一种植物用杀虫菌的生产方法

刘家运, 柳顺方, 魏炳义, 王玉海, 李艳君, 李俊英, 张可瑛

1992年4月1日

1991年7月29日

1991年7月29日

商丘市医药化工厂

A01N63/04GK1059830SQ9110512

杀虫 植物 生产

1.一种植物用杀虫菌的生产方法，其特征在于由下列各道工序所构成1)选育菌种从死亡的鳞翅目虫体上取出脏液，接种于无菌的斜面培养基上，在31±1℃下经48小时，生成丰满的杀虫菌落2)制备种子液将杀虫菌落接种到装有60毫升培养基的500毫升瓶中，摇瓶在转速为150转/分的摇床上转动，经48～50小时，在31±1℃下，生成一级种子液3)大量增育种子液将由摇瓶制得的种子液，按0.1%重量比接种入已装有培养基的种子罐中，在罐内温度31±1℃，气压0.04MPa，空气流量为10.8V/V/分条件下，经18～24小时，罐内悬浮液基本澄清，大部分悬浮菌体运动缓慢，无杂菌，菌体浓度达1亿/毫升以上，即为二级种子液4)大量发酵生产将二级种子液按5%重量比通过管道接种于装有培养基的发酵罐内，在罐内温度为31±1℃，气压0.04MPa，空气流量为11V/V/分条件下，经24～30小时，使罐内菌体95%以上已形成孢子，菌体浓度达到1亿个/毫升5)吸附过滤将发酵液放入吸附池内，加入适量CaCO3吸附孢子，30分钟后，用真空转鼓抽滤机在0.2MPa压力下，使发酵液通过7号滤布抽滤，制得滤饼6)烘干将滤饼放入真空转鼓烘干机中升温达60℃，烘干4小时，制得含水量小于5%，菌体浓度达100亿/克以上的滤饼7)粉碎和包装将烘干后的滤饼，经高速粉碎机粉碎，使其粒径在120目以上，然后包装出厂

本发明涉及一种植物用杀虫菌的生产方法使用高效、无毒、无公害、无污染的杀虫剂以消除植物害虫，是人们长期以来的愿望，由美国俄亥俄州立大学Dean，D.H教授提供的苏云金芽孢杆菌以色列变种(Bacillus thuringiensis var.israelensis)即为具有这种性能的植物用杀虫菌，(见生物工程学报3(3)230-232，1987)该菌种自引进以来，国内已有厂家批量生产，但所得产品，有的是液体状态，其包装、运输、贮存都比较困难，有的虽为颗粒状态，质量还不够稳定，不能满足要求本发明的目的是要提供一种苏云金芽孢杆菌以色列变种的生产方法，使用这种方法批量培养的杀虫菌，其成品中活孢子数高，质量稳定，成本低，有效期长，便于包装、运输、贮存和使用本发明的目的是这样实现的将由死亡的鳞翅目虫体上取得的脏液，接种于空白的斜面上，在31±1℃温度下，经过48小时，苏云金芽孢杆菌以色列变种(以下简称杀虫菌)，生成丰满的菌落，再经过培养、繁殖，制成种子液后、发酵、吸附、过滤，再用真空转鼓烘干机烘干，粉碎，包装制出成品本发明方法有以下优点1.用本法生产的杀虫菌质量稳定可靠因采用真空转鼓烘干机，烘烤菌体时间短，菌种不会死亡，因而活孢子数达到100亿/克以上，增强了产品的杀虫力2.产品携带方便，容易保存因产品为干燥的灰白色粉末，故便于包装和携带;因产品水份控制在5%以内，又无营养源，使芽孢进入稳定地休眠状态，使保存时间可达2年3.产品成本低产品只为化学农药价格的20～50%，社会效益好本发明各步工序，由以下实施例说明1.选育菌种从死亡的鳞翅目虫体上取出脏液，接种于无菌的斜面培养基上，在31±1℃下经48小时，生成丰满的杀虫菌落2.制备种子液将杀虫菌落接种到装有60毫升培养基的500毫升瓶中，摇瓶在转速为150转/分的摇床上转动，经48～50小时，在31±1℃下，生成一级种子液3.大量增育种子液将由摇瓶制得的种子液，按0.1%重量比接种入已装有培养基的种子罐中，在罐内温度31±1℃，气压0.04MPa，空气流量为1∶0.8V/V/分条件下，经18～24小时，罐内悬浮液基本澄清，大部分悬浮菌体运动缓慢，无杂菌，菌体浓度达1亿/毫升以上，即为二级种子液4.大量发酵生产将二级种子液按5%重量比通过管道接种于装有培养基的发酵罐内，在罐内温度为31±1℃，气压0.04MPa，空气流量为1∶1V/V/分条件下，经24～30小时，使罐内菌体95%以上已形成孢子，菌体浓度达到1亿个/毫升5.吸附过滤将发酵液放入吸附池内，加入适量CaCO3吸附孢子，30分钟后，用真空转鼓抽滤机在0.2MPa压力下，使发酵液通过7号滤布抽滤，制得滤饼6.烘干将滤饼放入真空转鼓烘干机中升温达60℃，烘干4小时，制得含水量小于5%，菌体浓度达100亿/克以上的滤饼7.粉碎和包装将烘干后的滤饼，经高速粉碎机粉碎，使其粒径在120目以上，然后包装出厂