一种果聚糖提取物在制备治疗脂肪肝的药物、食品或保健品中的应用的制作方法[0002]果聚糖是一类有利于人体健康的碳水化合物，是多个葡萄糖分子通过β -糖甘键连接而成。由于人体中不含有能分解果聚糖的酶，因此不能消化吸收果聚糖，但果聚糖进入结肠后可以成为肠胃菌的营养物质。人体食用含果聚糖的食物，可以选择性地促进双歧杆菌的生长，减少与肿瘤发生有关的物质产生，此外短链的果聚糖可以作为一种低热量的甜味成分。因此，果聚糖是一类有益于人类健康的可溶性碳水化合物。[0003]脂肪肝，是指由于各种原因引起的肝细胞内脂肪堆积过多的病变。脂肪性肝病正严重威胁国人的健康，成为仅次于病毒性肝炎的第二大肝病，已被公认为隐蔽性肝硬化的常见原因。肝内脂肪堆积的程度与体重成正比。约30%~50%的肥胖症合并脂肪肝，重度肥胖者脂肪肝病变率高达61%~94%。肥胖人体重得到控制后，其脂肪浸润亦减少或消失。糖尿病患者中约50%可发生脂肪肝，其中以成年病人为多。因为成年后患糖尿病人有50%~80%是肥胖者，其血浆胰岛素水平与血浆脂肪酸增高，脂肪肝病既与肥胖程度有关，又与进食脂肪或糖过多有关。[0004]研究发现果聚糖具有增强免疫力、抗辐射、调节血脂，辅助治疗肿瘤等活性，但普通食物中果聚糖的含量一般较低，只有在菊芋、麦冬等少数几种植物中的含量很高。然而，目前从麦冬中制备果聚糖的制备方法存在耗时多、成本高，无法适应工业化生产等缺陷，无法进行大量制备。同时，现有技术中针对特定分子量范围的果聚糖提取物活性的研究也鲜见报道。[0005] 申请人:于2012年9月7日申请的“一种果聚糖提取物及其制备方法和用途”的发明专利申请(专利申请号=201210330656.0)，其中记载了一种果聚糖提取物，其制备方法包括下列步骤:取干燥的浙麦冬块根，用2-10倍重量70% -100%乙醇回流提取1-3次，提取液弃之；药渣用4-12倍量水提1-3次，合并水提液，水提液减压浓缩至0.5-1.0g/ml ;水提浓缩液加入1-3倍体积70% -95%乙醇沉淀，静置，离心去除沉淀；上清液再加入2-6倍体积85% -95%乙醇沉淀，静置过夜，收集所得的沉淀，干燥，即为分子量在2000-10000范围的果聚糖提取物。该专利申请还记载了该果聚糖提取物在制备具有减肥功能的药物、食品或保健品中的应用。
[0006]针对现有技术的上述不足，本发明所要解决的技术问题是提出一种果聚糖提取物的新用途。[0007]为了解决上述技术问题，本发明提出的一种果聚糖提取物在制备治疗脂肪肝的药物、食品或保健品中的应用，该果聚糖提取物的分子量范围在2000-10000，且采用如下方法制得:取干燥的浙麦冬块根，用2-10倍重量70% -100%乙醇回流提取1-3次，提取液弃之；药渣用4-12倍量水提1-3次，合并水提液，水提液减压浓缩至0.5-1.0g/ml ;水提浓缩液加入1-3倍体积70% -95%乙醇沉淀，静置，离心去除沉淀；上清液再加入2-6倍体积85% -95%乙醇沉淀，静置过夜，收集所得的沉淀，干燥，即为分子量在2000-10000范围的果聚糖提取物。所述果聚糖提取物的制备方法优选为:取干燥的浙麦冬块根，用3倍重量90%乙醇回流提取2次，提取液弃之；药渣用10倍量水提2次，合并水提液，水提液减压浓缩至1.0g/ml ;水提浓缩液加入2倍体积95%乙醇沉淀，静置，离心去除沉淀；上清液再加入3倍体积95%乙醇沉淀，静置过夜，收集所得的沉淀，干燥，即为分子量在2000-10000范围的果聚糖提取物。
[0008]本发明米用的原料药为浙麦冬，浙麦冬:又名杭麦冬、笕麦冬。为产于浙江杭州笕桥一带者，后泛指产于浙江者。品质最优，为地道药材。主产于浙江余姚、杭州、慈溪、萧山等地。性味功能:甘、微苦、凉、滋阴生津、润肺止咳、清心除烦。主治热病伤津、心烦、口渴、咽干肺热、咳嗽、肺结核。浙麦冬在5-6月初栽植，于栽培后第三年小满至夏至采挖。浙麦冬中主要成分为多糖、皂苷、高异黄酮等。其中，多年生的浙麦冬根块中总多糖含量明显高于一年生的川麦冬。
[0009]作为具有治疗脂肪肝功能的食品添加剂、保健品，本发明果聚糖提取物可加入到饮用水、食品、饮料、酒类、调味品、乳制品、食用油脂、面制食品等饮食品中，发挥治疗脂肪肝的功效。
[0010]作为具有治疗脂肪肝功能的保健品或药物，本发明果聚糖提取物可制成各种形式的口服制剂包括片剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液等。所述的口服制剂优选由重量百分比为5%-99%的果聚糖提取物和95%_1%的药用辅料或附加剂组成。
[0011]本发明具有以下有益效果:经过药效学研究发现，本发明的果聚糖提取物可以明显减轻膳食诱导肥胖小鼠模型肝脏脂肪变性，减少肝细胞中脂肪空泡的数量。以上结果表明，本发明的果聚糖提取物具有显著的治疗脂肪肝的作用。



[0012]图1是本发明试验例I中各组腹型肥胖小鼠肝脏组织病理学示意图；其中，图1中的V代表模型对照组，图1中的H代表果聚糖提取物300mg/kg组，图1中的L代表果聚糖提取物75mg/kg组，图1中的M代表果聚糖提取物150mg/kg组。

[0013]下面结合实施例和比较例对本发明作进一步描述:
[0014]实施例1 (果聚糖提取物的制备)
[0015]取干燥的浙江产麦冬(浙麦冬)块根20kg，用3倍重量90%乙醇回流提取2次，提取液弃之；药渣用10倍量水提2次，合并水提液，水提液减压浓缩至1.0g/ml ;水提浓缩液加入2倍体积95%乙醇沉淀，静置，离心去除沉淀；上清液再加入3倍体积95%乙醇沉淀，静置过夜，收集所得的沉淀，干燥，即为分子量在2000-10000范围的果聚糖提取物。得果聚糖提取物3.06kg，得率为:15.3%。结构鉴定为果聚糖。
[0016]实施例2 (果聚糖提取物的制备)[0017]取干燥的浙江产麦冬(浙麦冬)块根20kg，用10倍重量70%乙醇回流提取3次，提取液弃之；药渣用12倍量水提I次，合并水提液，水提液减压浓缩至0.8g/ml ;水提浓缩液加入3倍体积70%乙醇沉淀，静置，离心去除沉淀；上清液再加入6倍体积85%乙醇沉淀，静置过夜，收集所得的沉淀，干燥，即为分子量在2000-10000范围的果聚糖提取物。得果聚糖提取物2.13kg，得率为:10.6%。结构鉴定为果聚糖。
[0018]实施例3 (果聚糖提取物的制备)
[0019]取干燥的浙江产麦冬(浙麦冬)块根20kg，用2倍重量100%乙醇回流提取I次，提取液弃之；药渣用4倍量水提3次，合并水提液，水提液减压浓缩至0.5g/ml ;水提浓缩液加入I倍体积90%乙醇沉淀，静置，离心去除沉淀；上清液再加入2倍体积90 %乙醇沉淀，静置过夜，收集所得的沉淀，干燥，即为分子量在2000-10000范围的果聚糖提取物。得果聚糖提取物2.01kg，得率为:10.0%。结构鉴定为果聚糖。
[0020]从实施例1-3可知，实施例1的果聚糖提取物的得率最高，因此实施例1为优选的实施例。
[0021]实施例4含果聚糖提 取物的片剂的制备
[0022]处方(1000片):
[0023]果聚糖提取物 800g (按实施例1制得)
[0024]微粉硅胶4g
[0025]硬脂酸镁4g
[0026]按处方量将果聚糖提取物加入硬脂酸镁混匀，制成颗粒，加入微粉硅胶，混匀，压片，1000片(每片含果聚糖提取物0.Sg)。成人推荐口服用量1-4片/次，每日1-3次。
[0027]实施例5含果聚糖提取物的胶囊剂的制备
[0028]处方(1000粒):
[0029]果聚糖提取物 200g (按实施例1制得)
[0030]微晶纤维素196g
[0031]硬脂酸镁4g
[0032]按处方量将果聚糖提取物加入微晶纤维素、硬脂酸镁混匀，制成颗粒，装胶囊，1000粒(每粒含果聚糖提取物0.2g)。成人推荐口服用量1-6粒/次，每日2-4次。
[0033]实施例6含果聚糖提取物的颗粒剂的制备
[0034]处方(1000袋):
[0035]
果聚糖提取物 2000g (按实施例1制得)
微晶纤维素 800 g
乳糖200 g
硬脂酸镁30 g
[0036]按处方量将果聚糖提取物加入微晶纤维素、微粉硅胶、硬脂酸、乳糖混匀，制成颗粒，装袋，1000袋(每袋含果聚糖提取物2.0g)。成人推荐口服用量1-2袋/次，每日1-3次。
[0037]实施例7含果聚糖提取物的饮料的制备[0038]配方(1000瓶):
[0039]
果聚糠提取物3000 g (按实施例1制得)
香料50 g
甜味剂50g
饮料50000mL
[0040]按配方量将果聚糖提取物加至50000mL饮料中，制成1000瓶。
[0041]实施例8含果聚糖提取物的饼干的制备
[0042]配方(100盒):
[0043]
果聚糖提取物 500 g (按实施例1制得)
黄油2000 g
麵u
低精粉4500 g
奶粉1000g
发酵粉75 g
[0044]
[0045]按配方量将发酵粉撒在温水中,搅拌使之溶化,加低精粉一起搅拌,再加其他原料(果聚糖提取物、黄油、鸡蛋、奶粉)搅匀，揉成光滑的面团。切成薄片，放温暖处(38°C左右)发酵10分钟，烤培，装盒。
[0046]对比例I (麦冬多糖MDG-1的实验室制备方法与本发明方法对比)
[0047]比较例1:麦冬多糖MDG-1的实验室制备方法见中国专利CN1445244A说明书第13-14页实施例1部分，包括如下步骤:
[0048]1.麦冬多糖的提取
[0049]取干燥麦冬块根1kg，5—6倍量80%乙醇回流3次，每次I小时，药渣水提2_3次，每次30分钟。水提液减压浓缩至lg/ml，加入95%乙醇至含醇量达70%，静置过夜，倾去上清液，沉淀重复醇沉I次，冷冻干燥，得淡黄色麦冬多糖粉末。
[0050]2.麦冬多糖的超滤分离
[0051]麦冬总多糖，稀释15倍，10000分子量膜超滤，压力为3.5大气压，超滤液70°C浓缩后，冷冻干燥。
[0052]3.麦冬多糖的纯化
[0053]取麦冬多糖2g，少量水溶解，上DEAE SepharoseFF柱，水、0.l_4mol Nacl梯度洗脱，蒽酮-硫酸法在线检测，收集水洗部分峰位，冷冻干燥后，水溶解上SephadeXG50柱，水洗脱，合并峰位，冷冻干燥，再上SephadeXG25柱，水洗脱，合并峰位，冷冻干燥，得到白色粉末。
[0054]将本发明的实施例1-3和上述比较例I相比较，比较例I中麦冬多糖的纯化需经 DEAE SepharoseFF 柱、SephadexG50 柱、SephadexG25 柱等三个分离步骤；另外，DEAESepharoseFF柱、SephadexG50柱和SephadexG25柱均米用进口填料，成本极高，且无法适应工业化生产。而本发明的实施例1-3中果聚糖提取物制备方法首先通过乙醇提取去除部分杂质，水提后有利用分级沉淀的方法进行纯化，工艺过程大大简化，成本大大降低，所需时间大大缩短，满足了工业化生产的需求(比较结果见表1)。
[0055]表1
[0056]