专利名称：一种金钱鱼人工诱导自然产卵和受精的方法金钱鱼隶属S卢形目(Perciformes),金钱鱼科(Scatophagidae)，金钱鱼属(Scatophagus),为热带-亚热带广温广盐性种，分布于印度_太平洋水域，从科威特至瓦努阿图岛国，日本南部至伯劳、密克罗西尼亚群岛等广大水域均有分布。金钱鱼是目前我国有记录的该科鱼类中唯一的物种，主要分布在南海、台湾海峡和东海近岸岩礁及海藻丛生的海水或咸淡水交汇水域。 金钱鱼是一种具有很高观赏价值和食用价值的名贵海水经济鱼类。生长快、抗病抗逆性强、不仅可以在海水和咸淡水中正常生长和发育，而且能在淡水中养殖生产，生理生态习性独特，为海、淡水养殖的高值优良物种。因其偏植食性，对食物蛋白要求不高，养殖成本较低，经济价值极高，是近年来我国南方沿海池塘和网箱养殖新的重要种类，养殖开发前景广阔。由于近海环境日趋恶化，酷渔滥捕，严重影响金钱鱼渔业资源繁衍再生，种苗数量逐年锐减，价格贵昂，依靠野生种苗已经不能满足养殖生产的需要，制约了养殖业健康持续发展。开展金钱鱼的人工繁育技术的研究与开发，不但有利于自然资源的保护、恢复和持续利用，也是解决当前养殖生产种苗匮乏最快捷有效的措施。要实现金钱鱼种苗人工繁殖和产业化育苗生产，需要根据金钱鱼对水域环境的适应性和生殖生理生态特性，解决亲鱼培育和营养需求，性腺催熟、诱导生殖和自然受精等技术问题。国内外有关金钱鱼研究资料极少，种质繁育技术研究报道缺乏，尚无可以用于人工诱导生殖的实用技术方法。
本发明的目的是能够在网箱蓄养条件下通过营养调节和必要的环境优化，促使金钱鱼性腺正常成熟发育，并在外源激素作用下诱发卵母细胞快速发育、成熟及自然产卵与受精的金钱鱼人工诱导自然产卵和受精的方法，该方法效果显著和稳定，能适应金钱鱼养殖业对人工繁育种苗的需求。本发明的金钱鱼人工诱导自然产卵和受精的方法，其特征在于，包括以下步骤(I)在金钱鱼繁殖期前2个月，遴选体质健康的亲鱼，在近岸港湾海区浮筏式网箱遮荫下进行营养强化培养，养殖海区海水流速5 20cm. s—1，喂以配合饲料和优质海藻，配合饲料和优质海藻的日投喂总量为亲鱼总质量的2 4% ；(2)金钱鱼人工诱导自然产卵和受精步骤(I)中的经过营养改良和强化培育的金钱鱼亲鱼，于生殖期的51月份，选取体质健康、腹部略膨胀的满2龄以上的亲鱼，卵母细胞饱满、卵黄颗粒细小均匀致密，卵径425 u nT500 u m、体重400g以上、性腺发育至IV期以上的雌鱼和轻挤腹部有乳白色精液流畅、体重200g以上的成熟雄鱼；在雌鱼胸鳍基部注射激素，激素为a类或b类当中的一种，其种类和剂量为a类激素促黄体生成激素释放激素类似物(Luteinzing Hormone Releasing Hormone-analogue, LHRH-A2) 10 20. 0 u g/Kg Bff(体重)，绒毛膜促性腺激素(Human Chorionic Gonadotropin, HCG) 500 1500IU/Kg Bff (体重)，马来酸地欧酮(Domperidone, DOM) 2 5mg/Kg Bff (体重),注射方法为将促黄体生成激素释放激素类似物(LHRH-A2)、绒毛膜促性腺激素(HCG)和马来酸地欧酮(DOM)按照上述剂量混合悬浮于动物生理盐水中，进行注射；b类激素、复方鲑鱼促性腺激素释放激素类似物(Compound S-GnRHa for Injection)10^15 u g/Kg Bff (体重)，复方鲑鱼促性腺激素释放激素类似物(S-GnRHa)按照其剂量也悬浮于动物生理盐水中，一次性注射；在雄鱼的胸鳍基部注射a类激素，其激素种类与雌鱼相同，剂量为雌鱼的(T1/6，注射方法与雌鱼相同，雌鱼和雄鱼的生殖环境为海区的网箱中或繁殖水池，其水温为25°C 29°C，盐度为22%广28%0，注射后的效应期内每天向繁殖区域内水面喷水，而后雄鱼排精，雌鱼产卵受精。所述的步骤(I)中的遴选体质健康的亲鱼，优选其幼鱼阶段投喂配合饲料进行饲养。 所述的在雌鱼的胸鳍基部注射a类激素，其注射方法是将促黄体生成激素释放激素类似物(LHRH-A2)、绒毛膜促性腺激素(HCG)和马来酸地欧酮(DOM)按照上述剂量混合悬浮于动物生理盐水中，分2次注射，注射间隔时间为24小时，第一次注射剂量为总量的1/3，第二次为余量。所述的雄鱼的胸鳍基部注射a类激素优选是将促黄体生成激素释放激素类似物(LHRH-A2)、绒毛膜促性腺激素(HCG)和马来酸地欧酮(DOM)按照上述剂量混合悬浮于动物生理盐水中，一次性注射。所述的在雌鱼和雄鱼的胸鳍基部注射激素优选作为亲鱼的雌鱼和雄鱼在含浓度为20mg/L呋喃西林抗菌素和15(T200X10_6 (v/v)乙二醇苯醚的海水中麻醉。减轻亲鱼不良应激反应和肌体损伤感染，有利于生殖操作和保持亲鱼健康。所述的配合饲料是现有技术中的饲料，可以从市场上购买。所述的每天向繁殖区域内水面喷水，优选其喷水时间为60分钟，激素催产效应期间每天向繁殖区域的水面洒水60分钟，有利于刺激雌鱼卵母细胞最后成熟和自然产卵受不目o所述的动物生理盐水为质量分数0. 9%NaCl溶液，上述4种激素均采用0. 9%NaCl动物生理盐水配制后按一定比例均匀混合形成乳白色悬浊液，激素注射液现用现配或配制后暂时冷藏于冰壶中备用。使用时充分摇匀，避免沉淀。金钱鱼亲鱼通常在每年5月进入繁殖期，对金钱鱼亲鱼营养改良和强化培养一般在水温开始缓慢上升时进行，即在金钱鱼亲鱼繁殖季节前的2月份对体质健康的亲鱼进行营养成分改良和强化培养。本发明的优点是亲鱼可以在自然海区的网箱中通过营养优化、繁殖条件的调节和外源激素相结合促使金钱鱼性腺发育和成熟，可以在养殖海区产卵网箱中或水泥繁殖池等人工养殖区域内人工诱导自然产卵和受精。雌亲鱼催熟有效率达89. f 100%，产卵率79. 2^94. 0%，而雄鱼成熟率达100%，亲鱼产卵总数达4800万粒。该方法简便、操作控制方便，技术成本低，效果显著和稳定，而且可以根据性腺发育状态和海区生态条件较准确判断亲鱼的成熟和产卵时间，为金钱鱼种苗繁育生产提供受精卵及生物学研究材料。实施例3 (I)亲鱼是野生苗种经过人工培育而成，幼鱼阶段投喂配合饲料为主。在金钱鱼繁殖期前2个月，遴选体质健康的亲鱼，在近岸港湾海区浮筏式网箱遮荫下进行营养强化培养，养殖海区海水流速5 20cm. 之间，喂以广东省粤海饲料集团生产的粤海牌A系列海水鱼配合饲料和优质海藻浒苔，配合饲料与优质海藻的质量比例为3:1，配合饲料和优质海藻的日投喂总量为亲鱼总质量的2 4% ；(2)金钱鱼人工诱导自然产卵和受精步骤(I)中的经过营养改良和强化培育的金钱鱼亲鱼，于生殖期的6月份，选取体质健康、腹部略膨胀的满2龄的雌鱼34尾，卵母细胞饱满、卵黄颗粒细小均匀致密，卵径450 475 ii m、体重400g 450g之间、卵巢发育至IV期以上和轻挤腹部有乳白色精液流畅、体重200g 225g之间的成熟雄鱼；在雌鱼胸鳍基部注射激素，激素的种类和剂量为促黄体生成激素释放激素类似物(Luteinzing HormoneReleasing Hormone-analogue, LHRH-A2) 15 u g/Kg Bff (体重)，绒毛膜促性腺激素(HumanChorionic Gonadotropin, HCG) lOOOIU/Kg Bff (体重)，马来酸地欧酮(Domperidone,DOM) 2mg/Kg BW(体重);注射方法为将促黄体生成激素释放激素类似物(LHRH-A2)、绒毛膜促性腺激素(HCG)和马来酸地欧酮(DOM)按照上述剂量混合悬浮于动物生理盐水中，然后分2次注射，注射间隔时间为24小时，第一次注射剂量为总量的1/3，第二次为余量；雄鱼不注射激素，在雌鱼的胸鳍基部注射激素是作为亲鱼的雌鱼在含浓度为20mg/L的呋喃西林抗菌素和200X10_6 (v/v)乙二醇苯醚的海水中麻醉后注射，这样就可以减轻亲鱼不良应激反应和肌体损伤感染，有利于生殖操作和保持亲鱼健康。雌鱼和雄鱼的生殖环境为海区40目孔径筛絹网箱中，其在海区水温26. 5^28. (TC、盐度26%。条件下，注射后的效应期内每天向繁殖区域内的网箱水面喷水60分钟，第二次注射激素后30小时雌鱼产卵受精。在自然海区产卵网箱中生殖，雌鱼产卵率85. 2%，催熟有效率达94. 1%。实施例4 (I)亲鱼是野生苗种经过人工培育而成，幼鱼阶段投喂配合饲料为主。在金钱鱼繁殖期前2个月，遴选体质健康的亲鱼，在近岸港湾海区浮筏式网箱遮荫下进行营养强化培养，养殖海区海水流速5 20cm. 之间，喂以广东省粤海饲料集团生产的粤海牌A系列海水鱼配合饲料和优质海藻浒苔，配合饲料与优质海藻的质量比例为3:1，配合饲料和优质海藻的日投喂总量为亲鱼总质量的2 4% ；(2)金钱鱼人工诱导自然产卵和受精步骤(I)中的经过营养改良和强化培育的金钱鱼亲鱼，于生殖期的6月份，选取体质健康、腹部略膨胀的满2龄的雌鱼53尾，卵母细胞饱满、卵黄颗粒细小均匀致密，卵径450 485 ii m、体重400g 450g之间、卵巢发育至IV期以上和轻挤腹部有乳白色精液流畅、体重200g 225g之间的成熟雄鱼；在雌鱼胸鳍基部注射激素，激素的种类和剂量为促黄体生成激素释放激素类似物(Luteinzing HormoneReleasing Hormone-analogue, LHRH-A2) IOu g/Kg Bff (体重)，绒毛膜促性腺激素(HumanChorionic Gonadotropin, HCG)500IU/Kg BW(体重)，马来酸地欧酮(Domperidone, DOM) 3mg/Kg Bff (体重)；注射方法为将促黄体生成激素释放激素类似物(LHRH-A2)、绒毛膜促性腺激 素(HCG)和马来酸地欧酮(DOM)按照上述剂量混合悬浮于动物生理盐水中，然后一次性注射；雄鱼不注射激素，在雌鱼的胸鳍基部注射激素是作为亲鱼的雌鱼在含浓度为20mg/L的呋喃西林抗菌素和200X10_6 (v/v)乙二醇苯醚的海水中麻醉后注射，这样可以减轻亲鱼不良应激反应和肌体损伤感染，有利于生殖操作和保持亲鱼健康。雌鱼和雄鱼的生殖环境为深为I. 7m、有效水体为30m3的圆形水泥池中繁殖，25. 5^27. (TC、盐度25%。 27%。的条件下，注射后的效应期内每天向繁殖区域内水面喷水60分钟，效应期36小时，雌鱼产卵率79. 2%，催熟有效率达90. 5%。实施例5 (I)亲鱼是野生苗种经过人工培育而成，幼鱼阶段投喂配合饲料为主。在金钱鱼繁殖期前2个月，遴选体质健康的亲鱼，在近岸港湾海区浮筏式网箱遮荫下进行营养强化培养，养殖海区海水流速5 20cm. S-1之间，喂以广东省粤海饲料集团生产的粤海牌A系列海水鱼配合饲料和优质海藻浒苔，配合饲料与优质海藻的质量比例为3:1，配合饲料和优质海藻的日投喂总量为亲鱼总质量的2 4% ；(2)金钱鱼人工诱导自然产卵和受精步骤(I)中的经过营养改良和强化培育的金钱鱼亲鱼，于生殖期的5月份，选取体质健康、腹部略膨胀的满2龄和3龄的雌鱼共60尾，卵母细胞饱满、卵黄颗粒细小均匀致密，卵径450 475 ii m、体重400g飞OOg之间、卵巢发育至IV期以上和轻挤腹部有乳白色精液流畅、体重200g 250g之间的成熟雄鱼；在雌鱼胸鳍基部注射激素，激素的种类和剂量为复方鲑鱼促性腺激素释放激素类似物IOii g/Kg Bff ；注射方法为将复方鲑鱼促性腺激素释放激素类似物悬浮于动物生理盐水中，然后一次性注射；雄鱼不注射激素，在雌鱼的胸鳍基部注射激素是作为亲鱼的雌鱼在含浓度为20mg/L呋喃西林抗菌素和200X10_6 (v/v)乙二醇苯醚的海水中麻醉后注射，这样可以减轻亲鱼不良应激反应和肌体损伤感染，有利于生殖操作和保持亲鱼健康。雌鱼和雄鱼的生长环境为海区40目孔径筛絹网箱中，其在海区水温28. (T28. 5°C、盐度22%。 24%。条件，注射后的效应期内每天向繁殖区域内网箱水面喷水60分钟，效应期32小时，雌鱼产卵率86. 7%，催熟有效率达96. 6%。实施例6 (I)亲鱼是野生苗种经过人工培育而成，幼鱼阶段投喂配合饲料为主。在金钱鱼繁殖期前2个月，遴选体质健康的亲鱼，在近岸港湾海区浮筏式网箱遮荫下进行营养强化培养，养殖海区海水流速5 20cm. 之间，喂以广东省粤海饲料集团生产的粤海牌A系列海水鱼配合饲料和优质海藻浒苔，配合饲料与优质海藻的质量比例为3:1，配合饲料和优质海藻的日投喂总量为亲鱼总质量的2 4% ； (2)金钱鱼人工诱导自然产卵和受精步骤(I)中的经过营养改良和强化培育的金钱鱼亲鱼，于生殖期的6月份，选取体质健康、腹部略膨胀的满2龄的雌鱼共50尾，卵母细胞饱满、卵黄颗粒细小均匀致密，卵径45(T500 u m、体重400g 450g之间、卵巢发育至IV期以上和轻挤腹部有乳白色精液流畅、体重200g 250g之间的成熟雄鱼；在雌鱼胸鳍基部注射激素，激素的种类和剂量为复方鲑鱼促性腺激素释放激素类似物15ii g/KgBW ;注射方法为将复方鲑鱼促性腺激素释放激素类似物悬浮于动物生理盐水中，然后一次性注射；雄鱼不注射激素，在雌鱼的胸鳍基部注射激素是作为亲鱼的雌鱼在含浓度为20mg/L的呋喃西林抗菌素和200X10_6 (v/v)乙二醇苯醚的海水中麻醉后注射，这样可以减轻亲鱼不良应激反应和肌体损伤感染，有利于生殖操作和保持亲鱼健康。雌鱼和雄鱼的生殖环境为海 区40目孔径筛絹网箱中，其在海区水温28. (T29. (TC、盐度22%。 25%。条件，注射后的效应期内每天向繁殖区域内的网箱水面喷水60分钟，效应期30小时，雌鱼产卵率94. 0%，催熟有效率达100%。

本发明公开了一种金钱鱼人工诱导自然产卵和受精的方法。本发明的亲鱼可以在自然海区的网箱中通过营养优化、繁殖条件的调节和外源激素相结合促使金钱鱼性腺发育和成熟，可以在养殖海区产卵网箱中或水泥繁殖池等人工养殖区域内人工诱导自然产卵和受精。雌亲鱼催熟有效率达89.1~100%，产卵率79.2~94.0%，而雄鱼成熟率达100%，亲鱼产卵总数达4800万粒。该方法简便、操作控制方便，技术成本低，效果显著和稳定，而且可以根据性腺发育状态和海区生态条件较准确判断亲鱼的成熟和产卵时间，为金钱鱼种苗繁育生产提供受精卵及生物学研究材料。