专利名称：野生红土鸡枞菌人工驯化母种的制备方法麗(Xhidemansiella radicata var. alba )是我国云南省红土高原特有的野生菌种，子实体中等至大型，只生长在我国云南省海抜1800米以上的高原地区。夏秋季常常生长在呈弱酸性的红色土壌潮湿林地上，故名红土鸡揪，属中低温型菌类，野生产量极低，十分珍贵。其外观怡人，味道鲜美，营养价值极高。红土鸡揪菌菇体大、菌柄粗长、菌盖表面浅褐色、菌柄白色、菇盖厚实、品质优良。目前，国内外没有任何驯化栽培野生红土鸡揪菌子实体的先例。载止本专利申请前，在我国专利申请中涉及鸡揪菌种植的不上10项，并且均没有·获得授权，主要问题是菌种证明力度弱，没有获得保藏认可，其提出的鸡揪菌难以确认。因红土鸡揪菌特殊的营养、味道和保健作用，野生菌产品价格一直很高，单纯采摘野生红土鸡揪菌已经难以满足市场的巨大需求。为此，非常有必要进行人工驯化栽培技术开发。本发明使野生红土鸡揪菌人工驯化栽培迈出了第一歩，进行了野生红土鸡揪菌人エ驯化母种的技术开发，并得以实现，为云南省珍贵野生菌资源的可持续利用奠定了产业技术基础。
本发明的目的就是提供ー种对野生红土鸡揪菌进行人エ驯化，首先获得原始母种的制备方法。实现本发明的技术方案及过程是这样的采用的技术包含单孢子杂交技术，子实体组织分离技术。制备方法过程为 ⑴采集自然野外生长在云南省海抜1800米以上红土高原地区的红土鸡揪菌子实体获得孢子； ⑵通过单孢子杂交技术筛选获得红土鸡揪菌出菇菌株； ⑶再通过子实体组织分离进行系统选育，经过2 6年的系统培育，人工驯化，得到稳定性强，可用于繁殖生产的红土鸡揪菌母种。这ー方法人工驯化的红土鸡揪菌母种繁育方法具体过程细化为 ⑴制备红土鸡揪菌母种培养基原料，该原料所使用的各种物质和重量组份为、香蕉30 100克、马铃薯50 150克、玉米粉20 50克、胡萝卜20 50克、水1000 2000克、琼脂10 30克； ⑵先将香蕉、马铃薯、玉米粉、胡罗卜等粉碎混合成泥状物备用；再将水烧开加入所需的琼脂，待琼脂溶化后，加入备用的泥状物，充分搅拌均匀后用柠檬酸调pH值5. O 6. 5，乘热分装在试管或其他玻璃容器中；在110 126°C下灭菌20 45分钟，冷却后制成培养基;
⑶接入人工驯化的红土鸡揪母种进行培养，培养温度为15 26°C，培养7 15天菌丝长满培养基表面成为成熟母种，红土鸡揪母种即制作完成；
⑷在I 4°C条件下保存备用，或者即可用于繁殖原种。其中，制备红土鸡揪菌母种培养基原料，该原料所使用的各种物质和重量组份还可为、葡萄糖2 30克、麦芽糖2 30克、磷酸ニ氢钾I 10克、硫酸镁O. 5 3克、硫酸锌O. 5 5克、硫酸亚铁O. 5 5克、磷酸ニ氢铵O. 5 3克、蛋白胨I 10克、酵母浸膏I 5克、烟酸50 150毫克、核黄素10 50毫克、水1000 2000克、琼脂10 30克，用柠檬酸调PH值； 或者蔗糖2 30克、麦芽糖2 30克、磷酸氢ニ钾O. 5 5克、硫酸镁O. 5 3克、硫酸锌O. 5 5克、硫酸铵O. 5 5克、牛肉浸膏2 10克、氯化铁30 300毫克、硫胺素20 100毫克、烟酸50 150毫克、水1000 2000克、琼脂10 30克，用柠檬酸调pH值；
或者小麦粒10 30克、玉米粉5 15克、马铃薯30 100克、香菇50 150克、葡萄糖10 20克、磷酸ニ氢钾I 5克、硫酸镁O. 5 3克、蛋白胨I 5克、酵母浸膏I
3克、水1000 2000克、琼脂10 30克，用柠檬酸调pH值。本发明的有益效果在于首次将野生红土鸡揪菌人工驯化成可繁殖的原始母种，为人工栽培红土鸡揪菌迈出了第一歩；所获得的母种菌丝健壮、扭结力強、颜色洁白、生长迅速和易出菇、品质好、效率高。其开创性的研发工作，为云南省珍贵野生菌资源的可持续利用奠定了产业技术基础。


本发明主要内容是制备方法，故无具体的附图提供。本发明涉及的红土鸡揪菌(ifcofefflmsieWa radicata var. alba )已申报生物活性材料保存，自定义编名为FBM-001，以于2012年4月13日，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC进行了保藏，保藏编号为CGMCC5970，并证明存活。

⑴采集自然野外生长在云南省海抜1800米以上红土高原地区的红土鸡揪菌子实体获得孢子；
⑵通过单孢子杂交技术筛选获得红土鸡揪菌出菇菌株；
⑶再通过子实体组织分离进行系统选育，经过2 6年的系统培育，人工驯化，得到稳定性强，可用于繁殖生产的红土鸡揪菌母种。这ー方法人工驯化的红土鸡揪菌母种繁育方法具体过程细化为⑴制备红土鸡揪菌母种培养基原料，该原料所使用的各种物质和重量组份为、香蕉30 100克、马铃薯50 150克、玉米粉20 50克、胡萝卜20 50克、水1000 2000克、琼脂10 30克；
⑵先将香蕉、马铃薯、玉米粉、胡罗卜等粉碎混合成泥状物备用；再将水烧开加入所需的琼脂，待琼脂溶化后，加入备用的泥状物，充分搅拌均匀后用柠檬酸调pH值5. O 6. 5，乘热分装在试管或其他玻璃容器中；在110 126°C下灭菌20 45分钟，冷却后制成培养基;
⑶接入人工驯化的红土鸡揪母种进行培养，培养温度为15 26°C，培养7 15天菌丝长满培养基表面成为成熟母种，红土鸡揪母种即制作完成；
⑷在I 4°C条件下保存备用，或者即可用于繁殖原种。上述所使用的物质均是现存天然的物质，可在市场中采购使用。实施例2 :野生红土鸡揪菌人工驯化母种的制备方法 采用的技术包含单孢子杂交技木，子实体组织分离技木。制备方法过程为
⑴采集自然野外生长在云南省海拔1800米以上红土高原地区的红土鸡揪菌子实 体获得孢子；
⑵通过单孢子杂交技术筛选获得红土鸡揪菌出菇菌株；
⑶再通过子实体组织分离进行系统选育，经过2 6年的系统培育，人工驯化，得到稳定性强，可用于繁殖生产的红土鸡揪菌母种。这ー方法人工驯化的红土鸡揪菌母种繁育方法具体过程细化为
制备红土鸡揪菌母种培养基原料，该原料所使用的各种物质和重量组份为葡萄糖2 30克、麦芽糖2 30克、磷酸ニ氢钾I 10克、硫酸镁O. 5 3克、硫酸锌O. 5 5克、硫酸亚铁O. 5 5克、磷酸ニ氢铵O. 5 3克、蛋白胨I 10克、酵母浸膏I 5克、烟酸50 150毫克、核黄素10 50毫克，将它们粉碎混合均匀成泥状物，煮开水1000 2000克、溶入琼脂10 30克，再放入上述泥状物调均，用柠檬酸调pH值5. O 6. 5 ;乘热分装在试管或其他玻璃容器中；在110 126°C下灭菌20 45分钟，冷却后制成培养基。接入人工驯化的红土鸡揪母种进行培养，培养温度为15 26°C，培养7 15天菌丝长满培养基表面成为成熟母种，红土鸡揪母种即制作完成；
在I 4°C条件下保存备用，或者即可用于繁殖原种。上述所使用的物质，均是市场中所能够获得的正规商品，其规格、含量、成份均是国家标准或行业标准产品。


本发明公开一种野生红土鸡枞菌人工驯化母种的制备方法，是一种人工驯化生物技术的具体应用。解决野生菌人工栽培的技术难题。技术方法为⑴采集自然野外生长在云南省海拔1800米以上红土高原地区的红土鸡枞菌子实体获得孢子；⑵通过单孢子杂交技术筛选获得红土鸡枞菌出菇菌株；⑶再通过子实体组织分离进行系统选育，经过2～6年的系统培育，人工驯化，得到稳定性强，可用于繁殖生产的红土鸡枞菌母种。本发明的红土鸡枞菌母种可用于人工种植生产红土鸡枞菌。