一种从锦灯笼茎和宿萼中提取甾体皂苷的方法[0002]锦灯笼alkekengi ),别名酸衆、挂灯笼、红姑娘等,为爺科酸衆属植物，果实为圆球形浆果为多年生宿根草本，其果实可以食用，是我国历史悠久的药食两用保健型水果。其历代本草中亦有收载。主产于东三省、河北、新疆、山东等地。锦灯笼的成分主要有留体类、留醇类、生物碱类、氨基酸类、挥发油类、多糖、无机元素等。药理研究表明锦灯笼具有抗炎、抗疟、抗癌、抗菌等很好的药理作用。根据皂苷元的基本结构，皂苷分为留体皂苷和三萜皂苷。锦灯笼中含有的皂苷主要为留体皂苷，研究表明薯蓣皂苷是异螺留烷醇型甾体皂苷，其具有祛痰、抗血小板聚集、降血脂、抗肿瘤等作用。另据文献报道，锦灯笼宿萼中的甾体皂苷与消渴丸类似都具有降糖作用。而与锦灯笼中的甾体皂苷结构类似的三萜皂苷，如人参皂苷Rgl能保护多巴胺神经元，可以降低脂质含量防治血管还能防止脑动脉粥样硬化，能抑制血管内皮基质金属蛋白酶的表达等作用。[0003]微波提取的原理主要是微波辐射传热的过程是高频电磁波穿过介质到达提取物内部细胞中，从而微波 的电磁场可加速提取物组分的分子扩散速率。由微波原理可以确定本发明方法可以提高提取效率，并且节省时间。以往锦灯笼留体皂苷的提取主要采用水浴回流提取工艺，该方法操作费时、繁琐，产品收率低，能耗大。
[0004]本发明的目的在于提供一种从锦灯笼茎和宿萼中提取留体皂苷的方法，该方法将干燥的锦灯笼茎和宿萼粉碎后，提取料液，制得浸膏，开发锦灯笼茎部药用和食用资源，同时，微波提取工艺可以明显减少提取时间、提高皂苷的收率。经本发明方法得到的锦灯笼茎和宿萼的留体皂苷经分离纯化可作为制备抗菌、祛痰、抗血小板聚集、降血脂、抗肿瘤等的药物或作为功能食品、保健品的原料使用。[0005]本发明的目的是通过以下技术方案实现的: 一种从锦灯笼茎和宿萼中提取留体皂苷的方法，所述方法包括如下过程: a.样品处理:
锦灯笼茎在100~105°C烘箱中烘干，用粉碎机粉碎成粉末状，过40~80目筛置后于干燥自封袋内封存待用；
b.微波法提取:
准确I~5g茎或0.1~0.5g宿萼粉末，量取乙醇浓度为60%~90%于250ml圆底烧瓶中，按照既定实验方案，提取I~5次，提取5min~15min，料液比1:10~1:40 ;在微波辐射功率380~680W条件下进行微波提取；提取完毕后，抽滤，旋蒸浓缩，移出制得浸膏，待用；C.标准曲线的建立:
称取薯蓣皂苷标准品于容量瓶中，以无水甲醇定容配成标准液，取标准液加入香草醛-高氯酸显色后进行波长扫描，测得最大波长；分别移取定量梯度稀释的标准液于具塞试管中，水浴挥干后，分别加入0.1~0.5ml, 2~5%香草醒-冰醋酸液,0.5~1.0ml高氯酸，65~70°C水浴，加热10~15min,冰水冷却；加入4.0~6.0ml冰醋酸静置10~30min,在最大波长处测定吸光度，以吸光度(A)为纵坐标Y，薯蓣皂苷的浓度C为横坐标X做标准曲线，并建立回归方程；
d.甾体皂苷的含量的测定:
采用香草醛-高氯酸法测量皂苷的含量:将旋蒸后的提取物定容至容量瓶中；移取定量上述溶液置于具塞试管中，水浴将溶剂挥干；然后加0.1~0.5ml，2~5%的香草醛-冰醋酸溶液和0.5~1.0ml高氯酸，密塞试管摇匀，置于65~70°C水浴中振荡加热l(Tl5min ；取出后立即用冰水冷却；加入4.0~6.0ml冰醋酸混匀，静置10~30min。在最大吸收波长处测量吸光度值；根据测量得到的吸光度值代入标准曲线的回归方程计算皂苷得率；
上述百分比均为体积百分比。

[0006]下面结合实施例，对本发明作进一步详述。
[0007]实施例1:
⑴锦灯笼茎在100~105°c烘箱中烘干，用粉碎机粉碎成粉末状，过40~80目筛置后于干燥自封袋内封存待用；
⑵标准曲线的建立:称取5~IOmg薯蓣皂苷于50ml容量瓶以无水甲醇定容配成
0.05~0.2mg/ml的标准液，取标准液加入香草醛-高氯酸显色后进行波长扫描，最大波长为500~560nm。分别移取300、400、500、1100、1300、1500ul于具塞试管中，水浴挥干后，分别加入0.1~0.5ml (2~5%)香草醛-冰醋酸液，0.5~1.0ml高氯酸，65~70°C水浴，加热10~15min,冰水冷却；加入4.0~6.0ml冰醋酸静置10~30min,在560nm处测定吸光度。以吸光度(A)为纵坐标Y，薯蓣皂苷的浓度C为横坐标X做标准曲线，并建立回归方程;
⑶准确称取三份I~5g锦灯笼茎粉末，分别以60~90%乙醇溶液、提取5~15min、提取I~5次、料液比1:10~1:40，在辐射功率380~680W条件下进行提取；
(4)提取完毕，抽滤，旋蒸浓缩，移出，制得浸膏，待用；
(5)用香草醛-高氯酸法测定留体皂苷含量，将旋蒸后的提取物定容至100mL容量瓶中；移取0.1ml置于IOml具塞试管中，60°C水浴将溶剂挥干；然后加入0.1~0.5ml (2~5%)香草醛-冰醋酸液，0.5~1.0ml高氯酸，65~70°C水浴，加热10~15min，冰水冷却；加入4.0~6.0ml冰醋酸静置10~30min，在最大吸收波长处测量吸光度值。根据测量得到的吸光度值代入标准曲线的回归方程。通过计算茎的甾体皂苷收率大于5.0%。
[0008]实施例2:
⑴锦灯笼宿萼在100~105°c烘箱中烘干，用粉碎机粉碎成粉末状，过40~80目筛置后于干燥自封袋内封存待用；
⑵标准曲线的建立:与实施例1中⑵相同。[0009](3)准确称取三份0.1~0.5g锦灯笼宿萼粉末，分别以60~90%乙醇溶液、提取5~15min、提取I~5次、料液比1:10~1:40，在辐射功率380~680W条件下进行提取；
(4)提取完毕，抽滤，旋蒸浓缩，移出，制得浸膏，待用；
(5)用香草醛-高氯酸法测定留体皂苷含量，将旋蒸后的提取物定容至100mL容量瓶中；移取0.1ml置于10ml具塞试管中，60°C水浴将溶剂挥干；然后加入0.1~0.5ml (2~5%)香草醛-冰醋酸液，0.5~1.0ml高氯酸，65~70°C水浴，加热10~15min，冰水冷却；加入4.0~6.0ml冰醋酸静置10~30min，在最大吸收波长处测量吸光度值。根据测量得到的吸光度值代入标准曲线的回归方程。通过计算宿萼中甾体皂苷收率大于8.0%。