含巯基壳聚糖衍生物及复合物纳米粒子及制备方法

张其清, 段瑞平, 关嫚, 刘英杰

2014年7月23日

2014年3月25日

2014年3月25日

中国医学科学院生物医学工程研究所

A61K47/48GK103936883SQ201410113731

壳聚糖 巯基 复合物 纳米 衍生物

1.含巯基壳聚糖衍生物的制备方法，其特征是包括如下步骤 (1)将分子量为100K-200KDa，脱乙酰度77%_90%的壳聚糖加入pH=6.0的磷酸盐缓冲液使壳聚糖溶解，加入分子量为2000Da的双羧基聚乙二醇混合，加入催化剂NHS和EDC-HC1，室温搅拌24-48小时，使壳聚糖分子中的氨基和双羧基聚乙二醇分子中的羧基反应，过滤、纯水透析、冷冻干 燥得到聚乙二醇基壳聚糖； (2)将聚乙二醇基壳聚糖放入pH=6的磷酸盐缓冲液中使溶解，加入部分巯基化聚乙烯亚胺混合，加入催化剂NHS和EDC-HCl，室温搅拌反应24-48小时，使聚乙二醇基壳聚糖分子中的羧基与所述巯基化聚乙烯亚胺分子中的氨基反应，过滤、纯水透析、冷冻干燥得到含巯基壳聚糖衍生物；所述巯基化聚乙烯亚胺中的聚乙烯亚胺的分子量为600-800Da，所述NHS为N-羟基琥珀酰亚胺的缩写，所述EDC-HCl为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的缩写2.根据权利要求1所述的含巯基壳聚糖衍生物的制备方法，其特征是所述步骤(1)中所述壳聚糖的氨基的摩尔量、所述双羧基聚乙二醇的羧基的摩尔量、NHS的摩尔量和EDC-HCl 的摩尔量的比为 1 0.5-30.85-5.1 0.85-5.13.根据权利要求1所述的含巯基壳聚糖衍生物的制备方法，其特征是所述步骤(2)中所述聚乙二醇基壳聚糖的羧基的摩尔量、所述部分巯基化聚乙烯亚胺的摩尔量、NHS的摩尔量和EDC-HCl的摩尔量的比为10.5-31.71.74.根据权利要求1或3所述的含巯基壳聚糖衍生物的制备方法，其特征是所述部分巯基化聚乙烯亚胺用下述方法制成将分子量为600-800Da的聚乙烯亚胺放入甲醇或水中，加入巯基乙酸甲酯混合，在50-70°C，搅拌9-24小时，使所述聚乙烯亚胺的氨基与巯基乙酸甲酯的酯基反应，减压浓缩除去甲醇或水，加水溶解，用乙酸乙酯洗涤，水相减压浓缩得到巯基化聚乙烯亚胺，所述聚乙烯亚胺的摩尔量和巯基乙酸甲酯的摩尔量的比为15-105.权利要求1-4之一的方法制备的含巯基壳聚糖衍生物6.含巯基壳聚糖衍生物的复合物纳米粒子的制备方法，其特征是包括如下步骤 (1)将含氨基的抗肿瘤药物与含巯基壳聚糖衍生物溶解于二甲基亚砜或N，N-二甲基甲酰胺中，加入催化剂DCC和NHS，经氮气保护下室温反应24-48小时，使含巯基壳聚糖衍生物的羧基与含氨基的抗肿瘤药物的氨基反应，过滤、依次用二甲基亚砜透析和纯水透析、冷冻干燥得到含巯基的前药； (2)将含巯基的前药的水溶液与长径比为3.3-4.0的金纳米棒混合均匀，避光静置24-48小时，离心重悬，得到具有光热疗和化疗双重功能的复合物纳米粒子，所述NHS为N-羟基琥珀酰亚胺的缩写，所述DCC为二环己基碳二亚胺的缩写7.根据权利要求6所述的含巯基壳聚糖衍生物的复合物纳米粒子的制备方法，其特征是所述步骤(1)中含氨基的抗肿瘤药物的摩尔量、DCC的摩尔量和NHS的摩尔量的比为1228.根据权利要求6或7所述的含巯基壳聚糖衍生物的复合物纳米粒子的制备方法，其特征是所述含氨基的抗肿瘤药物为阿霉素、表阿霉素、柔红霉素或米托蒽醌9.根据权利要求6所述的含巯基壳聚糖衍生物的复合物纳米粒子的制备方法，其特征是所述步骤(2)中含巯基的前药的巯基的摩尔量与金纳米棒摩尔量的比为10000002-2510.权利要求6-9之一的方法制备的含巯基壳聚糖衍生物的复合物纳米粒子

[0001]本发明涉及一种含巯基壳聚糖衍生物及复合物纳米粒子及其制备方法

本发明公开了一种含巯基壳聚糖衍生物及复合物纳米粒子及制备方法，含巯基壳聚糖衍生物的制备步骤为（1）制备聚乙二醇基壳聚糖；（2）将聚乙二醇基壳聚糖加入部分巯基化聚乙烯亚胺混合，加入催化剂，反应，过滤、纯水透析、冷冻干燥得到含巯基壳聚糖衍生物；含巯基壳聚糖衍生物中含有丰富的活性基团，可广泛应用于药物载体，基因载体，杂化材料等生物医学领域。含巯基的抗肿瘤作用前药和金纳米棒通过Au-S键相结合，获得了具有光热疗和化疗双重功能的含巯基壳聚糖衍生物的复合物纳米粒子，由于强烈的化学键合作用，纳米粒子在高温或激光照射条件下均表现出良好的稳定性，不仅具有抗肿瘤药物的化疗作用，同时还具有光热消融肿瘤的作用。

含巯基壳聚糖衍生物及复合物纳米粒子及制备方法