专利名称：沙棘种子油脂质体化制备工艺的制作方法沙棘(Hippophae rhamnoides Linn.)为胡颓子科(Elaeagnaceae)沙棘属 (Hippophae),是一种落叶性灌木，其特性是耐旱，抗风沙，可以在盐碱化土地上生存， 因此被广泛用于水土保持。沙棘种子含油率10% 12%，沙棘种子油中含有206种对人 体有益的活性物质，其中有46种生物活性物质，含有大量的维生素E、维生素A、黄酮 等，具有抗疲劳和增强机体活力及抗癌等特殊药理性能，具有保护和加速修复胃黏膜、 增加肠道双歧杆菌的药性，有降减血浆胆固醇、减少血管壁中胆固醇含量的作用，能防 治高血脂症和动脉粥样硬化症，并有促进伤口愈合的作用。沙棘种子油作为一种功能性 植物油，具有较高的开发利用价值。脂质体具有双分子层结构，主要化学成分为磷脂和胆固醇，这种结构能够携带 各种亲水的、疏水的和两亲的物质。磷脂分散在水中自然形成多层囊泡，每层均为脂质 的双分子层；囊泡中央和各层之间被水相隔开，双分子层厚度约为4纳米。脂质体是一 种定向药物载体，属于靶向给药系统的一种新剂型，具有靶向、长效释放的特点，且其 制备的膜材为天然高分子材料，毒副作用小，可在体内生物降解。脂质体可以将水性或 油性成分包埋在直径为纳米级的微粒中，这种微粒具有类细胞结构，进入人体内主要被 网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功能，并改变被包封有效成分物的体内分布， 使有效成分在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中积蓄，从而提高治疗指数，减少有效物的 治疗剂量和降低有效物的毒性。
本发明所要解决的技术问题是提供一种简便易行的沙棘种子油脂质体化制备工 艺。为解决上述问题，本发明所述的一种沙棘种子油脂质体化制备工艺，包括以下 步骤(1)将原料沙棘种子油、磷脂、胆固醇、去离子水同时加入密封釜中；所述磷 脂与所述胆固醇的质量比为30 1 60 1;所述沙棘种子油与总脂材的质量比为 1 1.55 1 3.05;所述去离子水与所述沙棘种子油、磷脂、胆固醇三者总量的质量比 为 1 1 ；(2)向密封釜中加入CO2,并在温度为40 50°C、压力为15 25Mpa的超临界 条件下进行原料分散，20 40min后各原料成分充分分散到CO2流体中；(3)对CO2流体按每分钟降温0.055 0.095°C、每分钟降压0.07 0.15Mpa的 速度进行90 150分钟的分离后，得到初级脂质体样品；(4)将所述初级脂质体样品在温度为34 38°C、压力为5.6 7.6Mpa的CO2流体中维持60min 120min ；(5)将所述初级脂质体样品按80 160mL计，在常压、氮气阻氧条件下进行超 声均质处理后，形成沙棘种子油脂质体产品。所述步骤(1)中的磷脂为植物或动物源性卵磷脂。所述步骤(1)中的总脂材的质量是指所述磷脂和所述胆固醇两者的质量和。所述步骤(5)中的超声均质处理条件是指温度为30 37°C，超声功率为40 60KHz,超声处理2 4次，每次5 lOmin，间隔3 6min。本发明与现有技术相比具有以下优点1、本发明首次对沙棘种子油脂质体化制备工艺进行了研究，确定了在CO2超临 界状态下制备沙棘种子油脂质体的工艺。2、由于本发明采用CO2超临界状态下分散原料，因此，分离CO2时生成的脂质 体包封率大、纳米程度高。3、由于本发明采用超临界CO2流体，而超临界CO2具有抗氧化、灭菌等作用， 因此，有利于保证和提高产品质量；同时，由于超临界CO2流体溶解过程的操作参数容 易控制，因此，溶解速度快。4、由于CO2便宜易得，与有机溶剂相比有较低的运行费用，因此，本发明可节 省劳动力和大量有机溶剂，减少了 “三废”污染，实现了工艺完全绿色化，无化学残留 和环境污染的目的。5、本发明工艺流程简单，操作方便，可广泛应用于脂溶性活性成分脂质体化的 制备和相关产品开发的需求。(2)向密封釜中加入CO2,并在温度为50°C、压力为25Mpa的超临界条件下进行 原料分散，40min后各原料成分充分分散到CO2流体中。(3)对CO2流体按每分钟降温0.095°C、每分钟降压0.15Mpa的速度进行150分 钟的分离后，得到初级脂质体样品。该初级脂质体样品的包封率在75%以上。 (4)将初级脂质体样品在温度为38 °C、压力为7.6Mpa的CO2流体中维持 12 Omin ο(5)将初级脂质体样品按160mL计，在常压、氮气阻氧条件下进行超声均质处 理后，形成沙棘种子油脂质体产品。其中超声均质处理条件是指温度为37°C，超声功率为60KHz，超声处理4次， 每次IOmin，间隔6min。实施例3沙棘种子油脂质体化制备工艺，包括以下步骤(1)将原料沙棘种子油、磷脂、胆固醇、去离子水同时加入密封釜中。其中磷脂 与胆固醇的质量比为45 1 ；沙棘种子油与总脂材的质量比为1 2.30;去离子水与沙 棘种子油、磷脂、胆固醇三者总量的质量比为1 1。(2)向密封釜中加入CO2,并在温度为45°C、压力为20Mpa的超临界条件下进行 原料分散，30min后各原料成分充分分散到CO2流体中。(3)对CO2流体按每分钟降温0.075°C、每分钟降压O.llMpa的速度进行120分 钟的分离后，得到初级脂质体样品。该初级脂质体样品的包封率在75%以上。(4)将初级脂质体样品在温度为36°C、压力为6.6Mpa的CCV流体中维持90min。(5)将初级脂质体样品按120mL计，在常压、氮气阻氧条件下进行超声均质处 理后，形成沙棘种子油脂质体产品。其中超声均质处理条件是 指温度为34°C，超声功率为50KHz，超声处理3次， 每次7min，间隔4min。上述实施例1 3中的总脂材的质量是指所述磷脂和所述胆固醇两者的质量和， 且磷脂为植物或动物源性卵磷脂。本发明涉及一种沙棘种子油脂质体化制备工艺，该工艺包括以下步骤(1)将原料沙棘种子油、磷脂、胆固醇、去离子水同时加入密封釜中；(2)向密封釜中加入CO2，并在超临界条件下进行原料分散；(3)对CO2流体进行减压、降温分离后，得到初级脂质体样品；(4)将所述初级脂质体样品在CO2流体中维持60～120min；(5)将所述初级脂质体样品在常压、氮气阻氧条件下进行超声均质处理后，形成沙棘种子油脂质体产品。本发明工艺流程简单，操作方便，可广泛应用于脂溶性活性成分脂质体化的制备和相关产品开发的需求。