专利名称：富含皂苷类物质的药材中提取有效成分的新方法人参为五加科人参属植物人参(Panaxginseng C. A. Mey.)的干燥根。具 有主补五脏，安精神，定魂魄、止^C悸、除邪气、安神益智、益寿延年之功效。人参为百草之 王，功效卓著。实验研究证明，人参皂苷是人参的标志成分。其根、茎、叶、花、果实均含有 人参皂苷。人参皂苷按其化学结构可分3类齐墩果酸组、原人参二醇组和原人参三醇组，3 种类型的人参皂苷均有广泛的生物活性，如抗肿瘤、抗心律失常、改善心肌缺血、抗氧化、清 除自由基等。人参属植物(人参、珠子参、竹节参、西洋参、三七等)以及富含皂苷的药材(如 绞股蓝、积雪草、酸枣仁、盒子草等)中皂苷的提取方法是首要问题，一种快速、安全、简便、 成本低、纯度高，而又不破坏成分的提取纯化方法是我们一直探索和研究的。已公开的提取人参皂苷的方法有水煎法称取人参须根粗粉5. OOg，8倍量水(通过正交试验而设定)浸泡12h，100 °C煎煮3次(保持水量超过药材1 2cm)，3次时间分别为2、2和Ih。合并提取液浓缩 至一定体积[不同方法提取人参总皂苷工艺的优化研究[J]，人参研究，2003，(4) :5-8]。温浸法按正交试验所得的最佳提取条件进行提取。称取人参须根粗粉 5. OOg，8倍量水浸泡12h，60 ！水浴温浸3次，3次时间分别为2、2和lh，将提取液减压 回收至干[不同方法提取人参总皂苷工艺的优化研究[J]，人参研究，2003，(4) :5-8]。乙醇回流提取法称取人参须根粗粉5. OOg，用70 %的乙醇200mL在索氏 提取器上回流提取24h，将提取液减压回收至干[不同方法提取人参总皂苷工艺的优化研 究[J],人参研究，2003，(4): 5-8]微波提取法称取人参须根粗粉5. OOg，放入150mL三角瓶中，分别用50%的 乙醇60、50和40mL于微波炉中低火提取8分(中火，中高火，高火易沸腾溢出三角瓶) ，用抽滤漏斗过滤，合并滤液，回收乙醇蒸干[不同方法提取人参总皂苷工艺的优化研究 [J],人参研究，2003，(4) :5-8]。超声波提取法按正交试验所得的最佳提取条件进行提取。称取人参须根粗粉5. OOg ，8倍量水浸泡12h，放入超声波中提取，设定提取时间为20分、功率100、温度30 V、 溶剂量8倍、次数3次，提取后，减压抽滤[不同方法提取人参总皂苷工艺的优化研究 [J],人参研究，2003，(4) :5-8]。超高压提取法在常温条件下使用超高压提取了人参皂苷；采用均勻设计法对提取 工艺条件作了优化；常温超高压提取人参皂苷最优工艺条件为溶剂50 %乙醇、压力200MPa、固(g)液(ml)比1:100、提取时间1 min ；提取收率为7. 32 %[常温超高压提取人 参总皂苷[J],化工学报，2005，56(5) 911-914]。超声碱水提取法称取人参须根粗粉50 g,加水浸泡过夜(加CaO调pH值为11) ，超声提取3次(溶剂量依次为500、400和300 mL,超声时间每次30 min,其间保持提 取液为碱性)，抽滤，合并滤液[人参皂苷常规水提取法和新提取方法的比较研究，中药 材，2006，29 (10)1040-1042]。超临界CO2萃取三七总皂苷以三七主根为原料，先采用粉碎工艺或轧胚 工艺对其预处理，然后在超临界CO2中试设备中，分别考察了原料的两种预处理方法及 提取工艺条件对三七总皂苷提取率的影响，通过正交实验对工艺条件进行了优化粉碎 工艺适宜的萃取温度45 0C ,压力38 MPa, CO2流量23 kg/h,夹带剂300 mL,萃取时间 3.0 h,提取率7. 97%;轧胚工艺适宜的萃取温度45 0C ,压力35MPa，CO2流量20 kg/h, 夹带剂350 mL,萃取时间2. 5 h,提取率9. 98%[超临界CO2萃取三七总皂苷，精细化工， 2008，25(3) 238-242]。采用这种传统的提取法有以下缺点1.提取时间长，提取效率低，有效成分 提取不完全2.提取温度高，单位物料的耗能大，成本高目前人参属植物的皂苷类成分由于广泛的药理作用和保健功能已引起国内外消费者 的兴趣，皂苷类提取物的各类产品国内外市场的需求量越来越大，部分人参皂苷具有抗癌 活性，比如Rb^ Rb2, Re、Rd、Rh1, Rh2, Re、Rg3和Rg1对肿瘤都有一定抑制作用，其中以人参 二醇组皂苷的抗肿瘤活性最强。科学实验证明，人参皂苷Rg3不但具有抑制癌细胞增殖、抑 制致癌活性，诱发、诱导癌细胞分化凋亡，抗肿瘤侵袭和转移，逆转肿瘤耐药性的抗癌、防癌 作用，还可以提高化疗的效果、克服化疗的毒副作用，增强机体免疫机能，全面恢复患者体 质[人参皂苷药理研究进展，中国临床药理学与治疗学，2006，11(11) :1201-1206]。大量现代研究证明人参总皂苷对中枢神经系统、心血管系统、内分泌系统、物质代 谢、免疫功能均有影响，此外人参具有抗肿瘤、抗衰老作用、增强机体适应性、抗肝损伤作 用、缓解吗啡成瘾的作用。可用于防治心血管疾病，胃和肝脏疾病，糖尿病，神经衰弱，人 参还有提高视力及增强视觉暗适应的作用，此外，人参还可以治疗抑郁型和无力型精神病 [人参皂苷药理作用，世界最新医学信息文摘，2003,2(1) 534-536]。积雪草苷能抑制成纤维细胞增殖、降低转酰胺酶活性、减少酸性粘多糖和胶原 量、抑制结缔组织的基质和纤维成分的过度增生。实验证明其能促进皮肤生长，局部的 细胞增生，结缔组织、血管网增生，使黏液分泌增加等功效。积雪草苷促进创伤组织 愈合，治疗瘢痕，防治乳腺增生，保护胃粘膜，抗焦虑，抗细胞毒素，缓解压力，抗麻风，抗 菌，抗丝虫，抗结核，镇痛，抗炎作用[积雪草苷药理作用及其机制的研究进展，广东医 学，2009，30(4) 649-651]。苦瓜总皂苷具有降血糖、抗肿瘤、抗生育、抗病毒、抗菌、免疫调节等多种药理活 性，其中降血糖活性最为显著，也最为研究者认同。在传统中医领域中的《救荒本草》和《本 草纲目》等古文献里，都曾经提到苦瓜能止渴，主治烦热渴引饮，在治疗消渴症即糖尿病方 面有独特功效[苦瓜的药用研究概况[J]，浙江中医学院学报，2001, 25(4) 73-74]。洋参总皂苷具有抗衰老、增强免疫、降脂作用，对心血管系统有影响，近年国内外 研究表明，还具有抗疲劳、镇静、抗惊厥、抗应激等作用。其中Rb3具有钙通道阻滞作用，Rb1具有抗氧化、清除自由基作用。同时，还具有抗缺糖缺氧作用，其抗致突变作用，为预防癌症 提供资料。其还被证实具有抑制单纯疱疹病毒I型(HSV-I)复制的作用，对HSV-I感染细 胞具有保护作用[西洋参茎叶皂甙药理研究概况，特产研究，2000，7:55-57]。三七总皂苷具有镇静、镇痛、益智作用；对心肌有保护作用，抗心律失常，降血 脂，防止动脉粥样硬化，降血压；改善脑血循环，对实验性脑缺血有保护作用；抗血栓形成、 促进造血细胞生长；还具有抗炎、抗纤维化、抗衰老、抗氧化、抗肿瘤作用，其在化学成分上 与人参总皂苷相似，因此具有人参样的滋补、强壮作用[三七皂苷药理作用研究进展，中 国兽药杂志，2005，39 (1) 33-37]。绞股蓝具有抗肿瘤、降血脂减肥、降血糖、治哮喘、治动脉硬化、抗溃疡、镇静、止 痛、保肝、调理神经、强壮补益、抗衰防老等广泛生理活性，而且毒性低，副作用小。必将在防 治疾病，强壮补益，抗衰老等方面发挥重要的作用[绞股蓝药理作用及临床应用进展，中 医药信息，2002，19(4) 11-14]。枣仁具有镇静催眠、镇痛、抗惊厥、降血脂、抗血小板聚集、增强免疫功能、降压、抗 缺氧、抗心肌缺血、抗心率失常、抗衰老、抗辐射等作用[酸枣仁的化学成分和药理作用研 究进展，食品工业科技，2009，3:348-350]。鉴于上述人参属植物及富含皂苷类物质的特殊作用和广泛的应用价值及传统工 艺及上述方法的缺欠和不足，有必要通过探索应用新型提取分离技术进行工艺改进，以提 高产品的质量，降低生产成本。闪式提取技术是利用快速破碎、剧烈搅拌、超速动态分子渗透作、强力振动作用， 数分钟内可将有效成分快速转移到溶剂内，提取效率是传统方法的百倍以上。与常规提取 方法相比，能大大的缩短提取时间，降低提取成本，提高有效成分的转移率。
本发明的目的是改进现有制备人参皂苷的提取工艺，提高有效成分的提取率，简 化生产工艺，降低生产成本。本发明所用的提取器为河南金鼐公司生产的各类型号的快速提取装置——闪式 提取器。本发明是通过如下技术方案实现的
富含皂苷类物质的药材中提取有效成分的新方法，是以富含皂苷类物质的药材为原 料，经破碎加入倍量各种溶剂后，应用闪式提取器，在低温(室温)下进行组织破碎、快速高 效提取的方法，提取5秒-10分钟内完成，提取1-5次；加入溶剂量为药材重量的1-10倍， 提取温度为20-60°C，提取时“调速旋钮”旋转到“4-5”即提取时电压为100-150V。所述的富含皂苷类物质的药材选自人参属植物、绞股蓝、积雪草、酸枣仁、盒子草、 乌拉尔甘草、光果甘草、胀果甘草、柴胡、牛膝、常春藤、大豆、雷公藤、白头翁、老鼠簕、枇杷、 熊果叶、桅子果实、女贞叶、车前草、白花蛇舌草、石榴叶、石榴果实、地榆、远志、异株泻根、 灵芝。所述的人参属植物选自人参、珠子参、竹节参、西洋参、三七。所用的溶剂为水、甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷、石油 醚、正己烷及它们的任意比例的混合溶剂。
所述的组织破碎应为10-40目，加入溶剂量为药材的1-10倍。所述的提取温度为20-50°C (室温)。本发明的提取方法在10分钟内完成多次提取，即通常在提取5秒-3分钟内完成， 提取2-3次；有效成分含量提高10-50%。为达到本发明的目的，制备三七皂苷时，选用三种不同的提取方法(闪式提取 法、超声波提取法、加热回流提取法)对三七根、根须、芦头、剪口、花蕾、果实、茎、叶进行了 提取工艺的考察，并通过采用高效液相法对三七不同部位所含的主要单体皂苷进行了测 定，优选出最佳提取方式。超声波提取法精密称取三七的根、根须、芦头、剪口、花蕾、果实、茎和叶各5. 00 g，分别加入10倍量的70%乙醇，超声提取20 min,提取2次，每次20 min,过滤，合并2次 滤液，减压回收乙醇至干，分别称重，计算各自收率(见表)。各取所得浸膏0.5 g，甲醇溶于5 mL容量瓶中，定容，离心，取上清液，过0.45 μ m 滤膜，即得供试品溶液。加热回流提取法精密称取三七的根、根须、芦头、剪口、花蕾、果实、茎和叶各 5. OOg,分别加入10倍量的70%乙醇，回流提取3h，过滤提取液，再加入7倍量70%乙醇回流 提取2.5 h，过滤提取液，合并两次的滤液，浓缩回收，各自称重，提取率见表1。各取所得浸 膏0.5 g，甲醇溶于5 mL容量瓶中，定容，离心，取上清液，过0.45 μ m滤膜，即得供试品溶 液。闪式提取法精密称取三七的根、根须、芦头、剪口、花蕾、果实、茎和叶各5. 00 g， 分别加入10倍量的70%乙醇，闪式提取3 min,过滤提取液，浓缩回收，各自称重，提取率见 表1。各取所得浸膏0.5 g，甲醇溶于5 mL容量瓶中，定容，离心，取上清液，过0.45 μπι滤 膜，即得供试品溶液。表1三七各部位三种提取方法的收率比较


本发明属于医药技术领域，涉及一种人参属植物及富含皂苷类物质的药材中闪式提取有效成分的新技术，涉及一种快速获得中药有效成分的提取方法。具体涉及皂苷类药材中有效成分的提取方法改进。其方法是将人参属以及富含皂苷的植物粉碎后置于闪式提取罐中，加入倍量提取溶剂，在50℃以下(室温)，在10分钟内完成多次提取。本发明具有以下优点(1)有效成分含量高，且不被破坏；(2)提取的时间短，效率高，(3)能耗相对较低；(4)操作简便，易于推广使用。