专利名称：一种鱼金眼用即型凝胶及其制备方法细菌性结膜炎、角膜炎和病毒性角结膜炎是临床眼科的常见病、多发病， 其发病率高，治疗时间长，且多为混合感染。但目前，临床上用于治疗眼疾的 药品多为化药，功能单一，抗菌的不具有抗病毒功能，而抗病毒的又不具有抗 菌作用，而临床上的感染往往是混合感染，即在病毒感染的同时，夹杂着细菌 感染，这给治疗带来了诸多不便。滴眼剂在眼内滞留时间短，消除快，存在眼 部药物生物利用度低的问题。眼膏剂中的基质因其透明度和折光率的因素可造 成视野模糊或眼部异物感。因此，眼科用药需要开发新型的给药系统。一般认为，最佳的眼用制剂是滴眼剂，因为不会引起糊视和刺激，且具有 价格低，病人易于接受，容易配制等优点，故应用广泛。但滴眼液需调等渗、等张和抑菌而需加缓冲液、抑菌剂，并且滴眼液用药后生物利用度低，95%的活 性药物会流失，与眼泪混合使药物浓度降低以及随眼泪流到鼻腔经泪液冲刷或 从鼻泪管流失，药效维持短；给药频繁， 一般药典规定给药3次 4次/d，但实 际临床应用时可多达10次 20次/d，从而造成诸多的副作用。眼用即型凝胶不同于传统的亲水凝胶，它根据体内外不同的生理环境(温 度、离子、pH)发生相转化，体外以液体形式存在，滴入眼内立刻转为凝胶。在 贮存期间呈液态，滴入眼内后呈半固体状态，不仅可解决普通滴眼剂眼内滞留 时间短、生物利用度不高的问题，也克服了普通眼用凝胶铺展性不好、剂量不易控制的问题，具有较好的市场前景。眼用即型凝胶(in Situ Forming Eye Gel)作为一种新型眼用制剂，文献 上也称为原位胶化滴眼剂。热敏型眼用即型凝胶是一种环境敏感型凝胶，其在 室温下为溶液状态，在体温环境下能够发生相转变，形成非化学交联型半固体 凝胶，又称温度敏感型眼用即型凝胶。这种凝胶除具有常规凝胶的特点如生物 相容性好、可延长药物在眼部的作用时间外，还克服了普通眼用凝胶用药剂量 不准的缺点。鱼腥草为常用传统中药，系三白草科植物蕺菜的新鲜全草或干燥地上部分， 具有清热解毒、消痈排脓、利尿通淋之功效。主治肺痈吐脓、痰热喘咳、热痢、 热淋、痈肿疮毒等症。鱼腥草主要含有挥发油，其主要化学成分为挥发油类成 分，包括鱼腥草素、月桂烯、甲基正壬酮等，药理学研究证明其具有抗病原微 生物、增强机体免疫功能、抗炎、镇痛、抗过敏等多重活性，临床上应用广泛。金银花为忍冬科植物忍冬、红腺忍冬、山银花或毛花柱忍冬的干燥花蕾或 带初开的花，性甘、寒，归肺、心、胃经，主要含有多种绿原酸类化合物，具 有清热解毒，凉散风热的功效，用于痈肿疔疮，喉痹，丹毒，热毒血痢，风热 感冒，温病发热。以鱼腥草和金银花为原料组方上市的药物现只有鱼金注射液，虽然也有文 献报道用鱼腥草和金银花组方制成鱼金滴眼液，但滴眼液存在生物利用度低、 药效维持时间短等缺点，因此开发新的鱼金眼用新制剂将会具有很好的社会与 经济效益。


本发明的目的在于提供一种生物利用度高、剂量准确，同时具有抗菌、抗 病毒作用的热敏型眼用即型凝胶剂。本发明同时还公开了以鱼腥草和金银花为原料的眼用即型凝胶的制备方法。
本发明的热敏型眼用即型凝胶剂由鱼腥草提取物和金银花提取物为主要药 效组分，具体说是以鱼腥草挥发油和金银花总有机酸为主要药效组分，其中金 银花总有机酸的含量以绿原酸计不低于50%。
本发明对鱼腥草挥发油采用环糊精包合，解决了挥发油水溶性不好难以真 正溶入水溶性凝胶中的困难，从而使药物能更好地发挥药效。
本发明可通过以下技术方案实现
1、 金银花总有机酸提取物的制备
取金银花药材用热水浸提提取2-3次，提取液滤过、合并，减压回收，加水 稀释至药液与生药量之比为l: 1，高速离心，离心液加至已处理好的大孔吸附
树脂上，先用l-3倍柱体积的水洗，再以30%-70%的乙醇水溶液洗脱，收集3-5倍 30%_70%的乙醇洗脱液，减压蒸干，得金银花总机酸类有效部位提取物；
2、 鱼腥草挥发油
鱼腥草挥发油采可采用常规的水蒸气蒸馏法提取，也可采用二氧化碳超临 界流体萃取法进行提取。
取规定重量份的鱼腥草药材，适当切碎，加5-8倍量的水，水蒸气蒸馏法 加热提取挥发油4-6小时，得鱼腥草挥发油。
或者取规定重量份的鱼腥草药材，酌予碎断，加入至超临界萃取釜中， 提取4-6小时，得鱼腥草挥发油。
鱼腥草挥发油环糊精包合物的制备
取p-环糊精，加入蒸馏水制成饱和溶液，在4(TC慢慢加入用乙醇溶解的鱼腥草挥发油，环糊精与挥发油的用量宜控制在6-8: 1 (g: ml)，恒温搅拌2
小时，置于冰箱冷藏室过夜，抽滤，4(TC以下干燥，即得粉末状鱼腥草挥发油
包合物。
鱼腥草挥发油既可以适当溶剂溶解入药，也可以以环糊精包合物投料入药。
3、热敏型凝胶的制备
取鱼腥草挥发油环糊精包合物、金银花总有机酸提取物，以蒸馏水溶解， 称取泊洛沙姆407适量，加入至上述溶液中，再加入适量水，调节pH值至6. 0-7. 0 搅拌使其分散均匀，4X:冷藏24h，得到澄明溶液，过0.22ym的微孔滤膜，分装， 灭菌，即得。
下面通过实验例对本发明作进一步的说明。
试验例一 本发明的鱼金眼用即型凝胶与市售鱼金注射液体外抑制病毒比较试 验
实验用材料与试剂
药品鱼金眼用即型凝胶，自制；鱼金注射液(三九万荣药业有限责任公司) 实验用病毒副流感病毒l、 2、 3、 4型；单纯疱疹病毒(HSV);腺病毒3、 7、 11、 21型；流感病毒l， 2， 3型，均取自中国医学科学院病毒研究所，按常法 传代和滴定，TCD5。按常法测定病毒的血凝滴度。
方法鱼金眼用即型凝胶与注射剂均用细胞维持液配成0.5%的浓度，然后与等 量IOO TCD5。病毒液混合，37"C作用1小时后，加至细胞单层，37t:吸附l小时 后换维持液。每次实验均设病毒、正常细胞对照，37"C温育，观察7天，再测 病毒滴度。用药组与病毒对照组滴度相比，大于等于4倍，判定为有抑制病毒 作用。结果见下表l。表l鱼金眼用即型凝胶、鱼金注射液体外抑制病毒结果分组HSV 副流感病毒流感病毒月泉病毒
123 41 2 33711 21
鱼金眼用即型凝胶+ +++ +— + ——+ — —
鱼金注射液+ +++ +— + ——+ — 一
注+为有抑制作用，-为无抑制作用
试验说明，本发明的眼用即型凝胶具有较好的体外抗病毒作用。
试验例二本发明的鱼金眼用即型凝胶与市售鱼金注射液体外抑菌作用试验。 材料实验用细菌，粘质沙雷氏菌，麦氏弧菌，金黄色葡萄球菌、人肠埃希菌， 肺炎双球菌。
方法和结果将菌株分别增菌16-24h，用比浊法进行细菌计数，实验用含菌浓 度为lX109/ml，用白金耳接种肉汤培养基同时接种固体培养，16-24h判定结果， 实验结果见下表2。
_表l鱼金眼用即型凝胶、鱼金注射液体外抑菌试验结果_
鱼金眼用即型凝胶 鱼金注射剂
菌株 体外浓度 体外浓度
2.5%5%2.5%5%
粘质沙雷氏菌++++
麦氏弧菌一+—+
金黄色葡萄球菌一+—+
大肠埃希菌+++
肺炎双球菌++++
试验说明，本发明的鱼金眼用即型凝胶具有较好的体外抗菌作用。
具体实施例实施例1
处方鱼腥草4000g 金银花2000g
取鱼腥草药材，加入8倍量的蒸馏水，润湿后，水蒸汽蒸馏提取挥发油5小 时，取挥发油液备用；取0-环糊精，加蒸馏水制成饱和溶液，在4(TC慢慢加入 用乙醇溶解的鱼腥草挥发油，环糊精与挥发油的用量控制在6: 1 (g: ml)，恒 温搅拌2小时，置于冰箱冷藏室过夜，抽滤，4(TC以下干燥，鱼腥草挥发油包合 物。
取金银花药材，加8倍量热水湿润，8(TC浸提2次，滤过，滤液合并，减 压浓縮，使药液体积与药材重量为1: 1 (ml:g)，高速离心，加入到已处理好的 大孔吸附树脂上，先用水冲洗，再用40%的乙醇冲洗，收集40%的乙醇洗脱液， 减压回收乙醇，减压浓缩至干，即得金银花总有机酸提取物。
取鱼腥草挥发油环糊精包合物及金银花总有机酸提取物，加入蒸馏水使溶 解，将二者混合均匀，加入适量蒸馏水，称取泊洛沙姆407共200g，加入溶液 中，搅拌使分散均匀，4。C冷藏24h，得澄明溶液，加注射用水至1000ml，调节 pH至7.0，过0.22iim的微孔滤膜，分装，即得。
实施例2
处方鱼腥草4000g 金银花2000g
取鱼腥草药材，加入12倍量的蒸馏水，润湿后，水蒸汽蒸馏提取挥发油5 小时，取挥发油液备用；取金银花药材，加10倍量热水湿润，9CTC浸提2次， 滤过，滤液合并，减压浓縮，使药液体积与药材重量为1: 1 (ml:g)，高速离心， 加入到已处理好的大孔吸附树脂AB-8上，先用水冲洗，再用40%的乙醇冲洗， 收集40%的乙醇洗脱液，减压回收乙醇，减压浓縮至干，即得金银花总有机酸 提取物。
9取鱼腥草挥发油，用适量丙二醇溶解，再取金银花总有机酸，以蒸馏水溶
解，混合均匀，称取泊洛沙姆188共180g，加入溶液中，搅拌使分散均匀，4 。C冷藏24h，得澄明溶液，加注射用水至1000ml，调节pH至6.0，过0.22ym
的微孔滤膜，分装，即得。


本发明涉及一种治疗眼部细菌或病毒感染的温度敏感型眼用即型凝胶及其制备方法。本发明的眼用即型凝胶主要以鱼腥草挥发油和金银花总有机酸为有效组份制备而成，同时本发明还公开了该制剂的制备方法。本发明将鱼腥草和金银花经提取、富集纯化，使有效成分含量更高，结合新的眼用即型凝胶剂型，使药物不仅剂量准确、使用方便，而且生物利用度得到提高，药效持久。