专利名称：用于预防或治疗肾炎的含有药草提取物的药物组合物的制作方法肾是行使多种功能的器官，是代表性的排泄器官之一。肾不仅作为排泄器官，调控体液量、排泄废物和调节电解质含量，而且作为内分泌器官，分泌激素例如促红细胞生成素 (用于红细胞产生)和凝乳酶(用于血压控制)并且调节维生素D3的代谢以调节甲状旁腺功能和钙代谢。而且，肾还作为代谢器官，破坏肽激素、重吸收低分子量蛋白和调控葡萄糖/ 脂代谢。肾病的实例为肾炎、肾衰竭、肾癌等，其中肾炎是最典型的肾病。当肾炎患者持续患有肾炎时，由于肾功能的丧失而导致慢性肾衰竭或高血压等疾病，也导致其他器官的破坏、 代谢异常等并发症。肾功能的丧失不引人注意，直至70%或更多的肾功能丧失。如果肾衰竭一直未引起注意而未得到合适的治疗，那么透析或肾移植是对所述患者的仅有的治疗手段。在韩国，进行透析的患者数量每年增加4，000到5，000,肾移植患者的人数也在增加。 在肾移植完成之前需要连续进行透析，这对患者造成极大的痛苦或经济负担。对于肾移植， 缺少肾捐献者导致长时间的等待，甚至引起涉及器官交易的社会问题。对于在70%的肾炎患者中发现的免疫复合体介导的肾炎，体内/外的抗原与体内产生的抗体结合以形成抗原-抗体复合体，其沉积在肾小球基底膜和肾小球膜细胞内，引起炎症而导致肾小球的破坏。对于类似的免疫反应引起的抗肾小球基底膜抗体肾炎的情况，体内形成的抗肾小球基底膜抗体沉积在肾小球基底膜而导致急性炎症，并5%的肾炎患者属于这种情况。尿道、膀胱等泌尿器官被其他链球菌等病原菌或病毒所感染，由此病原进入肾以引起肾炎。肾炎的药物包括免疫抑制药物、抗炎药物、高血压/血管作用药物、抗生素等。免疫抑制药物抑制促使肾炎发生的抗体的形成，从而抑制抗原-抗体复合体在肾小球的沉积，由此改善肾炎的症状；抗炎药物抑制炎症的发生从而改善肾炎症状。用作高血压/血管作用药物的血管紧张素II拮抗剂加快基底膜的产生以激活肾功能，所述基底膜是作为肾小球过滤器的血管细胞壁。对于感染引起的肾炎，喹诺酮类抗生素用于杀死引起肾炎的病原细菌。肾炎患者大部分患有自免疫肾小球性肾炎，其主要用免疫抑制药物、抗炎药物和高血压/血管作用药物治疗。感染引起的肾盂肾炎用喹诺酮类抗生素治疗。用于肾炎的免疫抑制药物的实例包括他克莫司(tacrolimus)、依库珠单抗(eculizumab)、麦考酚酸莫酯(mycophenolate mofetil)、环孢霉素A(cyclosporine A)等。所述抗免疫药物的实例包括地塞米松(dexamethasone)、泼尼松龙(prednisolone)等。用于肾小球性肾炎的高血压/血管作用药物为例如具有抗肿瘤活性的坎地沙坦(candesartan)、利妥昔单抗 (Iituximab)和阿巴西普(abatac印t)。另外，用于肾盂肾炎的代表性药物为基于喹啉的左氧氟沙星(levofloxacin)和加替沙星(gatifloxacin)。韩国以外的其他国家的肾炎患者大部分用免疫抑制药物，特别是占高市场占有率的他克莫司(tacrolimus)、麦考酚酸莫酯 (mycophenolate mofetil)或依库珠单抗(eculizumab)等。但在韩国，抗生素是最常用的用于肾炎的药物，近年来也在增加用于肾炎的免疫抑制药物的使用。然而，免疫抑制药物或抗生素的长期使用导致包括溃疡、浮肿、感染加重、高血压、 肝性毒血病等的副作用。因此，需要开发副作用比现有的用于肾炎的药物的小、并且安全性有保证的用于肾炎的新药。为此原因，最近已开发了使用天然物质的用于肾炎的新药。
发明要解决的课题在开发用于预防和治疗肾炎的组合物的尝试中，本发明的发明人发现至少一种选自山楂提取物、肉桂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物的药草提取物对肾炎具有预防性和治疗性作用，从而完成本发明。本发明的一个实施方案提供用于预防和/或治疗肾炎的组合物，所述组合物含有至少一种选自山楂提取物、肉桂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物的药草提取物作为有效成分。本发明的另一实施方案提供用于预防和/或治疗肾炎的方法，所述方法包括对需要预防和/或治疗肾炎的患者给予治疗有效量的至少一种选自山楂提取物、肉桂提取物、 夏枯草提取物和木贼提取物的药草提取物。本发明的另一实施方案提供至少一种选自山楂提取物、肉桂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物的药草提取物用于预防和/或治疗肾炎的用途。解决课题的方法本发明的发明人发现至少一种选自山楂提取物、肉桂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物的药草提取物对庆大霉素诱导的或顺钼诱导的肾炎模型具有良好的治疗效果并且对肾的肾小球膜细胞的生长具有优秀的抑制效应，从而完成本发明。因此，本发明的特征在于组合物用于预防和治疗肾炎的用途，所述组合物含有至少一种选自山楂提取物、肉桂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物的药草提取物作为有效成分。下文将对本发明做如下进一步详述。首先，依照本发明的一个实施方案，提供用于预防和/或治疗肾炎的组合物，所述组合物含有至少一种选自山楂提取物、肉桂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物的药草提取物作为有效成分。在本发明的另一实施方案中，提供用于预防和/或治疗肾炎的方法，所述方法包括对需要预防和/或治疗肾炎的患者给予治疗有效量的至少一种选自山楂提取物、肉桂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物的药草提取物。在本发明的另一实施方案中， 提供至少一种选自山楂提取物、肉桂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物的药草提取物用于预防和/或治疗肾炎的用途，或在制备用于预防和/或治疗肾炎的组合物中的用途。山楂(Crataegi Fructus)是蔷薇科(Rosaceae)山楂树(Crataegus pinnatifida)及其同属物种的果实，在英语中通常称为“Hawthorn”。在高地生长、具有灰色树皮和有刺枝条、高度为3-6米。树叶近似蛋形，在茎上按互生叶序排列，长6-8cm，宽 5-6cm。叶缘以羽毛状裂开，在基部划分得更深。树叶在两侧的中脉上都有毛，并且边缘呈不规则的锯齿状，叶柄长2-6cm。已知山楂具有例如血管舒张、降低血压、抗微生物作用、抗氧化等药效。肉桂(Cinnamomi Cortex)是樟禾斗(Lauraceae)肉桂(Cinnamomum cassia)及其同属物种的树皮。肉桂树为观赏树，高度为8m以上，枝叶茂盛，树枝呈绿色，花色为浅绿色， 花萼分成短的6个萼片而排列成两行。已知此药草具有例如血管舒张、加快血液循环、刺激胃活动、消除疼痛、抗氧化等治疗作用。作为药草，其已被用于治疗头痛、发热、神经性心悸、 剧痛、感冒等。韩国专利申请公开2006-0030535(2006年4月11日提交)公开了一种具有抗焦虑活性的肉桂提取物以及含有所述提取物的组合物，其中所述肉桂提取物被报告作为用于预防和治疗由脑神经系统病变引起的焦虑的医疗产品或保健食品使用。夏枯草(PrnellaSpica)是唇形科(Labiatae)夏枯草(Prunella vulgaris)及其同属物种的多年生草本。此药草全身被白毛覆盖，高度为20-30cm，茎呈方形。在花落后开始生出枝条，叶一直生长至约2-5cm长，叶缘是光滑的或略微为锯齿形。在夏天，将半枯萎的草切断并在阳光下干燥而使用、是无毒药草。已知此药草具有例如利尿作用、抗微生物作用、降低血压、抗肿瘤、抗氧化等治疗效果。作为药草，其已被用于治疗慢性脓肿、痂病、急性乳腺炎、结核性淋巴结炎等。其还已被用于破坏下腹中由液体阻滞或血块引起的肿块、治疗脚气和治疗麻木和麻刺。木贼(Equiseti Herba)是木贼科(Equisetaceae)木贼(Equisetum hiemale)及其同属物种的多年生草。此草高度为20cm以上，并具有短的地面匍匐的根茎，根节点长出长的深褐色根。其茎刚硬且圆，直径为4-8cm，在节点之间具有10-20条线，并且直立而无枝条。此草外表面呈灰绿或黄绿色，具有8-30个竖向槽，组织松软，重量很轻。已知其具有例如利尿作用、抗氧化等治疗效果。作为药草，其已被用于治疗头痛、发热、肠出血和止血剂。然而，山楂、肉桂、夏枯草和木贼的药草提取物各自对肾炎的预防和/或治疗效果尚未弄清。本文使用的术语“提取物”是包括性地指选自山楂、肉桂、夏枯草和木贼中的至少一种的提取物，以及通过常规方法经浓缩和/或干燥该提取物获得的浓缩物和/或干燥产物。当所述提取物为至少两种选自山楂、肉桂、夏枯草和木贼的药草的提取物时，可以是通过用相同或相互不同的溶剂提取至少两种所述药草、并混合所得提取物而获得的“药草提取物的混合物”，或通过混合至少两种所述药草并提取所述药草混合物而获得的“药草混合物的提取物”。从下面的实验实施例1可看出，药草提取物的混合物和药草混合物的提取物均对肾炎表现出良好的预防和/或治疗效果而无任何显著差异，因此可纳入本发明的范围。本发明界定的提取物优选地通过用水、直链或支链C1-C6醇、直链或支链C1-C6醇的水溶液或其混合物提取而制备。用于提取的溶剂可为10-90% (ν/ν)、优选10-70% (ν/ ν)、更优选50-70% (ν/ν)的直链或支链C1-C6醇的水溶液。更特别地，用于提取的溶剂可为10-90% (ν/ν)、优选10-70% (ν/ν)、更优选50-70% (ν/ν)的乙醇的水溶液。下文将对制备本发明提取物的方法进行详细描述。本发明的山楂、肉桂、夏枯草和木贼的每种提取物均可通过以下步骤获得切碎每种干药草；将所述药草的碎片用量为所述干药草重量(g)的约3-20倍、优选约5-15倍的水、直链或支链C1-C6醇或醇的水溶液(例如，10-90% (ν/ν)、优选10-70% (ν/ν)、更优选 50-70% (ν/ν)的直链或支链C1-C6醇的水溶液；优选地，10-90% (ν/ν)、优选10-70% (ν/ ν)、更优选50-70% (ν/ν)的乙醇的水溶液)或其混合物，在40-110°C、优选55-90°C下，进行约0. 5-20小时、优选1-10小时的渗滤、热水提取、超声提取，或回流冷凝提取；然后将所获得的提取物进行过滤、在减压下浓缩和/或干燥。如果提取使用的溶剂的量小于所述干药草重量的3倍，则造成难以搅拌而使所述提取物的溶解度降低，并且提取效率也降低；如果使用的溶剂的量大于所述干药草重量的 20倍，则导致在后续纯化步骤中需要更大量的低级醇，这带来经济和处理问题。另外，当使用醇溶液作为用于提取的溶剂时，小于10% (ν/ν)的醇含量可导致从所述药草提取的极性物质例如糖过量，导致后续过滤步骤出现问题，而醇含量超过90% (ν/ν)可相对增加所述溶剂的非极性，从而降低所需活性物质的提取效率。另外，提取温度低于40°C时提取效率降低，提取温度高于110°C时由于有限的提取效率而增加提取成本、不经济。提取时间少于 30分钟时会降低提取效率，而提取时间多于20小时会带来不想要的杂质提取，从而降低最终提取物的纯度。将所述提取物进行过滤后收集滤出液，将残留物浸没在量为所述药草重量的约 4-7倍的水、直链或支链C1-C6醇、醇的水溶液(例如，直链或支链C1-C6醇的10-90% (ν/ ν)、优选10-70% (ν/ν)、更优选50-70% (ν/ν)的水溶液；优选地，乙醇的10-90% (ν/ν)、优选10-70% (ν/ν)、更优选50-70% (ν/ν)的水溶液)中。将所得溶液加热(例如在55_90°C) 并进行再提取(二次提取)2-5小时。二次过滤后，收集滤出液并与之前的滤出液混合以增加提取效率。本发明的一个实施方案包括连续进行第一次提取后再次进行第二次提取的方法，这是为了防止以下情况，大规模生产中即使进行有效过滤，但药草的含水量高而发生损失，因此只通过第一次提取将会导致提取效率的降低。但所述二次提取的进行只是为了提取效率，而与最终提取物的治疗作用无关。因此应理解，作为本发明有效成分的药草提取物不受上述制备方法的限制。另外，对各步提取效率的评估揭示了占总量约80-90%的提取物是在二次提取中获得的，也可进行三次提取但在经济方面不利。将二次提取后混合的滤出液在50-60°C下减压浓缩以除去留在样品中的溶剂。将在减压下完全浓缩后的样品浓缩物与所述浓缩物总重的25-50倍的水进行两次或三次共沸浓缩，然后再与相同量的另外的水混合以形成均质悬浮液。然后将所述悬浮液冻干为最终提取物。以这种方式使用水进行共沸浓缩是为了有效地控制残留在所述药草提取物中的低级醇的含量，从而使用所述药草提取物作为用于医药产品的材料。依照本发明的一个优选实施方案，所述药草提取物包含一种含有山楂提取物和肉桂提取物的组合物，所述山楂提取物与肉桂提取物以10 1-1 5、优选5 1-1 5、更优选1 1-1 5的重量比(即山楂提取物的重量肉桂提取物的重量)混合。依照本发明的另一个优选实施方案，所述药草提取物包含一种含有山楂提取物和夏枯草提取物的组合物，所述山楂提取物和夏枯草提取物以10 1-1 5的重量比(即山楂提取物的重量夏枯草提取物的重量)混合。依照本发明的又另一个优选实施方案，所述药草提取物包含一种含有山楂提取物和木贼提取物的组合物，所述山楂提取物和木贼提取物以10 1-1 5的重量比(即山楂提取物的重量木贼提取物的重量)混合。依照本发明的又另一个优选实施方案，所述药草提取物包含一种含有肉桂提取物和夏枯草提取物的组合物，所述肉桂提取物和夏枯草提取物以10 1-1 5、优选 1:1-1: 3的重量比(即肉桂提取物的重量夏枯草提取物的重量)混合。依照本发明的又另一个优选实施方案，所述药草提取物包含一种含有肉桂提取物和木贼提取物的组合物，所述肉桂提取物和木贼提取物以7 1-1 7的重量比(即肉桂提取物的重量木贼提取物的重量)混合。依照本发明的又另一实施方案，所述药草提取物包含一种含有夏枯草提取物和木贼提取物的组合物，所述夏枯草提取物和木贼提取物以10 1-1 10的重量比(即夏枯草提取物的重量木贼提取物的重量)混合。依照本发明的再另一个优选实施方案，所述药草提取物包含一种含有山楂提取物、肉桂提取物和夏枯草提取物的组合物，所述山楂提取物、肉桂提取物和夏枯草提取物以 10 1 1-1 1 5的重量比(即山楂提取物的重量肉桂提取物的重量夏枯草提取物的重量)混合。依照本发明的再另一个优选实施方案，所述药草提取物包含一种含有山楂提取物、肉桂提取物和木贼提取物的组合物，所述山楂提取物、肉桂提取物和木贼提取物以 10 1 1-1 1 5的重量比(即山楂提取物的重量肉桂提取物的重量木贼提取物的重量)混合。依照本发明的再另一个优选实施方案，所述药草提取物包含一种含有山楂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物的组合物，所述山楂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物以 7:1:1-1:1: 5的重量比(即山楂提取物的重量夏枯草提取物的重量木贼提取物的重量)混合。依照本发明的再另一个优选实施方案，所述药草提取物包含一种含有肉桂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物的组合物，所述肉桂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物以 7:1:1-1:1: 7的重量比(即肉桂提取物的重量夏枯草提取物的重量木贼提取物的重量)混合。依照本发明的再另一个优选实施方案，所述药草提取物包含一种含有山楂提取物、肉桂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物的组合物，所述山楂提取物、肉桂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物以5 :1:1:1-1:1:1: 5的重量比(即山楂提取物的重量 肉桂提取物的重量夏枯草提取物的重量木贼提取物的重量)混合。所述提取物的重量比以所述提取物的干重计，“所述提取物的干重”是指通过从所述提取物去除溶剂得到的干提取物的重量(下文同上)。本文界定的术语“肾炎”可包括至少一种选自以下的肾病肾小球性肾炎、肾盂肾炎、间质性肾炎、狼疮性肾炎、糖尿病肾病、蛋白尿症、肾小管腔萎缩、肾小球硬化症、肾衰竭寸。本发明的用于预防和治疗肾炎的组合物包含以所述组合物的总重计0. 001-99wt. %、优选0. l-50wt. %的所述提取物，但不限于此，并可根据要治疗的疾病的类型和程度、患者的情况、需要的效果等而进行适当的调节。包含本发明提取物的组合物还可包含常用于制备药物组合物的合适的载体、赋形剂或稀释剂。包含本发明提取物的组合物可根据常规方法制剂成口服剂型(例如粉剂、粒剂、 片剂、胶囊剂、悬浮剂、乳剂、糖浆剂、气雾剂等)、局部用药剂、直肠制剂或可注射制剂。可纳入包含所述提取物的组合物的载体、赋形剂或稀释剂可为乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯橡胶(0I^FaI0l·卫平)、海藻酸盐/酯、 明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、无定形纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁、矿物油等。所述组合物的制剂可包括使用常用稀释剂或赋形剂例如填充料、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、表面活性剂等。用于口服给药的固体制剂可包括片剂、丸剂、粉剂、粒剂、胶囊剂等。所述固体制剂可通过将所述提取物与至少一种赋形剂例如淀粉、碳酸钙、蔗糖、乳糖、明胶等混合而制备。另外，除了所述常用赋形剂以外，还可使用润滑剂例如硬脂酸镁或滑石。用于口服给药的液体制剂可包括悬浮剂、 溶液剂、油剂、糖浆剂等。除了常用稀释剂例如水和液体石蜡以外，还可使用不同赋形剂，例如润湿剂、调味剂、香料、防腐剂等。非经肠给药的制剂可包括无菌水溶液、非水溶剂、悬浮剂、油剂、冻干制剂或直肠制剂。非水溶液和悬浮液可包括丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄榄油)、可注射酯(例如油酸乙酯)等。直肠制剂的基料可包括witepsol、聚乙二醇
(macrogol)、吐温61、可可脂、月桂精黄油(升早钽只1 )、甘油明胶等。例如，为获得所需效果，所述组合物可按照以所述提取物的干重计l-1000mg/kg、 优选50-500mg/kg、更优选150-300mg/kg的每日剂量给药。所述给药一日可进行一次，也可分几次进行。但所述每日剂量由本领域技术人员根据患者的情况和体重、疾病的严重程度、 剂型和给药途径及时间可进行恰当的调节。因此，上面规定的每日剂量不欲在任何方面限制本发明的范围。本发明的组合物可给予所有哺乳动物，优选啮齿类、家畜、人等，更优选人。所述给药途径可包括所有类型的途径，包括口服途径，直肠途径，或者静脉内、肌肉内、皮下、子宫内、硬膜外或脑室内注射途径，但不限于此。在另一个实施方案中，本发明提供用于预防和/或改善肾炎的保健食品，所述保健食品含有至少一种选自山楂提取物、肉桂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物的药草提取物作为有效成分。含有本发明提取物的组合物可用于多种用途，例如用于预防和改善肾炎的药品或保健食品。可加入本发明提取物的食品可包括例如任何种类的食品、饮料、口香糖、茶、维生素复合物、保健食品，并可以以粉末、颗粒、片、胶囊或饮料的形式使用。本发明提取物几乎没有毒性和副作用，并可用作出于预防目的长期给药的安全医药物质。在此，保健食品中的提取物含量可以是以所述食品总重计0. 01-15wt. %，作为用于本发明保健食品的组合物；或者以IOOml所述食品计0. 02-10g、优选0. 3_lg，作为用于保健饮料的组合物。
用于所述保健食品中的保健饮料的组合物可包含作为必需成分的所述提取物和液体成分，所述液体成分不受具体限制，可额外地包括多种用于常规饮料的调味剂或天然烃类。天然烃类的实例可包括一般糖类例如单糖(如葡萄糖、果糖等)，双糖(如麦芽糖、蔗糖等)，或多糖(如糊精、环糊精等)以及糖醇类例如木糖醇、山梨醇、赤藓糖醇等。本文使用的调味剂可优选地包括天然调味剂(例如，奇甜蛋白、甜叶菊(Stevia)提取物、莱鲍迪苷 (rebaudioxide Α)、甘草皂苷等)和合成调味剂(例如糖精、阿斯巴甜等)。所述天然碳水化合物的量为每IOOml的本发明组合物中约l_20g、优选约5-12g。除上述成分以外，本发明组合物还可包含多种营养补充物、维生素、矿物质(电解质)、调味剂(例如合成调味剂、天然调味剂等)、色素、填充料(例如干酪、巧克力等)、果胶酸及其盐、藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、PH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、醇、用于碳酸饮料的碳酸化剂等。除此之外，本发明组合物还可包含天然果汁，以及用于制备果汁或植物汁的果浆。这些成分可单独或结合使用。所述添加剂的量并不是很多，但每100重量份的本发明组合物中可为0-20重量份。在本发明的另一实施方案中，提供了用于制备预防和/或治疗肾炎的组合物的方法，所述方法包括进行提取至少一种选自山楂、肉桂、夏枯草和木贼的药草的第一次提取，所述提取用量为所述药草重量(g)的约3-20倍、优选5-15倍的水、直链或支链C1-C6醇或醇的水溶液(例如，直链或支链C1-C6醇的10-90% (ν/ν)、优选10-70% (ν/ν)、更优选50-70% (ν/ ν)的水溶液；优选地，乙醇的10-90% (ν/ν)、优选10-70% (ν/ν)、更优选50-70% (ν/ν)的水溶液)或其混合物，在40-110°C、优选55-90°C下，进行0. 5-20小时、优选1_10小时的浸透、热水提取、超声提取，或通过加热回流冷凝提取得到药草提取物。在本发明的一个优选实施方案中，所述方法还可在所述第一次提取后包括过滤所述第一次提取得到的提取物以收集滤出液；进行提取所述滤出液以外的残留物的第二次提取，在所述残留物中再次添加量为所述残留物重量的4-7倍的水、直链或支链C1-C6醇或醇的水溶液(例如，直链或支链 C1-C6醇的10-90% (ν/ν)、优选10-70% (ν/ν)、更优选50-70% (ν/ν)的水溶液；优选地， 乙醇的10-90% (ν/ν)、优选10-70% (ν/ν)、更优选50-70% (ν/ν)的水溶液)，并进行加温 (例如55-99°C )，然后进行2-5小时的再提取；并且过滤所述第二次提取得到的提取物并将得到的滤出液与所述第一次提取的滤出液混合。通过进行所述第一次和第二次提取增加了提取效率，这对大规模药草提取物的生产是有利的。当所述提取物来自至少两种选自山楂、肉桂、夏枯草和木贼的药草时，所述提取物可通过获得各药草提取物然后混合所述提取物制备；或混合所述至少两种药草、然后根据上述方法制备所述混合物的提取物制备。所述各药草提取物的混合比例如上所述。


图1示出了单一药草提取物对庆大霉素诱导的肾炎模型的肾炎抑制活性。图2示出了对庆大霉素诱导的肾炎模型的组织病理学研究结果。
图3示出了单一药草提取物对顺钼诱导的肾炎模型的肾炎抑制活性。图4示出了对顺钼诱导的肾炎模型的组织病理学研究结果。
具体实施方案下面，根据以下实施例对本发明进行更加详细的描述，但是所述实施例仅为了说明，而不意图限制本发明的范围。[实施例1单一药草提取物的制备㈧]1.1:山楂提取物的制备用水清洗山楂(Crataegi Fructus，购自韩国的Kyung-dong市场)的叶和花以除去杂质并完全干燥。在以这种方式得到的250g的山楂中添加将2. OL的60% (ν/ν)乙醇水溶液。在80°C下进行两次每次3小时的回流，之后将得到的液体提取物过滤并在减压下浓缩。大部分水已蒸发的状态下，将0. 2L水加至所述浓缩的提取物，并对其加热以进行共沸浓缩。将此过程再重复两次。再次将相同体积的水加至所述共沸浓缩物以形成均质悬浮液，然后将其冻干以得到45. Og(相对于初始药草18%的收率)粉末形态的山楂提取物。1.2:肉桂提取物的制备用水清洗肉桂(Cirmamomi Cortex，购自韩国的Kyung-dong市场)以除去杂质并完全干燥。在以这种方式得到的250g的肉桂中添加2. OL的60% (ν/ν)乙醇水溶液。在 80°C下进行两次每次3小时的回流，之后将得到的液体提取物过滤并在减压下浓缩。大部分水已蒸发的状态下，将0. 2L水加至所述浓缩的提取物，并对其加热以进行共沸浓缩。将此过程再重复两次。再次将相同体积的水加至所述共沸浓缩物以形成均质悬浮液，然后将其冻干以得到28. 5g(相对于初始药草11. 4%的收率)粉末形态的肉桂提取物。1. 3 夏枯草提取物的制备用水清洗夏枯草(Pimella Spica)以除去杂质并完全干燥。在以这种方式得到的 250g的夏枯草中添加2. OL的60% (ν/ν)乙醇水溶液。在80°C下进行两次每次3小时的回流，之后将得到的液体提取物过滤并在减压下浓缩。大部分水已蒸发的状态下，将0.2L水加至所述浓缩的提取物，并对其加热以进行共沸浓缩。将此过程再重复两次。再次将相同体积的水加至所述共沸浓缩物以形成均质悬浮液，然后将其冻干以得到27. 3g(相对于初始药草10. 9%的收率)粉末形态的夏枯草提取物。1. 4 木贼提取物的制备用水清洗木贼(Equiseti Herba)以除去杂质并完全干燥。在以这种方式得到的 250g的木贼中添加2. OL的60% (ν/ν)乙醇水溶液。在80°C下进行两次每次3小时的回流，之后将得到的液体提取物过滤并在减压下浓缩。大部分水已蒸发的状态下，将0. 2L水加至所述浓缩的提取物，并对其加热以进行共沸浓缩。将此过程再重复两次。再次将相同体积的水加至所述共沸浓缩物以形成均质悬浮液，然后将其冻干以得到52. Og(相对于初始药草20. 8%的收率)粉末形态的木贼提取物。[实施例2药草混合物的提取物的制备]用水清洗山楂、肉桂和夏枯草以除去杂质并完全干燥。在以这种方式得到的山楂 (97g)和肉桂(153g)、或肉桂(92g)和夏枯草(96g)中添加2. OL的60% (ν/ν)乙醇水溶液。 在80°C下进行两次每次3小时的回流，之后将得到的液体提取物过滤并在减压下浓缩。大部分水已蒸发的状态下，将0. 2L水加至所述浓缩的提取物，并对其加热以进行共沸浓缩。 将此过程再重复两次。再次将相同体积的水加至所述共沸浓缩物以形成均质悬浮液，然后将其冻干以得到35. 2g(相对于初始药草14. 的收率)粉末形态的山楂和肉桂的复合提取物，以及22. Og(相对于初始药草11. 7%的收率)粉末形态的肉桂和夏枯草的复合提取物。
[实施例3药草提取物的混合物的制备]
实施例3. 1 山楂提取物和肉桂提取物的混合物的制备
将实施例1. 1的山楂提取物和实施例1.2的肉桂提取物以10 1、5 1、3 1、 1 1、1 3和1 5的重量比(山楂提取物的重量肉桂提取物的重量)混合在一起。为均勻混合，向混合物中加入体积为所述混合物重量2-3倍的水，然后在50-60°C进行减压浓缩。将相同体积的水加至所得的浓缩物以形成均质悬浮液，然后将其冻干以得到粉末状混合物。
实施例3. 2 山楂提取物和夏枯草提取物的混合物的制备
将实施例1. 1的山楂提取物和实施例1.3的夏枯草提取物以10 1、5 1、3 1、 1 1、1 3和1 5的重量比(山楂提取物的重量夏枯草提取物的重量)混合在一起， 并以与实施例3. 1相同的方式进行所述过程以制备混合物。
实施例3. 3 山楂提取物和木贼提取物的混合物的制备
将实施例1. 1的山楂提取物和实施例1.4的木贼提取物以10 1、5 1、3 1、1 1、1 3和1 5的重量比(山楂提取物的重量木贼提取物的重量)混合在一起，并以与实施例3. 1相同的方式进行所述过程以制备混合物。
实施例3. 4 肉桂提取物和夏枯草提取物的混合物的制备
将实施例1.2的肉桂提取物和实施例1.3的夏枯草提取物以10 1、5 1、4 1、 3 1、1 1、1 3和1 5的重量比(肉桂提取物的重量夏枯草提取物的重量)混合在一起，并以与实施例3. 1相同的方式进行所述过程以制备混合物。
实施例3. 5 肉桂提取物和木贼提取物的混合物的制备
将实施例1.2的肉桂提取物和实施例1.4的木贼提取物以7 1、5 1、3 1、2 1、1 1、1 3、1 5和1 7的重量比(肉桂提取物的重量木贼提取物的重量)混合在一起，并以与实施例3. 1相同的方式进行所述过程以制备混合物。
实施例3. 6 夏枯草提取物和木贼提取物的混合物的制备
将实施例1.3的夏枯草提取物和实施例1.4的木贼提取物以10 1、5 1、3 1、 1 1、1 3、1 5和1 10的重量比(夏枯草提取物的重量木贼提取物的重量)混合在一起，并以与实施例3. 1相同的方式进行所述过程以制备混合物。
实施例3. 7山楂提取物、肉桂提取物和夏枯草提取物的混合物的制备
将实施例1. 1的山楂提取物、实施例1. 2的肉桂提取物和实施例1. 3的夏枯草提取物以10 1 1、2 2 3和1 1 5的重量比(山楂提取物的重量肉桂提取物的重量夏枯草提取物的重量)混合在一起，并以与实施例3. 1相同的方式进行所述过程以制备混合物。
实施例3. 8山楂提取物、肉桂提取物和木贼提取物的混合物的制备
将实施例1. 1的山楂提取物、实施例1. 2的肉桂提取物和实施例1. 4的木贼提取物以10 1 1、2 5 2和1 1 5的重量比(山楂提取物的重量肉桂提取物的重量木贼提取物的重量)混合在一起，并以与实施例3. 1相同的方式进行所述过程以制备混合物。
实施例3. 9 山楂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物的混合物的制备
将实施例1. 1的山楂提取物、实施例1. 3的夏枯草提取物和实施例1. 4的木贼提取物以7 1 1、3 2 4和1 1 5的重量比(山楂提取物的重量夏枯草提取物的重量木贼提取物的重量)混合在一起，并以与实施例3. 1相同的方式进行所述过程以制备混合物。
实施例3. 10 肉桂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物的混合物的制备
将实施例1. 2的肉桂提取物、实施例1. 3的夏枯草提取物和实施例1. 4的木贼提取物以7 1 1、3 2 5和1 1 7的重量比(肉桂提取物的重量夏枯草提取物的重量木贼提取物的重量)混合在一起，并以与实施例3. 1相同的方式进行所述过程以制备混合物。
实施例3. 11 山楂提取物、肉桂提取物、夏枯草提取物和木贼提取物的混合物的制备
将实施例1. 1的山楂提取物、实施例1. 2的肉桂提取物、实施例1. 3的夏枯草提取物和实施例1.4的木贼提取物以5 1 1 1、3 2 2 2和1 1 1 5重量比 (山楂提取物的重量肉桂提取物的重量夏枯草提取物的重量木贼提取物的重量)混合在一起，并以与实施例3. 1相同的方式进行所述过程以制备混合物。
[实验实施例药理活性的评估]
实验实施例1 药草提取物的混合物与药草混合物的提取物之间的活性对比
lfligif^^^ (Amin et al. ， Environmental Health Perspectives vol. 112, No. 4，March, 2004,465-479)进行试验以对比和评估实施例2的来自山楂与肉桂的药草混合物以及肉桂与夏枯草的药草混合物的提取物、以及实施例3. 1的山楂提取物与肉桂提取物的1 1混合物、以及实施例3. 4中的肉桂提取物与夏枯草提取物的1 1混合物对肾炎的治疗作用。结果示于表1。
无阳性对照组，对正常组进行试验。对雄性SD大鼠(7周龄，195-205g, Orient) 将M0mg/kg的剂量的肾炎诱导因子庆大霉素(购自Whail Pharma. Co.，Ltd.)进行6天的腹膜内注射以诱导肾炎。在被诱导肾炎的试验大鼠中，除阴性对照组以外的试验组以 400mg/kg的每日剂量口服实施例2的2种试验药物和实施例3. 1或3. 4的试验药物。口服后7天进行尸检，采集血样以检测血液脲氮(B. U. N.，blood urea nitrogen)和肌酸酐 (creatinine)。其结果示于表1。
[表1]


本发明涉及药草提取物在用于预防和治疗肾炎的药物组合物中的新用途。更具体地，本发明提供包含一种或者多种选自山楂、肉桂、夏枯草和木贼的药草提取物和保健食品，使用所述药草提取物治疗肾炎的方法，以及所述药草提取物在制备用于预防和/或治疗肾炎的组合物中的用途。所述药草提取物可用于在庆大霉素、顺铂等药物诱导的肾炎模型中预防和/或治疗肾炎，并且具有高的对肾脏中的肾小球膜细胞生长的抑制活性。