专利名称：霉菌发酵生物合成制备霉菌氧化物新工艺的制作方法六十年代初，我国引进激素类药物产品，激素类药物是人或动物的肾皮质所分泌的一类激素，它是维持和调节机体正常生理功能所不可缺少的留体化合物。该类药物生产过程中，霉菌氧化物(C21H28O4，中文名，Ila-羟基-16，17a-环氧孕酮)是制备激素类药物重要的中间体。它是通过生物合成技术，使用“黑根霉(Miizopus nigricans)”将底物“沃氏氧化物”转化为“霉菌氧化物”的生物合成过程。该过程存在氮源中蛋白质含量偏低，氨基酸组合配伍不够合理，尤其是铁离子含量低及存在可溶性磷离子等诸多缺陷，虽多年来工艺不断改进，各项指标有所提高，但其转化率、收率、指标并无大的突破。近年来，随着激素类药物不断研制、开发，一些高效、低毒产品不断推向市场，“霉菌氧化物”这个重要的中间体，更加显现出他的重要地位。因此，在稳定产品质量前提下，改变突破现有工艺，达到转化率、收率的高指标，产品的高产率由显重要。经过近六年的技术探索、实验、生产，最终成功的确定了霉菌发酵生物合成新工艺，达到了双高低耗，产品的高产率，创造了可观的经济效■、Λfrff. ο
本发明的目的是提供一种霉菌发酵生物合成制备霉菌氧化物新工艺，它是针对现有技术不足的一种改进，它是采用新型氮源弥补蛋白质含量偏低，氨基酸配不够合理等缺陷的生物发酵工艺；它在保证现有产品质量前提下，大幅度提高产品转化率、收率指标的重大突破，这是多年来各种改进所不能达到的。本发明技术方案是一种霉菌发酵生物合成制备霉菌氧化物的工艺，其特征在于 它是以碳源、氮源和消沫剂为主要原料，碳源葡萄糖60 85kg ；氮源玉米浆60 85kg ； 蚕蛹粉10 20kg ；硫酸铵5 IOkg ；消沫剂聚醚1000 2000ml ；搅拌反应，并在生物发酵过程中通入空气，经氧化反应、压滤脱水、吹干，将底物沃氏氧化物转化为含有霉菌氧化物的菌丝体，再经丙酮提取得到霉菌氧化物粗品，经甲苯、氯仿混合溶媒精制得到霉菌氧化物精品。一种霉菌发酵生物合成制备霉菌氧化物的新工艺，其特征在于它包括以下步骤(1)菌丝制备A、将碳源葡萄糖60 85kg ；氮源玉米浆60 85kg ；蚕蛹粉10 20kg ；硫酸铵5 IOkg ；消沫剂聚醚1000 2000ml —次投入到一级发酵罐内，加入1_4吨水，调整 PH值至2-5，蒸汽灭菌，降温至沈±4°C时，接入黑根霉的孢子悬浮液3-50升，孢子悬浮液浓度为10-300万/ml，通入空气，搅拌12-36h，后移入二级发酵罐；B、按与一级发酵罐同样的物料配比投5-10倍物料，经灭菌，降温至^±4°C，移入 A步骤所制全部液体，通入空气、搅拌18-3 ，投入340kg底物沃氏氧化物，于25 30°C进行生物氧化，取样镜检，及色谱测试，底物转化比例达到50-60%后，提高温度至30-60°C， 下口罐放料；C、将菌丝液体压入板框压混机，滤掉发酵液，将菌丝体空气吹干，再将菌丝体粉碎；(2)霉菌氧化物粗品的制备将粉碎后的菌丝体投入提取罐内，加入菌丝体重量 5 10倍丙酮，提取2-8次，将提取液浓缩结晶，得霉菌氧化物粗品；(3)霉菌氧化物精制将霉菌氧化物粗品投入精制罐内，加入霉菌氧化物粗品重量10 15倍体积的甲苯、氯仿混合溶媒，全溶浓缩，反复精制3-9次，取样测试，霉菌氧化物含量大于97%后，下口罐放料、滤干，精品入烤箱干燥，取样送检，霉菌氧化物含量大于 97%为霉菌氧化物。 所说的搅拌温度为^±4°C。所说的通入空气为空气和反应液的体积比为0. 21-0. 28倍体积/min。 所说的氧化反应时间为M-72小时。 所说的甲苯、氯仿体积比为1 2 2 1。 本发明的化学反应式是


本发明属于一种甾体激素类药物霉菌发酵工艺，尤其涉及到霉菌发酵生物合成制备霉菌氧化物新工艺，在26±4℃搅拌反应，并在生物发酵过程中进行通气，经24-72h氧化反应，再经板框压滤脱水、吹干，将底物沃氏氧化物转化为含有霉菌氧化物的菌丝体，再经丙酮提取得到霉菌氧化物粗品，经甲苯、氯仿混合溶剂精制得到霉菌氧化物精品。该工艺采用有机氮源，其配方更加适合生物发酵工艺要求，收率可达87％以上，产品质量稳定，产量高、转化率、收率相关指标高，经济效益可观，适用于产业化。