专利名称：类固醇硫酸酯酶抑制剂以及它们的制备和应用方法 绝经期妇女乳房肿瘤血浆中的雌激素水平至少比正常的雌激素水平高10倍。在这些肿瘤中雌激素处于高水平是因为在原处就可形成雌激素，这可能是通过雌酮硫酸酯酶的作用将雌酮硫酸酯转化为雌酮。因此，雌酮硫酸酯酶的抑制剂有可能成为雌激素依赖型乳癌的治疗剂。大多数雌酮硫酸酯酶抑制剂是天然的甾类化合物。虽然雌酮-3-O-氨基磺酸酯(EMATE)被认为是最好的雌酮硫酸酯酶抑制剂，近来已经证明雌化合物是有效的雌激素。因此，该化合物不能用于治疗雌激素依赖型的疾病。Reed和他的同事报道了雌酮-3-O-甲基硫代膦酸酯、雌酮-3-O-烷基和芳基磺酸酯、雌酮-3-O-膦酸酯和硫代膦酸酯和雌酮氨基磺酸酯硫酸酯酶抑制活性Duncan等人，″Inhibition of EstroneSulfatase Activity by Estrone-3-methylthiophosphonate″，Cancer Res.53298-303(1993)；Howarth等人，″Phosphonates andThiophosphonates as Sulfate SurrogatesSynthesis of Estrone-3-methyithiophosphonate，a Potent Inhibitor of EstroneSulfatase″，Bioorg.Med.Chem.Lett.3313-318(1993)；Howarth等人，″Estrone SulfamatesPotent Inhibitor of EstroneSulfatase with Therapeutic Potentiai″，J.Med.Chem.37219-221(1994)；和Purohit等人，″In vivo Inhibition of OEstrone Sulphatase and Dehydroepiandrosterone Sulphatase by OEstrone-3-O-sulphamate″，Int.J.Cancer，63106-111(1995)。Li和他的同事报道了带有雌酮核的磺酸酯或其类似物、亚甲基磺酸酯和磷酸酯的合成以及硫酸酯酶抑制活性，参见Li等人，″Synthesis and Biochemical Studies of Estrone SulfataseInhibitor″，Steroids，58106-111(1993)；Dibbelt等人，″Inhibition of Human Placental Steryl Sulfatase by SyntheticAnalogs of Estrone Sulfate″，J.Steroid Biochem.Molec.Biol.，50(5/6)261-266(1994)；和Li等人，″Estrone Sulfate Analogsas Estrone Sulfatase Inhibitor″，Steroids 60299-306(1995).Estrone-3-amino derivatives are reported in Selcer等人，″Inhibition of Placental Estrone Sulfatase Activity and MCF-7Breast Cancer Cell Proliferation by Estrone -3-aminoDerivatives″，J.Steroid Biochem.Molec.Biol.，59(1)83-91(1996)。U.S.P 5,567,831涉及非甾体雌酮硫酸酯酶化合物在治疗雌激素依赖型疾病中的应用。U.S.P 5,571,933涉及雌-1，3，5(10)三烯-17-酮，3-氨基化合物和这些化合物在治疗雌激素依赖型疾病中的应用。U.S.P 5,556,847和5,763,492分别涉及甾族和非甾族雌酮硫酸酯酶抑制剂，以及应用这些抑制剂有效地增强记忆，但是没有公开应用这些抑制剂治疗雌激素依赖型疾病。U.S.P 5,616,574和5,604,215公开了类固醇硫酸酯酶抑制剂和它们的使用方法。与本发明公开的化合物相反，该专利所公开的化合物是有效的雌激素，并可代谢形成雌酮。U.S.P 5,763,432公开了雌酮硫酸酯酶的类固醇抑制剂，该专利里没有公开本发明的化合物，或在类固醇核的C17上的取代基与细胞膜的脂双层相互作用的化合物。
因此就需要有有效的硫酸酯酶抑制剂，该抑制剂对代谢是稳定的，选择性更好，并且没有雌激素活性。
本发明还涉及所公开的类固醇硫酸酯酶抑制剂的合成方法。
此外，本发明还涉及将这些化合物用作硫酸酯酶抑制剂的方法。这些方法通常包括将一种或多种本发明化合物与适当的药用载体结合，并给患者施用治疗或预防有效量的本发明化合物。
本发明的另一方面是提供了用于抑制身体中产生的类固醇硫酸酯酶的化合物。
本发明的另一方面是提供了雌酮硫酸酯酶抑制剂化合物，该化合物具有抗肿瘤活性，或与抗雌激素和芳香酶抑制剂有协同增效作用。
本发明的另一方面是提供了具有治疗雌激素依赖型疾病活性的雌酮硫酸酯酶抑制剂化合物。
本发明的另一方面是提供了用本发明的硫酸酯酶抑制剂化合物给患者进行治疗或预防的方法。
本发明的另一方面是提供了硫酸酯酶抑制剂化合物的衍生物，该衍生物不会代谢成雌激素。
根据说明书下面的描述和所提交的权利要求书，本领域的熟练技术人员就会更完整地理解本发明的各个方面。


图1一般性的说明了雌酮硫酸酯酶的反应途径。
图2说明了在图中表示为“R3”的C17取代基与细胞膜的脂双层相互作用的方式。
图3说明了按照实施例1的方法制备第一类化合物的流程图。
图4说明了按照实施例2的方法制备第二类化合物的流程图。
图5说明了按照实施例2的方法制备第二类化合物的流程图。
图6说明了按照实施例2的方法制备第二类化合物的流程图。
图7说明了按照实施例3的方法制备第三类化合物的流程图。
图8说明了制备第四类化合物的流程图。
图9说明了按照实施例5的方法制备第十类化合物的反应流程图。
图10说明了制备第十二类化合物的反应流程图。
图11说明了按照实施例4的方法制备第二类化合物的流程图。
图12说明了按照实施例6的方法制备第六类化合物的流程图。
发明的详细描述本文所用的术语“患者”动物界的成员，包括但不限于人。
本发明涉及下式2化合物 其中R1和R2各自独立地选自氢和具有1-6个碳原子的低级烷基；R3选自下述基团 R4和R5各自独立地选自氢、具有1-14个碳原子的直链或支链烷基基团，具有1-6个碳原子的直链或支链烷氧基基团；R6选自氢和具有1-14个碳原子的直链或支链烷基基团；R7选自-N(R12)(R13)、-OR14、氢和具有1-14个碳原子的直链或支链烷基基团，R12和R13各自独立地选自氢、具有1-14个碳原子的直链或支链烷基基团，具有1-6个碳原子的直链或支链烷氧基基团，以及R14选自氢和具有1-14个碳原子的直链或支链烷基基团；R8选自氢和具有1-6个碳原子的直链或支链烷基基团；R9选自具有1-15个碳原子的直链或支链的链烷酰基、具有1-14个碳原子的直链或支链烷基基团、CO(CH2)mCH3和COR10；R10是具有1-14个碳原子的直链或支链烷基基团，但是当烷基是C1或C2烷基时，所述的烷基不是支链的；m是0-2；R11是具有3-14个碳原子的支链烷基基团；和X和Y都是碳原子，以及X和Y之间的键是单键或是双键，但是当R3是-N(R8)(R9)时，X和Y之间是单键的情况除外。
正如本领域熟练技术人员可以理解的，这些化合物是雌酮类，更具体地说是1，3，5(10)-三烯。适当的类固醇环系包括下述取代的雌酮2-OH-雌酮2-甲氧基-雌酮4-OH-雌酮6-α-OH-雌酮7-α-OH-雌酮7-α-烷基酰胺基-雌酮16-α-OH-雌酮16-β-OH-雌酮本发明进一步涉及具有下式(3)的化合物 其中R3选自下述基团 R4和R5各自独立地选自氢、具有1-14个碳原子的直链或支链烷基基团，具有1-6个碳原子的直链或支链烷氧基基团；R6选自氢和具有1-14个碳原子的直链或支链烷基基团；R7选自-N(R12)(R13)、-OR14、氢和具有1-14个碳原子的直链或支链烷基基团，R12和R13各自独立地选自氢、具有1-14个碳原子的直链或支链烷基基团，具有1-6个碳原子的直链或支链烷氧基基团，以及R14选自氢和具有1-14个碳原子的直链或支链烷基基团；R8选自氢和具有1-6个碳原子的直链或支链烷基基团；R9选自具有1-15个碳原子的直链或支链的链烷酰基、具有1-14个碳原子的直链或支链烷基基团、CO(CH2)mCH3和COR10；R10是具有1-14个碳原子的直链或支链烷基基团，但是当烷基是C1或C2烷基时，所述的烷基不是支链的；m是0-2；R11是具有3-14个碳原子的支链烷基基团；X和Y都是碳原子，以及X和Y之间的键是单键或是双键，但是当R3是-N(R8)(R9)时，X和Y之间是单键的情况除外；和K是氮和L是碳，以及K和L之间的键是单键或是双键。
对式2或3所表示的化合物而言，当“X”、“Y”和“L”都是碳时，“K”是氮；连接X和Y以及K和L的键通常是单键或是双键。可以理解的是，当键是单键时，在X和K上连接有一个氢，Y和L上连接有两个氢。
因此，一些雌酮是本发明的内容。为了便于参照，根据所连接的“R3”的不同，上述式2或式3的化合物在本文中被称为第1类至第12类化合物，如下表1所述第1至第6类是关于式2化合物，第7至第12类是关于式3化合物。
表1 优选的，R1和R2都是氢。进一步优选的实施方案包括其中m等于2的第1和第7类化合物；R4和R5都是甲基的第2和8类化合物；R4是氢，和R5是具有1-8个碳原子的直链或支链烷基和具有1-3个碳原子的直链或支链烷氧基基团的第2和8类化合物；R4是具有1-5个碳原子的直链或支链烷基基团，和R5是具有1-6个碳原子的直链或支链烷基基团的第2和8类化合物；R6是具有1-8个碳原子的直链或支链烷基，特别是CH2CH3的第3和9类化合物；R7是具有1-8个碳原子的直链或支链烷基，特别是具有3个碳原子的直链烷基(丙基)的第4和10类化合物；R7是-N(R12)(R13)，R12和R13均是氢、甲基、丙基或异丙基；或R12是乙基和R13是异丙基的第4和10类化合物；R11是具有3-8个碳原子的直链或支链烷基，特别是具有3个碳原子的支链烷基(异丙基)的第5和11类化合物；R8是具有1-6个碳原子的直链或支链烷基，和R9是具有2-8个碳原子的直链或支链烷基或具有1-8个碳原子的直链或支链的链烷酰基的第6和12类化合物；以及R8是氢和R9是具有4个碳原子的直链或支链的链烷酰基的第6和12类化合物。
本发明化合物可用作硫酸酯酶抑制剂。这些化合物通常含有取代的类固醇核。所述的取代基连接于类固醇核的C17位。在式2和3中用“R3”基团表示。因为在本发明类固醇核C17位的取代基是唯一的取代基，因此在酶失活后释放出来的类固醇分子不是雌激素。本发明化合物的功能在其活性位点上是不可逆转的雌酮硫酸酯酶抑制剂。氨基磺酸酯基团可以雌酮硫酸酯酶的途径识别和结合于类固醇硫酸酯酶或雌酮硫酸酯酶，因此可防止雌酮硫酸酯向雌酮的转化。雌酮硫酸酯酶途径如图1所示。
此外，与没有这些取代基的化合物相比，类固醇核C17位上唯一的取代基使硫酸酯酶抑制作用提高。因为雌酮硫酸酶是膜键合酶，本文所述C17位的取代基造成了取代基和患者的多种膜的细胞膜的脂双层之间疏水的相互作用。这种相互作用使抑制剂与酶的结合亲和力增加。如图所述，C17位的取代基(R3)和膜的脂双层的两层(14和16)作用。疏水的相互作用使取代基保持在双层之中。这种附加的结合位点导致更强的硫酸酯酶抑制活性。
本发明进一步涉及上述化合物的合成，各种反应流程如图3-12说明。
图3给出了其中的R1和R2都是氢，R3是 和m等于2的式2化合物的合成。图4、5和6说明了第二类化合物的合成。图4中合成的具体化合物通常由式2表示，其中的R1和R2都是氢，R3是 和R4是氢、甲基、丙基或异丙基，以及R5是与图4、5和6中的化合物11a-11s相应的任何“R5”基团。
图7是第三类化合物的合成，该化合物通常由上述式2表示，其中的R3是-C(O)OR6。图7所示的第三类化合物的具体实施方案由式2表示，其中的R1和R2都是氢，和R6是具有3个碳原子的直链烷基。图8说明了第四类化合物的合成，所述的化合物通常表示为其中R3是-C(O)R7的上述式2化合物。图8所示的第四类化合物的具体实施方案由式2表示，其中的R1和R2都是氢，和R7是具有3个碳原子的直链烷基。本领域熟练技术人员可以理解的是，所述各图要说明的各种化合物的具体实施方案通常都表示为式2；按照各图所示的这些反应流程和进行必要的取代反应，本领域熟练技术人员很容易制备具有不同“R”基团和不同“m”值的其它式2化合物。
图9和图10给出了制备第10和第12类化合物的合成路线。更具体地，图9描述了第10类化合物的合成，该化合物通常以式3化合物表示，其中R3是-C(O)R7，R7是-N(R12)(R13)，R12是氢和R13是具有3个碳原子的直链烷基(丙基)。图10表示第12类化合物的合成，由上述式3表示，其中R3为-N(R8)(R9)，R8为氢，R9为具有3个碳原子的直链烷酰基。再则，按照图9和图10所说明的反应流程，具有各种取代基的，通常用上述式3表示的化合物可用必要的化合物制备，得到所需的硫酸酯酶抑制剂。
图11说明了第二类化合物的合成。图11中合成的具体化合物通常表示为式2，其中R1和R2都是氢，R3是 和R4是氢或甲基，以及R5是与图11中的化合物29d、29e、29g、29h和29m相应的“R5”基团之一。
图12说明了第6类化合物的合成。图12中合成的具体化合物通常表示为式2，其中R1和R2都是氢，R3是-N(R8)(R9)，R8是氢和R9是丁酰基。
本发明还涉及用上述化合物治疗和/或预防患者的雌激素依赖型疾病的方法。这些疾病包括但不限于乳癌、阴道癌、子宫癌、卵巢癌和子宫内膜异位。
本发明的方法包括以下步骤a)将一种或多种本发明化合物与适当的药用载体结合；和b)给患者施用治疗有效剂量的或是预防有效剂量的，与载体结合的本发明化合物。
术语“适用的药用载体”指在药学工艺领域为给予病人服用化合物而使用的任一载体。任何适用的药用载体只要不产生相容性问题都是可以使用的。优选的药用载体是生理盐水(0.9％氯化钠)，95％葡萄糖水溶液。
给病人服用有效剂量或有效量的硫酸酯酶抑制剂可采用非肠胃注射的方法，如静脉注射、鞘膜内注射、肌内注射或动脉注射。这些化合物还可口服或经皮肤使用，或由本领域专业技术人员熟悉的任何其他方法服用。口服是优选的。
这里所使用的术语“有效量”和“有效剂量”指为在病人中达到最低某种水平的酶抑制作用所需要的这里所公开的一种或多种化合物的量。具体地说，是足以影响病人达到所希望结果或所希望治疗的量，如减少肿瘤大小或降低雌激素浓度。术语“治疗有效量”指为治疗病人所需要的本发明的一种或多种化合物的量。这种治疗适于雌激素依赖的病人。同样，“预防有效量”指为预防处理病人所需要的本发明的一种或多种化合物的量。这种处理适于为防止肿瘤增长而进行了外科手术的病人；本发明化合物能够用来抑制新出现的肿瘤细胞的增长。人们会认识到，在“治疗”和“预防”间存在有重叠。
正像本领域的专业技术人员所认识到的那样，选定的化合物的剂量、服用的方法和治疗期限将取决于被治疗的个体情况，考虑的因素包括所治疗的具体激素依赖病、病人的体重、对病人采用的其他治疗和病人的状况、临床反应和耐性。剂量、服用的方法和治疗期限由专业人员对这些因素进行评价后确定。典型的病人是绝经后的妇女和实施了卵巢切除的绝经前的妇女。虽然剂量和服用方法因病人而变化，但一般的剂量在0.005mg-2mg本发明化合物/每公斤体重，而且是每天都要服用。
实施例下面的实施例旨在说明本发明，但不应以任何的方式构成对本发明的限制。
对所有的实施例，化学品和硅胶购自Aldrich Chemical Company(Milwaukee，WI)。化学品由薄层色谱和NMR进行纯度检查。生物化学品、雌酮和雌酮硫酸酯购自Sigma Chemical Company(St.Louis，MO)。[6，7-3H]雌酮硫酸酯购自Dupon Company。熔点在Thomas Hoover毛细管熔点仪上测定，未校正。质子NMR谱用Bruker WH-300(300MHz)分光光度计获得。元素分析由Atlantic Microlab Inc.(Norcross，GA)完成。放射性样品用Packard Tri-Carb4530和Beckman LS-6500液体闪烁计数器分析。液体闪烁鸡尾酒是Ecolume(ICN，CostaMesa，CA)，和Packard Utima Gold。
实施例1第一类化合物的制备参考数据对应于图3。苄氧基雌酮(化合物2)的制备向在丙酮(150ml)中含5g(22mmol)化合物1的雌酮(化合物1)溶液加入K2CO3(4.56g，33mmol)和苄基溴(3.9ml，33mmol)。使该溶液回流2天，将溶液蒸干，用乙酸乙酯萃取。干燥(Na2SO4)乙酸乙酯层，将溶液蒸干，得到黄色固体。固体中的苄基溴用石油醚洗除，得到白色固体(化合物2)。该固体在下一步使用，无需进一步纯化(产率~81％)。3-苄氧基-17-(三氟甲磺酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯(化合物3)的合成在0℃向在CH2Cl2(70ml)中含4.8g(13mmol)化合物2的溶液加入2，6-二叔丁基-4-甲基吡啶(3g，14mmol)和三氟甲磺酸酐(6g，27mmol)。使该混合物在室温下搅拌5小时，过滤，滤液用10％碳酸氢钠溶液洗涤，而后干燥(Na2SO4)溶液，过滤，蒸发，色谱纯化(石油醚∶乙酸乙酯，2∶1)，得到黄色固体(5.2g，84.5％)(化合物3)。3-苄氧基-17-(N-丙基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯(化合物4)的合成将三氟甲磺酸酯化合物3(1.4g，3.02mmol)、乙酸钯(II)(60mg，0.26mmol)、1，3-双(二苯基膦基)丙烷(dppp)(110mg，0.26mmol)、三乙胺(2ml)和正丙胺(7ml)在二甲基甲酰胺(DMF，20ml)中的混合物在70℃加热，并用一氧化碳鼓泡5.5小时。而后该反应混合物由乙酸乙酯稀释，用10％盐酸(HCl)溶液、10％碳酸氢钠(NaHCO3)和盐水洗涤。有机层用硫酸钠(Na2SO4)干燥，浓缩，残留物由硅胶色谱纯化，石油醚∶乙酸乙酯(EtOAc)(4∶1)为洗脱液，得到纯α，β-非饱和酰胺(化合物4)(1.04g，80％)。
m.p.136-138℃；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.92(t，3H，CH2CH3)，0.99(s，3H，CH3)，3.22-3.29(q，2H，NHCH2)，5.0(s，2H，CH2Ph)，5.63(brs，1H，NH)，6.30(brs，1H，16-CH)，6.70(d，1H，ArH)，6.74-6.78(dd，1H，ArH)，7.17(d，1H，ArH)，7.29-7.42(m，5H，CH2Ph).3-羟基-17-(N-丙基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯(化合物5)的合成将化合物4(0.9g，2.09mmol)溶解在氯仿(30ml)中，并在室温下一次将三甲基硅碘化物(TMS-I，0.9ml，6.28mmol)加入到该反应混合物中，使该溶液在室温下搅拌3小时。将甲醇(15ml)加入到该溶液中，以淬火反应，减压蒸发甲醇。剩余的氯仿溶液用10％硫代硫酸钠溶液洗涤，以中和碘化物，该溶液用硫酸钠(Na2SO4)干燥。该溶液再蒸发，用色谱纯化，使用梯度洗脱液，从纯CH2Cl2到CH2Cl2中含10％乙酸乙酯，得到605mg化合物5，(85.1％)。 m.p.168.5-169℃；1HNMR(300MHz，CDCl3)δ0.92(t，3H，CH2CH3)，0.99(s，3H，CH3)，3.23-3.29(q，2H，NHCH2)，4.66(s，1H，OH)，5.64(brs，1H，NH)，6.30(brs，1H，16-CH)，6.55(d，1H，ArH)，6.59-6.63(dd，1H，ArH)，7.12(d，1H，ArH).化合物6的合成在0℃搅拌下向在CH2Cl2(30ml)中含有400mg(0.93mmol)化合物5和2，6-二叔丁基-4-甲基吡啶(DBMP)(0.6g，2.79mmol)的溶液分步加入氨磺酰氯(1g，8.6mmol)。在室温下使该溶液搅拌3.5小时。该溶液用水洗涤至到中性，用Na2SO4干燥，减压蒸发。所得到的固体用色谱纯化(CH2Cl2∶石油醚∶乙酸乙酯，2∶2∶1)，得到404mg化合物6(82.7％)。
m.p.185.3-186℃；1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.83(t，3H，CH2CH3)，0.91(s，3H，CH3)，3.04(t，2H，NHCH2)，6.34(brs，1H，16-CH)，6.98(d，1H，ArH)，6.99-7.02(dd，1H，ArH)，7.32(d，1H，ArH)，7.74(brs，1H，NHCH2)，7.89(s，2H，NH2).Analysis calculated for C22H30N2O4SC，63.13；H，7.22；N.6.69.Found C，63.36；H，7.24；N，6.63.17β-(N-丙基氨基甲酰基)-雌-1，3，5(10)-三烯-3-基氨基磺酸酯(7)的合成在7ml乙醇中含有108mg化合物6的溶液在氢气氛下同15mg钯(10wt.％，在活性碳上，50％湿基)搅拌5小时。用硅藻土过滤除去催化剂，滤液浓缩。残留物用硅胶色谱纯化(己烷∶乙酸乙酯，1∶1)，得到纯化合物7(87mg，80％)。1H NMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.59(s，3H，CH3)，0.84(t，3H，J＝7.3Hz，CH2CH3)，2.90(dt，2H，J＝5.8，7.3Hz，NHCH2)，3.07-3.20(m，1H，17-CH)，6.95(d，1H，J＝2.6Hz，ArH)，7.00(dd，1H，J＝2.6，8.6Hz，ArH)，7.33(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.46(brt，1H，J＝5.8Hz，NHCH2)，7.83(brs，2H，NH2).
实施例2第二类化合物的制备参考数据对应于图4，5和6给出的数字。17-(N-丁基氨基甲酰基)-3-(甲氧基)雌-1，3，5(10)，16-四烯(9a)的合成在0℃将草酰氯0.84ml加入到在25ml无水CH2Cl2中含750mg化合物8(描述在Tetrahedron Letters，26，1109-1112，1985)的溶液中。该溶液在室温下搅拌5小时。在除去溶剂和草酰氯后，将20ml的无水四氢呋喃(THF)加入到该反应混合物中。在0℃将4ml该溶液加入到在2mlTHF含有0.19ml丁胺的溶液中，使该溶液搅拌2小时。蒸发溶剂后，加入5ml水。形成的沉淀过滤，用3ml异丙基醚研制，得到化合物9a(124mg，70％)。17-(N-丁基氨基甲酰基)-3-(羟基)雌-1，3，5(10)，16-四烯(10a)的合成在-15℃，氮气氛下向在2ml无水CH2Cl2中含119mg化合物9a的溶液加入0.64ml BBr3(1M，CH2Cl2溶液)。使该反应溶液在室温下搅拌1.3小时，在0℃加入乙醇和水淬火。有机层分离，含水层用氯仿(CHCl3)萃取。合并有机层，用Na2SO4干燥，真空浓缩。残留物用2.5ml EtOAc和2.5ml己烷研制，得到化合物10a(89mg，78％)。17-(N-丁基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11a)在0℃将氢化钠(20mg)加入到在2ml无水DMF含73mg化合物10a的溶液中。使该溶液搅拌25分钟，一次加入126mg氯代磺酰胺。而后使该溶液在室温下搅拌2小时。向该反应混合物加入冰和饱和碳酸氢钠溶液。形成的沉淀过滤，用水洗涤。残留物用硅胶色谱纯化(CHCl3∶甲醇，50∶1)，得到化合物11a(85mg，96％)。
FAB-MS m/z 433(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.88(t，3H，J＝7.5Hz，CH2CH3)，0.91(s，3H，CH3)，3.08(dt，2H，J＝5.6，6.6Hz，NHCH2)，6.34(s，1H，16-CH)，637(s，1H，ArH)，7.01(dd，1H，J＝2.6，8.6Hz，ArH)，7.33(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.71(t，1H，J＝5.6Hz，NHCH2)，7.88(s，2H，NH2).17-(N-戊基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11b)按照合成氨基磺酸酯11a所描述的类似方法，从化合物8制备化合物11b。 FAB-MS m/z 447(M＋H)+；1H NMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.87(t，3H，J＝6.7Hz，CH2CH3)，0.91(s，3H，CH3)，3.07(dt，2H，J＝5.8，6.6Hz，NHCH2)，6.34(s，1H，16-CH)，6.97(s，1H，ArH)，7.01(dd，1H，J＝2.3，8.6Hz，ArH)，7.33(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.71(t，1H，J＝5.8Hz，NHCH2)，7.88(s，2H，NH2).17-(N-己基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11c)按照合成氨基磺酸酯11a所描述的类似方法，从化合物8制备化合物11c。
FAB-MS m/z 461(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.86(t，3H，CH2CH3)，0.91(s，3H，CH3)，3.07(dt，2H，NHCH2)，6.34(s，1H，16-CH)，6.97(s，1H，ArH)，7.01(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.33(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.71(brt，1H，NHCH2)，7.88(s，2H，NH2).17-(N-异丁基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11d)按照合成氨基磺酸酯11a所描述的类似方法，从化合物8制备化合物11d。FAB-MS m/z 433(M＋H)+；1H NMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.85(d，6H，J＝6.9Hz，CH(CH3)2)，0.92(s，3H，CH3)，1.73(m，1H，CH(CH3)2)，2.78-3.00(m，2H，NHCH2)，6.36(s，1H，16-CH)，6.97(d，1H，J＝2.3Hz，ArH)，7.01(dd，1H，J＝2.3，8.6Hz，ArH)，7.33(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.74(t，1H，J＝6.3Hz，NHCH2)，7.88(s，2H，NH2).17-(N-叔丁基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11e)按照合成氨基磺酸酯11a所描述的类似方法，从化合物8制备化合物11e。
FAB-MS m/z 433(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.92(s，3H，CH3)，1.29(s，9H，C(CH3)3)，6.30(s，1H，16-CH)，6.97(d，1H，J＝2.3Hz，ArH)，7.01(m，1H，ArH)，7.03(s，1H，NHC(CH3)3)，7.33(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.89(s，2H，NH2).17-(N-甲基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11f)按照合成氨基磺酸酯11a所描述的类似方法，从化合物8制备化合物11f。
FAB-MS m/z 391(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.91(s，3H，CH3)，2.62(d，3H，J＝4.6Hz，NHCH3)，6.35(s，1H，16-CH)，6.97(s，1H，ArH)，7.02(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.33(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.69(d，1H，J＝4.6Hz，NHCH3)，7.88(s，2H，NH2).17-(N-乙基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11g)按照合成氨基磺酸酯11a所描述的类似方法，从化合物8制备化合物11g。
FAB-MS m/z 405(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.91(s，3H，CH3)，1.03(t，3H，J＝7.1Hz，CH2CH3)，3.12(m，2H，CH2CH3)，6.36(s，1H，16-CH)，6.97(d，1H，J＝2.3Hz，ArH)，7.01(dd，1H，J＝2.3，8.6Hz，ArH)，7.33(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.75(t，1H，J＝5.7Hz，NHCH2)，7.89(s，2H，NH2).17-(N-异丙基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11h)按照合成氨基磺酸酯11a所描述的类似方法，从化合物8制备化合物11h。
FAB-MS m/z 419(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.91(s，3H，CH3)，1.072(d，3H，J＝5.6Hz，CH(CH3)2)，1.074(d，3H，J＝6.6Hz，CH(CH3)2)，3.93(m，1H，CH(CH3)2)，6.36(s，1H，16-CH)，6.97(s，1H，ArH)，7.01(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.33(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.52(m，1H，NHCH)，7.88(s，2H，NH2).17-(N-仲丁基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11i)按照合成氨基磺酸酯11a所描述的类似方法，从化合物8制备化合物11i。 FAB-MS m/z 433(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.82(t，3H，J＝7.5Hz，CH2CH3)，0.92(s，3H，CH3)，1.04(d，3H.J＝6.6Hz，CHCH3)，3.75(m，1H，CHCH3)，6.34(s，1H，16-CH)，6.98(s，1H，ArH)，7.02(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.33(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.44(m，1H，NHCH)，7.88(s，2H，NH2).17-(N-叔戊基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11j)按照合成氨基磺酸酯11a所描述的类似方法，从化合物8制备化合物11j。 FAB-MS m/z 447(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.76(t，3H，J＝7.4Hz，CH2CH3)，0.92(s，3H，CH3)，1.22(s，3H，C(CH3)2)，1.23(s，3H，C(CH3)2)，6.29(s，1H，16-CH)，6.85(m，1H，NH)，6.98(s，1H，ArH)，7.02(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.33(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.87(s，2H，NH2).17-(N-异戊基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11k)按照合成氨基磺酸酯11a所描述的类似方法，从化合物8制备化合物11k。
FAB-MS m/z 447(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.88(d，6H，J＝6.6Hz，CH(CH3)2)，0.91(s，3H，CH3)，3.10(m，2H，NHCH2)，6.33(s，1H，16-CH)，6.97(s，1H，ArH)，7.01(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.33(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.69(t，1H，J＝5.6Hz，NHCH2)，7.88(s，2H，NH2).17-(N，N-二乙基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11l)按照合成氨基磺酸酯11a所描述的类似方法，从化合物8制备化合物11l。
TOF-MS m/z 433(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.99(s，3H，CH3)，1.05(t，6H，J＝6.9Hz，CH2CH3)，3.20-3.48(m，4H，CH2CH3)，5.76-5.82(m，1H，16-CH)，6.96(d，1H，J＝2.3Hz，ArH)，7.01(dd，1H，J＝2.3，8.6Hz，ArH)，7.31(d，1H，J＝8.6 Hz，ArH)，7.84(brs，2H，NH2).17-(N-甲基-N-丙基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11m)按照合成氨基磺酸酯11a所描述的类似方法，从化合物8制备化合物11m。 TOF-MS m/z 433(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.81(t，3H，J＝7.6Hz，CH2CH3)，0.99(s，3H，-CH3)，2.74-3.04(m，3H，NCH3)，3.20-3.40(m，2H，NCH2)，5.81(brs，1H，16-CH)，6.96(d，1H，J＝2.3Hz，ArH)，7.00(dd，1H，J＝2.3，8.6Hz，ArH)，7.31(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.84(brs，2H，NH2).17-(N-乙氧基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11n)按照图4给出的四步，化合物11n由化合物8a制备，8a由雌酮乙酸酯按照已知的方法制备(例如，TetrahedronLetters，26，1109-1112，1985)。 TOF-MSm/z421(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.92(s，3H，CH3)，1.15(t，3H，J＝6.9Hz，CH2CH3)，3.82(q，2H，J＝7.2Hz，CH2CH3)，6.29(s，1H，16-CH)，6.98(s，1H，ArH)，7.02(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.33(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.88(brs，2H，NH2)，10.93(s，1H，CONH).17-氨基甲酰基雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11o)化合物11o按照11a类似的方法合成，所不同的是用TMS-1代替BBr3。化合物11o由化合物12制备。
EI-MS m/z 376M+；1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.88(s，3H，CH3)，6.44(brs，1H，16-CH)，6.74(brs，2H，CONH2)，6.97(s，1H，ArH)，7.01(d，1H，J＝9Hz，ArH)，7.32(d，1H，J＝9Hz，ArH)，7.89(s，2H，SO2NH2).17-(N，N-二甲基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11p)化合物11p按照11a类似的方法合成，所不同的是用TMS-1代替BBr3。化合物11p由化合物12制备。
EI-MS m/z404M+；1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.98(s，3H，CH3)，2.93(brs，6H，N(CH3)2)，5.86(s，1H，16-CH)，6.97(s，1H，ArH)，7.02(d，1H，J＝9Hz，ArH)，7.31(d，1H，J＝9Hz，ArH)，7.89(s，2H，SO2NH2).17-(N-甲基-N-甲氧基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11t)化合物11t按照11a类似的方法合成，所不同的是用TMS-1代替BBr3。化合物11t由化合物12制备。1HNMR(250MHz，DMSO-d6)δ0.80(s，3H，CH3)，2.98(s，3H，NCH3)，3.40(s，3H，OCH3)，6.10(s，1H，16-CH)，6.95(s，1H，ArH)，7.15(dd，1H，J＝8.4Hz，ArH)，7.30(d，1H，J＝8.4Hz，ArH)，7.95(s，2H，NH2).17-(N，N-二正丙基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11q)化合物16q由化合物15通过羰基插入酰胺化制备；化合物11q按照11a类似的方法合成，所不同的是用TMS-1代替BBr3。
EI-MS m/z 460 M+；1HNMR(250MHz，DMSO-d6)δ0.90(t，6H，CH2CH3)，1.09(s，3H，CH3)，3.30-3.45(m，4H，NCH2)，5.85(s，1H，16-CH)，6.97(s，1H，ArH)，7.02(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.36(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.95(s，2H，SO2NH2).17-(N，N-二异丙基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11r)化合物16r由化合物15通过羰基插入酰胺化制备；化合物16r按照11a类似的方法合成，所不同的是用TMS-1代替BBr3。
EI-MS m/z 460 M+；1HNMR(250MHz，DMSO-d6)δ0.90(s，3H，CH3)，1.30(brs，12H，CH(CH3)2)，3.90(m，2H，CH(CH3)2)，5.45(s，1H，16-CH)，6.75(s，1H，ArH)，6.85(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.10(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.70(s，2H，SO2NH2).17-(N-乙基-N-异丙基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基氨基磺酸酯的合成(11s)化合物16s由化合物15通过羰基插入酰胺化制备；化合物16s按照11a类似的方法合成，所不同的是用TMS-1代替BBr3。
EI-MS m/z 446 M+；1HNMR(250MHz，DMSO-d6)δ1.20(s，3H，CH3)，3.40(m，2H，CH2CH3)，4.45(brs，1H，CH(CH3)2)，5.90(s，1H，16-CH)，7.15(s，1H，ArH)，7.30(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.50(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，8.05(s，2H，SO2NH2).
实施例3第三类化合物的制备参考数据对应于图7。3-苄氧基-17-(丙基羧基)雌-1，3，5(10)，16-四烯(化合物18)的合成将三氟甲磺酸酯(化合物15)(1.1g，2.37mmol)、乙酸钯(II)(45mg，0.20mmol)、1，3-双(二苯基膦基)丙烷(dppp)(66mg，0.16mmol)和正丙醇(8ml)在二甲基甲酰胺(DMF，10ml)中的混合物在60℃加热，并用一氧化碳鼓泡5.5小时。而后该反应混合物由乙酸乙酯稀释，用水洗涤。有机层用硫酸钠(Na2SO4)干燥，浓缩，残留物由硅胶色谱纯化，二氯甲烷(CH2Cl2)为洗脱液，得到纯α，β-非饱和酯(化合物18)(875mg，89.1％)。
m.p.84-85℃；1HNMR(300MHz，CDCl3)δ0.97(s，3H，CH3)，1.00(t，3H，J＝7.5Hz，CH3)，4.13(t，2H，J＝6.6Hz，OCH2)，5.05(s，2H，CH2PH)，6.7-7.4(m，9H，16-H and ArH).3-羟基-17-(丙基羧基)雌-1，3，5(10)，16-四烯(化合物19)的合成将化合物18(780mg，1.81mmol)溶解在CH2Cl2(16ml)中，并在室温下一次将三甲基硅碘化物(TMS-I，0.9ml，6.28mmol)加入到该反应混合物中，使该溶液在室温下搅拌15分钟。将水加入到该溶液中，使该混合物搅拌30分钟。该混合物用CH2Cl2萃取，有机层分离，用10％硫代硫酸钠溶液洗涤，以中和碘化物，该溶液用硫酸钠(Na2SO4)干燥。该溶液再蒸发，用硅胶色谱纯化，洗脱液为二氯甲烷(CH2Cl2)∶乙酸乙酯(EtOAc)(4∶1)，得到化合物19(590mg，95.7％)m.p.139.7-140.7℃。17-(正丙基羧基)雌-1，3，5(10)，16-四烯(化合物20a)的合成在0℃搅拌下向在CH2Cl2(30ml)中含有250mg(0.73mmol)化合物19和2，6-二叔丁基-4-甲基吡啶(DBMP)(0.6g，3.23mmol)的溶液分步加入氨磺酰氯(1g，8.6mmol)。在室温下使该溶液搅拌3.5小时。该溶液用水洗涤至到中性，用Na2SO4干燥，减压蒸发。所得到的固体用色谱纯化(CH2Cl2/EtOAc，4∶1)，得到293mg化合物20(95％)。
m.p.113.9-115.2℃；1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.89(s，3H，CH3)，0.92(t，3H，J＝7.5Hz，CH3)，4.04(t，2H，J＝6.3Hz，OCH2)，6.78(brs，1H，16-CH)，6.98(d，1H，J＝1.8Hz，ArH)，7.02(dd，1H，J＝1.8，8.4Hz，ArH)，7.33(d，1H，J＝8.4Hz，ArH)，7.91(s，2H，NH2).Analysis calculated forC22H29NO5SC，62.98；H，6.97；N，3.34.Found C，62.86；H，6.90；N，3.32.17-(乙基羧基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基-氨基磺酸酯(化合物20b)的合成化合物20b按化合物20a的类似方法合成。
1HNMR(250MHz，DMSO-d6)δ0.95(s，3H，18-CH3)，1.20(t，3H，J＝7.2Hz，CH3)，4.10(q，2H，J＝7.2Hz，CH2)，3.70(s，3H，CH3)，6.70(s，1H，16-CH)，6.92(s，1H，ArH)，6.98(dd，1H，J＝8.4Hz，ArH)，7.30(d，1H，J＝8.4Hz，ArH)，7.82(s，2H，NH2).17-(甲基羧基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-3-基-氨基磺酸酯(化合物20c)的合成化合物20c按化合物20a的类似方法合成。
1HNMR(250MHz，DMSO-d6)δ0.92(s，3H，CH3)，3.70(s，3H，CH3)，6.80(s，1H，16-CH)，6.98(s，1H，ArH)，7.0(dd，1H，J＝1.8，8.4Hz，ArH)，7.35(d，1H，J＝8.4Hz，ArH)，7.90(s，2H，NH2).
实施例4第二类化合物的制备参考数据对应于图11。17β-(N-异丁基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-三烯-3-基氨基磺酸酯的合成(化合物29d)按照合成化合物7所描述的类似方法，从化合物11d制备化合物29d。 TOF-MS m/z 435(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.60(s，3H，CH3)，0.84(d，6H，J＝6.9Hz，CH(CH3)2)，2.60-3.16(m，2H，NHCH2)，6.95(d，1H，J＝2.3Hz，ArH)，7.00(dd，1H，J＝2.3，8.6Hz，ArH)，7.34(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.49(brt，1H，J＝5.6 Hz，NHCH2)7.84(brs，2H，NH2).17β-(N-叔丁基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-三烯-3-基氨基磺酸酯的合成(化合物29e)按照合成化合物7所描述的类似方法，从化合物11e制备化合物29e。
FAB-MS m/z 435(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.59(s，3H，CH3)，1.26(s，9H，C(CH3)3)，6.89(s，1H，NH)，6.96(d，1H，J＝2.3Hz，ArH)，7.01(dd，1H，J＝2.3，8.6Hz，ArH)，7.34(d，1H，J＝8.6Hz.ArH)，7.87(s，2H，NH2).17β-(N-甲基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-三烯-3-基氨基磺酸酯的合成(化合物29f)按照合成化合物7所描述的类似方法，从化合物11f制备化合物29f。FAB-MS m/z 393(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.60(s，3H，CH3)，2.59(d，3H，J＝3.6Hz，NHCH3)，6.96(d，1H，J＝2.3Hz，ArH)，7.01(dd，1H，J＝2.3，8.6Hz，ArH)，7.34(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.29(m，1H，NHCH3)，7.87(s，2H，NH2).17β-(N-乙基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-三烯-3-基氨基磺酸酯的合成(化合物29g)按照合成化合物7所描述的类似方法，从化合物11g制备化合物29g。
FAB-MS m/z 407(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.60(s，3H，CH3)，1.01(t，3H，J＝7.3Hz，CH2CH3)，3.02(m，1H，CH2CH3)，3.16(m，1H，CH2CH3)，6.96(d，1H，J＝2.0Hz，ArH)，7.01(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.34(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.47(t，1H，J＝5.6Hz，NHCH2)，7.87(s，2H，NH2).17β-(N-异丙基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-三烯-3-基氨基磺酸酯的合成(化合物29h)按照合成化合物7所描述的类似方法，从化合物11h制备化合物29h。
TOF-MS m/z 421(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.58(s，3H，CH3)，1.00-1.10(m，6H，CH(CH3)2)，3.38-3.50(m，1H，CH(CH3)2)，6.95(d，1H，J＝2.3Hz，ArH)，7.00(dd，1H，J＝2.3，8.6Hz，ArH)，7.27(d，1H，J＝7.9Hz，NHCH)，7.33(d，1H，J＝8.6Hz，ArH).7.85(brs，2H，NH2).17β-(N-甲基-N-丙基-氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-三烯-3-基氨基磺酸酯的合成(化合物29m)按照合成化合物7所描述的类似方法，从化合物11m制备化合物29m。
TOF-MS m/z 435(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.60-0.68(m，3H，CH3)，0.76-0.88(m，3H，CH2CH3)，2.70-3.70(m，5H，N(CH3)CH2)，6.95(d，1H，J＝2.6Hz，ArH)，7.00(dd，1H，J＝2.6，8.6Hz，ArH)，7.32(d，1H，J＝8.6Hz，ArH).7.83(brs，2H，NH2).
实施例5第十类化合物的制备参考数据对应于图9。17-(N-正丙基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-[3，2，e]-1’2’3’-噁噻嗪-2，2，-二氧化物的合成(化合物22)在0℃将氢化钠(0.115g，5mmol)加入到化合物21(0.37g，1.0mmol)在DMF(10ml)的溶液中。使该溶液搅拌20分钟，加入氯代磺酰胺(0.73g，5mmol)。而后使该溶液搅拌6小时。将该反应混合物注入到冰冷却的饱和NH4Cl溶液，用EtOAc萃取。有机层分离，用水、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)。减压蒸发溶剂，残留物用硅胶色谱纯化(CHCl3∶EtOAc，15∶1)。
FAB-MSm/z 428(M＋H)+；NMR(250 MHz，DMSO-d6)δ0.65(t，3H，CH2CH3)，0.70(s，3H，CH3)，6.15(s，1H，16-CH)，7.01(s，1H，ArH)，7.55(m，1H，NH)，7.70(s，1H，ArH)，8.90(s，1H-CH＝N-).17-(N-正丙基氨基甲酰基)雌-1，3，5(10)，16-四烯-[3，2，e]-3’4’-二氢-1’2’3’-噁噻嗪-2，2’-二氧化物的合成(化合物23)在0℃向化合物22(0.428g，1mmol)的甲醇(4ml)溶液加入NaBH4(0.037g，0.96mmol)。使该反应物在0℃搅拌1小时，将该混合物注入到饱和NH4Cl溶液，用EtOAc萃取。有机层分离，用水、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)。减压蒸发溶剂，残留物用硅胶色谱纯化(EtOAc∶Pet醚，1∶1)。
FAB-MS m/z 430(M＋H)+；1HNMR(250MHz，DMSO-d6)δ0.65(t，3H，CH2CH3)，0.75(s，3H，CH3)，4.30(s，2H，CH2NHSO2)，6.20(s，1H，16-CH)，6.55(s，1H，ArH)，7.05(s，1H，ArH)，7.60(m，1H，amide NH)，8.25(m，1H，CH2NHSO2).
实施例6第六类化合物的制备参考数据对应于图12。17β-(丁酰基氨基)雌-1，3，5(10)-三烯-3-基氨基磺酸酯的合成(化合物30)化合物30按照Li，等人提出的方法(Steroids，63425-32(1998))由化合物24分三步(酰胺化、脱保护和氨磺酰化)制备。
FAB-MS m/z 421(M＋H)+；1HNMR(270MHz，DMSO-d6)δ0.65(s，3H，CH3)，0.86(t，3H，J＝7.6Hz，CH2CH3)，2.07(m，2H，COCH2)，3.81(m，1H，17-CH)，6.96(d，1H，J＝2.3Hz，ArH)，7.00(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.32(d，1H，J＝8.6Hz，ArH)，7.48(d，1H，J＝8.9Hz，NHCO)，7.87(s，2H，NH2).
实施例7此实施例应用体外转化试验方法，对按照上述方法制备化合物进行了抑制硫酸酯酶的生物活性试验，具体试验化合物如下表2所示。正如本领域熟练技术人员可以理解的，本试验是以对3H-雌酮硫酸酯通过雌酮硫酸酯酶的作用转化为3H-雌酮为基础的。酶试验的最后体积是0.15ml[6.7-3H]雌酮硫酸酯(最后浓度3.3nmol/L；300,000dpm/管)；将各种浓度DMSO溶液的抑制剂和重组体的人雌酮硫酸酯酶(33ng/管)的磷酸盐缓冲溶液加入1.5ml微型管，其中含有0.25M蔗糖和0.04M烟酰胺，pH为7。重组体的人雌酮硫酸酯酶可由ChineseHamster Ovary(CHO)细胞中部分纯化，在该细胞中人的雌酮硫酸酯酶cDNA被转染。该试验由加入基质的雌酮硫酸酯开始。于37℃孵化60分钟后，加入0.5ml甲苯使试验停止。同时孵化的对照样品没有抑制剂。空白样品在没有雌酮硫酸酯酶的情况下孵化。停止反应的样品涡旋搅拌30秒，离心(9,000rpm，5分钟)。从每个停止反应的样品中得到250微升的甲苯，测定生成产物的数量。将含有抑制剂的样品所生成的产物与同时进行反应的对照样品(没有抑制剂)进行比较，可得出对照样品的百分抑制率，该百分抑制率等于 对每种化合物在一定的浓度范围内(0.025-2.5nM)进行试验，以测定剂量-响应曲线，并计算IC50值。
在各个试验中，每个浓度进行三次重复试验。在体外转化试验中，两种化合物对雌酮硫酸酯酶均显示出剂量依赖抑制活性。IC50值如表2所示，IC50值表示在本试验中产成50％抑制时的浓度。通过对对照百分数和浓度的关系进行线性回归分析(log10)可得到IC50值，得到的方程式用于测定得到50％抑制时的浓度。
表2
实施例8以实施例6描述的方法对化合物7、29d、29h和29m进行试验，结果列于下表3。
表3 为了说明本发明的目的，上文描述了本发明的具体实施方案，很显然，对本领域熟练技术人员而言，在不脱离本发明权利要求书所定义的范围内，本发明详细描述的各种变种都是可以实现的。


本发明公开了新的用于治疗雌激素依赖型疾病的硫酸酯酶抑制剂化合物,这些化合物提出含有在其C17上被取代的类固醇核。本发明还公开了这些化合物的制备方法,以及它们在给患者进行治疗和/或预防性处理上的应用。