小肠靶向吸收的壳聚糖衍生物、其制备方法及载药纳米粒的制作方法【技术领域】[0001]本发明涉及一种壳聚糖衍生物，具体涉及一种小肠靶向吸收的壳聚糖衍生物、其制备方法及其载药纳米粒。[0002]聚合物纳米粒是由天然或合成高分子材料制成的粒径在1nm~I μ m的固态胶体粒子(Singh R.et al., Experimental and Molecular Pathology, 2009, 86, 215-223)。口服纳米粒作为一种极具潜力的新兴给药技术，能提高患者的顺应性，解决许多制剂技术难题，如防止药物被胃肠道的酸和酶破坏，减少药物对胃肠道的刺激性，并可通过结构修饰达到定向释放的效果。然而，由于肠道上皮细胞的间隙紧密，使得纳米粒很难通过细胞间隙而被大量吸收。据文献报道(Win K.Y.et al.，B1materials, 2005，2713-2722)，不同尺寸的纳米粒有可能通过以下途径被肠道吸收:(I)细胞旁路吸收:粒径小于50nm的纳米粒穿越肠上皮细胞间隙而被吸收；(2)内吞入胞吸收:粒径为50~500nm的纳米粒被肠上皮细胞胞吞；[3]淋巴组织吸收:粒径为500~1μ m的纳米粒被肠淋巴滤泡集结(Peyer’ s patches)中的M细胞吸收。此外，纳米粒表面性质也是影响其被肠道吸收的重要因素。例如，疏水性强的纳米粒易被肠道吸收，因它易被生物粘膜粘附并且对M细胞有更强的亲和力。[0003]目前研究发现，壳聚糖及其衍生物的粘膜粘附性及本身带正电荷的氨基能与带负电荷的紧密联结及肠表面细胞相互作用，打开肠表面紧密联结，促进细胞旁路吸收(van der Lubben L.M.et al., European Journal of PharmaceuticalSciences, 2001, 14, 201-207)。脱氧胆酸((Deoxycholic acid)具有疏水和亲水性，能降低纳米粒与胃肠道黏液的表面张力，促使纳米粒被吸收入肠淋巴滤泡集结(Damge C.etal., Journal of Pharmacological Sciences, 1997, 86, 1403-1409)。维生素 B12 (VB12)可与肠道粘膜上的造血内因子能特异性结合，据Francis M.F.等报道(Francis M.F.et al.，B1macromolecules2005, 6, 2462-2467),将其偶联到葡聚糖-聚氧化乙烯石槽烷基醚纳米粒上，利用其对小肠的定位吸收机制可提高肠道对纳米粒的摄取。[0004]在现有技术中，偶联脱氧胆酸的壳聚糖衍生物已有见于报道，例如，周怀胜等在《两亲性壳聚糖衍生物负载及缓释醋酸曲安奈德的性能》中报道了以偶联脱氧胆酸的壳聚糖衍生物负载醋酸曲安奈德(周怀胜等，中国组织工程研究与临床康复，2010，14(29)，5371-5374)。但是，目前尚未见报道有相关偶联脱氧胆酸基团和VB12小肠靶向因子的壳聚糖衍生物及其制备成小肠靶向吸收纳米粒的技术。
[0005]为克服上述现有技术中的不足，本发明的目的在于提供一种偶联了脱氧胆酸和小肠靶向因子维生素B12的小肠靶向吸收的壳聚糖衍生物。
[0006]与此相应，本发明的另一目的在于提供一种制备偶联了脱氧胆酸和小肠靶向因子维生素B12的小肠靶向吸收的壳聚糖衍生物的方法。[0007]本发明还提供了一种上述壳聚糖衍生物的载药纳米粒，该载药纳米粒能实现小肠上皮细胞跨膜转运吸收，且其小肠上皮细胞跨膜转运吸收的性能较两亲性含脱氧胆酸的壳聚糖衍生物的载药纳米粒更好。
[0008]为实现上述目的，本发明提供的小肠靶向吸收的壳聚糖衍生物在壳聚糖上偶联了脱氧胆酸和维生素B12 ;其中，壳聚糖的重均分子量为50000~450000，脱乙酰度为70~98% ;脱氧胆酸的接枝率为3~15%，VB12的接枝率为5~15% ;
[0009]所述小肠靶向吸收的壳聚糖衍生物的结构式为:
[0010]