专利名称:一种分离富集外周血非血源性细胞的装置的制作方法母体外周血胎儿细胞和外周血循环肿瘤细胞、癌细胞栓等非血源性细胞的分离鉴定对实践有重大的意义。母体外周血胎儿细胞的分离鉴定对于产前诊断、出生缺陷的诊断与预防具有重要的实用价值。外周血循环肿瘤细胞(癌细胞)和癌细胞栓(团)的分离与鉴定、癌细胞的培养与癌细胞的基因分析,对于肿瘤的转移、肿瘤的复发、肿瘤化疗药物的敏感性测定、肿瘤的预后及早期诊断具有重要应用价值。目前,国外分离外周血肿瘤细胞主要有三类,一类用细胞相关的单克隆抗体包被的磁珠通过磁场分离细胞,该方法虽然分离效果好,但技术复杂、试剂昂贵、只能分离70% 左右的肿瘤细胞,且要另外进行免疫组化和细胞遗传学反应,不能在同一装置内进行反应, 操作步骤多,耗费时间长;另一类利用膜截留技术,采用自动化的真空抽吸装置分离外周血肿瘤细胞,但可漏掉体积较小的肿瘤细胞,并且分离和鉴定工作是分步进行,不能在同一装置内进行分离鉴定工作,在细胞转移的过程中可能丢失已分离到的肿瘤细胞。母体外周血胎儿细胞的分离,尚未见有商品化的装置。第三类是利用细胞分离液进行密度梯度离心法获取癌细胞,其中癌细胞丢失较多。
图1为上反应通道的结构示意图;图2为下反应通道的结构示意图;图3为实施例1分离富集外周血非血源性细胞的装置的结构示意图;图4为上反应通道与下反应通道的装配结构图;图5为实施例2分离富集外周血非血源性细胞的装置的结构示意图。实施例1如图1、2、3、4所示的分离富集外周血非血源性细胞的装置,包括上下紧密贴合固定的圆柱体形上反应通道1和下反应通道3,上反应通道1和下反应通道3之间设有膜性物质5,上反应通道1与下反应通道3之间采用螺纹连接进行固定,上反应通道1下部的内壁上设有内螺纹,下反应通道3上部的外壁上设有与内螺纹适配的外螺纹,内螺纹顶端位置处的上反应通道1内壁上设有凸台11,膜性物质5设置于下反应通道3的顶部与上反应通道1凸台11之间,上反应通道1的顶部设有接口 2,下反应通道3的底部设有废液出口 4。膜性物质5为聚碳酸酯膜或硝酸纤维素膜,本领域技术人员可以根据实际分离细胞的大小对膜性物质5的孔径进行选择,膜性物质5上可以包被抗体,特异性捕获相应的目标细胞。使用时,将上反应通道1顶部的接口 2与盛细胞溶液的试管样容器连接,下反应通道3底部的废液出口 4与负压装置连接,进行负压抽滤,试管样容器内的细胞溶液渗滤或垂直流动通过膜性物质5,膜性物质5分离截留细胞溶液标本中需要分离的目标细胞,实现细胞的分离富集,通过膜性物质5的废液直接被抽滤排出下反应通道3外;然后可以把免疫组化的染色液等试剂加到膜性物质5上进行免疫组化染色反应或者进行荧光染色,从而鉴定出目标细胞,从而实现目标细胞的分离和鉴定。实施例2如1、2、3、4、5所示的分离富集外周血非血源性细胞的装置,包括一底座7,底座7上设有多个放置孔6,放置孔6内设置有反应单元,反应单元为实施例1的分离富集外周血非血源性细胞的装置,包括上下紧密贴合固定的上反应通道1和下反应通道3,放置孔6的最下方的孔径小于下反应通道3的外径,如此可同时检测多个标本,通过膜性物质5的废液直接被抽滤排出下反应通道3外。 使用方法与实施例1相同,另外可同时将多个反应单元放置于底座7的放置孔6 内,实现多个标本的检测,方便快捷。
一种分离富集外周血非血源性细胞的装置制作方法
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