以满足市场需求，而且包封率低导致药效低。
本发明要解决的技术问题是提供一种包封率和生产效率较高的甘露寡糖脂质体纳米制剂的生产工艺。为解决上述技术问题采用如下技术方案甘露寡糖脂质体纳米制剂的生产工艺， 包括如下步骤<1>按重量比2 1 6 1准确称取大豆卵磷脂和胆固醇，用无水乙醇溶解制成质量浓度为8 17%的类脂溶液；<2>用pH 6. 0 7. 5的磷酸盐缓冲液溶解甘露寡糖制成质量浓度为0. 5 1. 25% 的甘露寡糖溶液；<3> 一边搅拌步骤<2>所得甘露寡糖溶液，一边将步骤<1>所得类脂溶液按体积比 1 8缓缓地注入其中，继续搅拌1 2小时，挥发除去乙醇得甘露寡糖脂质体混悬液；<4>将步骤<3>所得甘露寡糖脂质体混悬液依次通过0. 45 μ m和0. 22 μ m滤膜整粒得透明乳状液体，4°C保存。搅拌以磁力搅拌机在1800r/min进行。注入采用5号注射器针头且保持针头在液面以下。本发明的甘露寡糖脂质体纳米制剂的生产工艺采用乙醇注入法，应用于生产甘露寡糖脂质体纳米制剂可提高其包封率，其包封率明显高于逆向蒸发法和薄膜分散法，可增加药效、扩大供应量以满足市场需求。照5因素4水平进行L16 (45)实验，筛选工艺参数，正交试验因素和水平设计及结果见表1和表2。由表2可以看出，在制备甘露寡糖脂质体纳米制剂时，胆固醇的量是影响甘露糖脂质体纳米制剂包封率的最大影响因素，其后依次是乙醇用量、磷酸缓冲液的PH值、甘露寡糖质量浓度、大豆卵磷脂的量。采用正交试验设计方法确定甘露寡糖脂质体纳米制剂制备的较佳条件为大豆卵磷脂和胆固醇的质量比为2 1 6 1，乙醇溶解类脂溶液最终浓度为8 17%，磷酸缓冲液pH值为6. 0 7. 5，甘露寡糖溶液浓度为0. 5 1. 25 %。表1正交试验设计表水平磷脂(ing)A胆同醇(Ing)B因素无水乙醇的用量C磷酸盐缓冲液的pH值D甘露寡糖的质量浓度E16001508%6.00.5%280020011%6.50.75%3100025014%7.01%4120030017%7.51.25%表2正交试验结果表
本发明公开了一种甘露寡糖脂质体纳米制剂的生产工艺，它采用乙醇注入法，建立的较佳工艺条件为大豆卵磷脂和胆固醇的质量比为2:1～6:1，乙醇溶解类脂溶液最终浓度为8～17%，磷酸缓冲液pH值为6.0～7.5，甘露寡糖溶液浓度为0.5～1.25%。本法可显著提高甘露寡糖脂质体纳米制剂的包封率，为今后规模化生产提供了很好的工艺路线，可有效的提高其制剂的药效，保证这种替代抗生素和化学药物饲料添加剂的天然药物高新制剂的市场供应。