一种香菇多糖凝胶剂以及制备方法[0002]香菇多糖是从香菇的子实体(菌盖、菌褶和菌柄)中提取的一种免疫增强剂，对多种肿瘤有较强的抑制作用，对化学诱癌 剂、病毒诱癌剂有预防效果，特别是对于手术后微转移有效。它是通过剌激机体的免疫系统使机体的免疫功能得到恢复和提高，由机体本身的抵抗力去杀死肿瘤细胞。作用间接，副作用小，使用安全。[0003]有关香菇多糖的成分结构报道甚多，但已明确结构与免疫有关的只有葡聚糖物质，其分子量为40~80万，一级结构为β-D-(1-3)葡萄糖为主链，β-(1-6)葡萄糖为侧链的葡聚糖，且生物活性与三螺旋链结构有关。香菇多糖还具有免疫调节的作用。它的作用类似一种宿主免疫增强剂，能够刺激关键细胞的成熟、分化和增殖，改善宿主机体平衡，达到恢复或提高宿主细胞对淋巴因子、激素及其它生物活性因子的反应性作用。香菇多糖对寄生虫、霉菌、细菌等感染均有治疗作用，可治疗结核杆菌感染、曼氏裂体吸虫感染、日本血吸虫感染及利曼氏原虫感染。烫伤破坏皮肤天然屏障，血液循环障碍或丧失血液灌注，局部营养缺乏，全身免疫力下降，为细菌入侵创造良好的条件。同时大面积烫伤后出现机体免疫功能紊乱，全身炎性反应失衡，患者极易并发感染而死亡，因此在治疗烫伤的同时有必要调节机体的免疫功能。目前，国内外上市的香菇多糖药物均为注射剂或口服片剂、胶囊等剂型，适应症为抗肿瘤或肝炎，无外用型药物上市。因此，开发一种新型、安全的，且能够促进皮肤创伤修复的香菇多糖外用凝胶剂是十分必要的。[0004]由李保庆、马玉泉发表在《河北医药》2006年3月34卷3期中的文章《香菇多糖的临床应用》(期刊分类:医药科学综合，国内刊号:CN13-1090/R)从香菇多糖的抗肿瘤作用、对肿瘤放、化疗的增疗作用、对多种感染的治疗作用、对慢性乙型肝炎等病毒性疾病的治疗作用等方面对香菇多糖的临床应用进行了很全面的介绍，香菇多糖的使用仅仅限于静脉注射、口服，而没有提到外用。[0005]由赵继明、蒲艳春发表在《中外健康文摘》2011年第38期中的文章《香菇多糖的研究进展》(【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】1672-5085 (2011) 38-0312-03)介绍了香菇多糖的化学结构、理化性质和香菇多糖的提取、分离和纯化方法，并对香菇多糖的免疫调节作用、抗肿瘤活性、抗病毒活性、以及降糖和降脂作用进行阐述，对香菇多糖在临床应用和保健品市场进行展望，没有明确的指出香菇多糖在治疗皮肤创伤上的应用。[0006]中国专利申请公布号CN101732336A，申请公布日为2010年06月16日的发明专利公开了一种抗寄生虫的外用剂，它包括作为驱虫药的活性成分和至少一种中草药多糖，包含于便于体表给药和所述活性成分头皮给药的载体中，所述的作为驱虫药的活性成分为至少一种从链霉菌发酵产生的一组大环内酯类物质中已商品化的药物阿维菌素、多拉菌素、埃普利诺菌素以及塞拉菌素，或由这类物质合成的衍生物伊维菌素，所述的多糖为葡聚糖、木葡聚糖、肝素、果胶、壳聚糖、枸杞多糖、香菇多糖、猴头菇多糖等中的一种或几种，该发明对于驱除寄生虫收效迅速、疗效确切，无明显毒副作用。该申请虽然公开了中草药多糖(包括香菇多糖)应用于外用剂的技术方案，但是，该外用剂是一种抗寄生虫的外用剂，使用对象是牲畜，以从链霉菌发酵产生的一组大环内酯类物质为主要成分,并不涉及治疗人体烫伤等皮肤创伤的外用药。
[0007]本发明的目的在于提供一种可直接涂抹在因烫伤、溃疡、湿疹等造成的创面上，能调节免疫力、促进创伤修复、抑制细菌感染，使用方便，便于清洗，无毒副作用的香菇多糖凝胶剂。
[0008]本发明采用的技术方案为:
[0009]一种香菇多糖凝胶剂，该凝胶剂是由下述原料制成的:
[0010]凝胶基质(质量百分比):
[0011]增稠剂0.1~10润湿剂0.1~20防腐剂0.1~3
[0012]稳定剂0.1~10纯化水为57~99.6
[0013]香燕多糖原料 (纯度大于96%,重均分子量为40~80万):0.I微克~200微克
/每克凝胶基质。
[0014]所述增稠剂是羟甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚乙二醇、壳聚糖，浓度分别为
0.6 ~6%。
[0015]所述润湿剂是甘油、丙二醇，浓度分别为0.1~10%。
[0016]所述防腐剂是苯甲酸钠、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯，浓度分别为0.1~3%。
[0017]所述稳定剂是甘露醇、山梨醇、乳糖、柠檬酸钠，浓度分别为0.6~6%。
[0018]本发明的另一目是提供香菇多糖凝胶剂的制备方法，其技术方案如下:
[0019]一种香菇多糖凝胶剂的制备方法，包括以下步骤:
[0020]I)将增稠剂、润湿剂、防腐剂、稳定剂和水按权利要求1所述的比例混合，搅拌均匀，形成水溶性凝胶基质；
[0021]2)在步骤I)中形成的凝胶基质中加入香菇多糖，香菇多糖的投放量按照0.1微克~200微克/每克凝胶基质加入；
[0022]3)在0.07~0.15MPa的压力条件下，将加入了香菇多糖的凝胶基质在115~126°C的条件下，高温灭菌10~30分钟，冷却至室温后即为香菇多糖凝胶剂。
[0023]本发明提供的香菇多糖凝胶剂具有以下优点:
[0024]1、本发明的香菇多糖凝胶剂不含激素，对皮肤无毒、无刺激作用，可以用于婴幼儿的皮肤烫伤、皮肤湿疹等治疗。
[0025]2、本发明的香菇多糖凝胶剂可以调节患者的免疫力，促进皮肤创伤修复，并具有抗细菌感染的作用。
[0026]3、本发明的香菇多糖凝胶剂可以直接涂抹在因烫伤等引起的皮肤创面上，使用方便，便于清洗。
[0027]以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
[0028]实施例1:
[0029]取羟甲基纤维素钠I克，甘油2克，苯甲酸钠0.1克，甘露醇I克，加入纯化水至100克，混合、搅拌均匀成水溶性基质，加入500微克的香菇多糖(纯度大于96% )，搅拌均匀之后，在0.1MPa, 121°C条件下灭菌15分钟，冷却至室温，即为香菇多糖凝胶剂。
[0030]实施例2:
[0031]取甲基纤维素钠2克，丙二醇5克，对羟基苯甲酸乙酯I克，山梨醇3克，加入纯化水至100克，混合、搅拌均匀成水溶性基质，加入300微克的香菇多糖(纯度大于96% )，搅拌均匀之后，在0.1MPa, 121°C条件下灭菌20分钟，冷却至室温，即为香菇多糖凝胶剂。
[0032]实施例3:
[0033]取聚乙二醇5克，丙二醇5克，对羟基苯甲酸甲酯3克，乳糖I克，，加入纯化水至100克，混合、搅拌均匀成水溶性基质，加入200微克的香菇多糖(纯度大于96% )，搅拌均匀之后，在0.lMPa，121°C条件下灭菌15分钟，冷却至室温，即为香菇多糖凝胶剂。
[0034]实施例4:
[0035]取壳聚糖3克，甘油3克，对羟基苯甲酸丁酯2克，柠檬酸钠5克，，加入纯化水至100克，混合、搅拌均匀成水溶性基质，加入800微克的香菇多糖(纯度大于96% )，搅拌均匀之后，在0.1MPa, 121°C条件下灭菌15分钟，冷却至室温，即为香菇多糖凝胶剂。
[0036]实施例5:
[0037]取羟甲基纤维素钠2克，甘油3克，苯甲酸钠0.1克，甘露醇3克，加入纯化水至100克，混合、搅拌均匀成水溶性基质，加入1000微克的香菇多糖(纯度大于96% )，搅拌均匀之后，在0.15MPa，126°C条件下灭菌10分钟，冷却至室温，即为香菇多糖凝胶剂。
[0038]实施例6:
[0039]取甲基纤维素钠I克，丙二醇I克，苯甲酸钠0.2克，甘露醇5克，加入纯化水至100克，混合、搅拌均匀成水溶性基质，加入1500微克的香菇多糖(纯度大于96% )，搅拌均匀之后，在0.07MPa, 115°C条件下灭菌30分钟，冷却至室温，即为香菇多糖凝胶剂。
[0040]本发明涉及药物的稳定性、毒理实验等如下:
[0041]1、稳定性实验:在温度25V ±2°C、相对湿度60% ±10%的条件下放置12个月后，制剂的有效成分含量、水分、外观、PH值、均匀性等指标均无明显变化，说明发明的制剂具有良好的稳定性。
[0042]2、微生物限度实验:金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌均未检出，符合要求。
[0043]3、皮肤刺激性实验:香菇多糖凝胶剂分别以每克含0.2毫克、0.4毫克、0.8毫克、I克分别涂于家兔正常以及破损皮肤受试区，面积为50cm2，结果表明，一次给药和对次给药，皮肤刺激性反应强度< 0.5分，说明香菇多糖凝胶剂一次给药和多次给药对家兔完整和破损皮肤均无刺激性。
[0044]试验方法:
[0045]一次给药刺激试验:取健康家兔40只，分为完整皮肤组和破损皮肤组。完整皮肤组分5组，每组4只，雌雄各半，即阳性药物对照组、三个剂量给药组(低剂量、中剂量、高剂量)、基质对照组等。在试验前24小时，将动物脊椎两侧去毛，自身同体作对照，面积为50cm2，完整皮肤组香菇多糖凝胶剂三个剂量组和基质对照组按I克/只涂于左侧，右侧涂生理盐水。破损皮肤组剪毛后消毒皮肤并用消毒手术刀作“#”字型破口，以皮肤出现轻微渗血为度，分组及给药方法、剂量同完整皮肤组，各试验组涂药后用纱布包扎，分笼饲养。24小时后用温水洗去残留受试物，去除受试物后lh、24h、48h、72h后观察并记录涂抹部位有无红斑和水肿等情况。
[0046]多次给药刺激试验:取健康家兔40只，方法同前，每天涂药，，连续观察涂抹部位有无红斑和水肿等情况，连续给药7天将动物处死，将皮肤标本进行病理组织学检查。
[0047]试验结果和评价:
[0048]每组动物评价按照《中药新药研究指南(药学、药理、毒理学)》中的“皮肤刺激强度”评价标准进行评价。结果见表1、表2。由表可知，一次给药和多次给药，未见红斑以及水肿现象，动物全身状态良好，无行为改变，皮肤刺激反应强度评分均< 0.5分，病理观察未见异常现象，说明香菇多糖凝胶剂一次给药和多次给药对家兔完整皮肤和破损皮肤均无刺激性，同时证明本发明的制剂用药比较安全。
[0049]表1 一次给药皮肤刺激性评分结果
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