美洲大蠊的提取方法及所得提取物和用途 [0002] 美洲大蠊（Periplaneta americana L.)，为昆虫纲蜚蠊目蜚蠊科大蠊属昆虫，俗 称蟑螂，其入药始载于《神农本草经》，其味性寒味咸，有毒，有辛辣味、有散瘀、消积、解毒、 利水、消肿等功能。主治儿童疳积、扁桃腺炎、身体包块、痈疮肿痛和蜈蚣、毒蛇咬伤等。 [0003] 现代研究发现，美洲大蠊多用于口腔溃疡、食道溃疡、食道粘膜损伤、胃出血、胃及 十二指肠溃疡、外部创伤、烧烫伤、糖尿病性溃疡、阴虚肺痨、肺结核等多种疾病的治疗。 [0004] 当前研究认为，美洲大蠊的主要有效成分为氨基酸、多肽类成分。目前的制剂生 产工艺中，总氨基酸的提取通常采用热回流法。吴红梅等研究了不同提取方式对美洲大蠊 主要成分的提取效果，分别采用85%乙醇进行回流或闪式提取，其中，闪式提取液中总氨基 酸的含量分别为5. 63、5. 69、5. 65、5. 56、5. 77mg/g，回流提取液中分别为5· 69、5· 87、5· 71、 5.65、5.84!^/^，两者相比，总氨基酸含量基本一致(吴红梅，等，闪式与回流提取美洲大蠊 总氨基酸的工艺比较，中国实验方剂学杂志，2012年18卷21期)。
[0005] 本发明的目的在于提供一种美洲大蠊的提取方法。本发明还提供了一种美洲大蠊 提取物及其用途。
[0006] 本发明提供了美洲大蠊的提取方法：取美洲大蠊，以水为溶剂，经闪式提取制备得 到的；所述闪式提取的工艺参数为：提取时间1?5min/次，电压50?150V，提取1?4次。
[0007] 更进一步地，所述闪式提取的工艺参数为：提取时间3min/次，电压90V，提取2 次。
[0008] 进一步地，水为美洲大蠊的8?16倍。
[0009] 更进一步地，水为美洲大蠊的10倍。
[0010] 本发明还提供了上述方法制备的美洲大蠊提取物。
[0011] 进一步地，该提取物中，总肽含量在〇. 8%以上，游离氨基酸含量在2. 0%以上。
[0012] 本发明还提供了上述美洲大蠊提取物在制备抗肝损伤的药物中的用途。
[0013] 进一步地，所述药物是降低血清转氨酶、抗氧化的药物。
[0014] 更进一步地，所述血清转氨酶为血清谷丙转氨酶或谷草转氨酶。
[0015] 本发明还提供了一种药物组合物，它是含有上述美洲大蠊提取物的制剂。
[0016] 本发明美洲大蠊的提取方法，操作简便，耗时短，能耗低，所得提取物抗肝损伤药 效活性明显优于其他提取方法，且作用更为全面，有效提高了美洲大蠊药材的利用率，降低 了生产成本，具有良好的工业应用前景。
[0017] 虽然现有研究表明，采用回流、闪式提取方法所得的美洲大蠊提取物中有效成分 氨基酸的含量基本一致，然而，本发明使用特定的提取溶剂和提取参数所得的闪式提取物， 其抗肝损伤活性优于回流和温浸提取，特别以对血清转氨酶的降低作用最为显著。




[0018] 图1美洲大蠊提取物对小鼠肝组织病理形态的影响


[0019] 实施例1美洲大蠊的提取方法
[0020] 取50°C烘干的美洲大蠊药材最粗粉适量，室温下加10倍量水，进行闪式提取，其 中，每次提取时间为3min，电压为90V，提取2次，滤过，合并滤液，即得美洲大蠊提取物。
[0021] 实施例2美洲大蠊的提取方法
[0022] 取实施例1制备的美洲大蠊提取物，减压浓缩，加入适量糊精、淀粉，制备颗粒剂、 胶囊剂或片剂。
[0023] 以下通过试验例说明本发明的有益效果。
[0024] 试验例1
[0025] 1材料与仪器
[0026] 1. 1 材料
[0027] 美洲大蠊药材(购自云南腾冲，经生药教研室卢先明教授鉴定为昆虫纲有翅亚纲 蜚蠊目蜚蠊科大蠊属昆虫美洲大蠊Periplaneta americana L.)
[0028] 昆明种小白鼠(成都达硕生物科技有限公司，体重18?22g，雌雄各半）
[0029] 牛血清白蛋白标准品（BSA，中国药品生物制品鉴定所，140619-201120)
[0030] 丙氨酸标准品（中国药品生物制品鉴定所，140680-201002)
[0031] 联苯双酯滴丸(浙江医药股份有限公司新昌制药厂，120801，1. 5mg*250丸）
[0032] 1. 2 仪器
[0033] 数显恒温磁力搅拌器(上海梅颖浦88-1)
[0034] 紫外-可见分光光度计（日立UV-1700)
[0035] 2方法与结果
[0036] 2. 1提取物的制备方法取50°C烘干的药材最粗粉适量，室温下分别加10倍量水或 乙醇，分别按回流法（lh/次)、闪式提取法（3min/次，90V)和磁力搅拌提取法（1此/次）提 取，各2次，滤过，合并滤液，分别制得水回流、95%乙醇回流、水闪式、95%乙醇闪式、7K搅拌、 95%乙醇搅拌提取液，分别简称为A-F。
[0037] 2. 2抗CC14型急性肝损伤作用研究
[0038] 2. 2. 1供试药液的制备按2. 1方法提取，减压浓缩并以0. 5%CMC_Na配制成浓度为 lg · πιΓ1的供试药液。阳性药联苯双酯滴丸粉末以0. 5%CMC-Na配制成浓度为15mg/ml的 混悬液。
[0039] 2. 2. 2给药及造模取小鼠100只，雌雄各半，随机分为10组，每组10只，即空白对 照组、溶剂对照组、模型对照组、阳性对照组、提取物A-F组。除空白对照组ig纯净水，溶剂 对照组和模型对照组ig〇. 5%CMC-Na以外，其余组均ig相应药物（10ml · (kg · dK1)，连续 10d。末次给药后参照文献对除空白、溶剂对照组以外各组ipO. 2%CC14油溶液（10ml ?kg4) 复制模型。24h后眼球取血，分离血清；处死小鼠后立即解剖取全肝和脾脏。
[0040] 2. 2. 3指标检测测定血清谷丙转氨酶（ALT)、谷草转氨酶（AST)活性及丙二醛 (MDA)含量、超氧化物歧化酶（S0D)活性；全肝与脾脏称定质量，计算脏器系数；分离肝左叶 固定于10%福尔马林中送检。
[0041] 2. 2. 4数据处理采用SPSS17. 0软件进行统计处理。实验结果以均数土标准差 (S土.9)表示，以单因素方差分析比较组间差异。
[0042] 2. 2. 5药效比较
[0043] 表1美洲大蠊提取物对小鼠血清转氨酶活性的影响n=10)
[0044]